As pilhas embrionárias humanas do rim 293 (HEK293, HEK-293, ou HEK) são uma das linha celular as mais comuns usadas para fins de investigação, em segundo somente às pilhas HeLa. Sua popularidade é devido a diversas propriedades tais como a manutenção, o vigor, e a facilidade fáceis do transfection.
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A história das pilhas HEK293
A linha celular HEK293 foi produzida inicialmente em 1973 por uma equipe conduzida por Alex camionete der Eb em Leiden (Países Baixos) das pilhas embrionárias humanas fetal normais do rim. Estas pilhas foram criadas depois do transfection com o ADN cortado do vírus adenóide 5, conduzindo à incorporação de algum do genoma adenoviral no cromossoma humano 19 do genoma de pilha fetal. O nome 293 vem do facto de que era a experiência 293 de Frank Graham (um do postdoc de camionete de Ebrd ).
Estas pilhas foram pensadas inicialmente para originar de uma pilha endothelial, epitelial, ou fibroblástica do rim fetal. Contudo, a evidência recente nas características celulares das pilhas HEK293 conduziu à sugestão que podem realmente originar de uma pilha fetal neuronal do rim.
Seguindo arranjando em seqüência estudos, igualmente identificou-se que estas pilhas têm um karyotype muito complicado, com cópias múltiplas dos cromossomas. Por exemplo, estas pilhas têm quatro cópias do cromossoma 17. Igualmente estabeleceu-se que estas pilhas não têm um único cromossoma de Y - mas para ter três cromossomas de X - sugerir aquele o feto de que foram obtidas eram uma fêmea.
Vantagens das pilhas HEK293
As pilhas HEK293 são utilizadas freqüentemente na pesquisa por vários motivos. Em primeiro lugar, são muito fáceis de crescer e manter, com reprodutibilidade alta, qual lhes faz excedente preferível outras linha celular menos-robustas e de crescimento lento.
Além disso, são muito eficientes na produção da proteína e acessíveis para o transfection. Com a inserção de vectores do plasmídeo, a maquinaria sintética da proteína da pilha pode ser influenciada para fazer a proteína transfected, utilizando a informação genética introduzida.
Aplicações das pilhas HEK293
Estas pilhas foram amplamente utilizadas na pesquisa. Por exemplo, foram usados para analisar o efeito das drogas nos canais do sódio, as interacções entre proteínas diferentes e para produzir proteínas e drogas.
Por exemplo, esta linha celular transfected com uma proteína ativada de recombinação C, que fosse sintetizada então, isolada, e testada mais tarde para o tratamento da sepsia. Este exemplo, demonstra conseqüentemente a eficácia desta linha celular na expressão de proteínas novas. Além disso, estas pilhas podem ser usadas para a proliferação adenoviral do vector como contêm diversos genes adenoviral mas faltam os genes virais chaves perigosos (E1 e E2) que fazem os vectores produzidos muito mais seguros.
A revelação de continuação das pilhas HEK293
Uma revelação recente conduziu à produção de uma variação da linha celular HEK293, chamada HEK 293T. Esta linha celular ligeira diferente contem o grande T antígeno de SV40. Finalmente, isto significa que os plasmídeo transfected de SV40-containing podem se submeter à réplica episomal, que aumenta a quantidade de proteína de recombinação/produção retroviral.
Fontes
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