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Como os Immunoassays trabalham?

Os Immunoassays são usados na pesquisa e nos laboratórios do hospital, primeiramente monitorando a concentração de moléculas específicas utilizando a interacção original entre um anticorpo e seu antígeno específico.

Placa do poço do Immunoassay 96 - uma foto por Val3ri0Val3ri0 | Shutterstock

Depois do primeiro gravou immunoassays nos anos 50 por Yalow e Berson, a indústria cresceu dramàtica, alcançando um valor líquido de $17 bilhões em 2012.

Estes métodos melhoram a intervenção médica, avaliar a progressão e a severidade da selecção terapêutica aumentada da doença, e finalmente da informação. Podem igualmente ser usados na pesquisa, identificando a concentração de várias moléculas biológicas. Além disso, em ajustes industriais, estes métodos podem ser aplicados à contaminação do monitor e à qualidade dos produtos. Há uns vários tipos de immunoassay, como descrito abaixo.

Radioimmunoassay

Este método tradicional do immunoassay utiliza um antígeno anexado a um isótopo radioactivo, limite a um anticorpo. Quando a amostra é adicionada, compete com este antígeno radioactivo-etiquetado, substituindo a e ligando ao anticorpo.

Enquanto a concentração da amostra aumenta, o antígeno radioactivo está diluído para fora. Uma vez que os antígenos desatados são lavados afastado, a quantidade de radioactividade pode ser determinada, que indica inversa a concentração do antígeno do alvo dentro da amostra.

Este método utiliza as substâncias radioactivas que têm vários riscos para a saúde associados, e, conseqüentemente, diversos métodos novos foram desenvolvidos que são muito menos perigosos.

Immunoassays da enzima

O immunoassay enzima-ligado igualmente referido como um ELISA, utiliza uma enzima ligada a um anticorpo. Depois da incubação deste anticorpo com o antígeno do alvo, uma carcaça é adicionada à solução que é convertida em um produto colorido pela enzima. O nível de mudança da cor pode então ser determinado para indicar a concentração de antígeno.

Fluoroimmunoassay

Neste ensaio, os anticorpos são etiquetados com uma molécula fluorescente. Conseqüentemente, uma vez que limitaram ao antígeno do alvo, o nível da fluorescência pode ser determinado que indica a concentração de antígeno.

Immunoassay quimiluminescente

Os immunoassays quimiluminescentes são similares aos fluoroimmunoassays e ao ELISAs, mas pelo contrário, utilize a luminescência para indicar a concentração do antígeno. Este método exige um anticorpo emissor-etiquetado, que anexe aos antígenos do alvo.

Quando esta etiqueta do emissor é entusiasmado, libera a luz enquanto os elétrons se movem para um estado de energia mais alta e se recuam então para baixo outra vez. Esta excitação é realizada por um coreactant ou por um catalizador. Total, a quantidade de luz emissora indica a quantidade de antígeno actual dentro da amostra.

Contando o immunoassay

Finalmente, no immunoassay de contagem, os grânulos feitos do poliestireno são cobertos com os lotes de anticorpos complementares. O antígeno do alvo liga então a estes grânulos, formando grupos. Os grânulos desatados são determinados com um contador de pilha, que indique inversa a quantidade de antígeno dentro da amostra.

Classificações mais adicionais

Dentro destes tipos diferentes de immunoassay, há igualmente diversos formatos diferentes. Por exemplo, em um immunoassay competitivo, o antígeno do alvo desloca um antígeno etiquetado do local obrigatório do anticorpo; conseqüentemente, a quantidade deslocada indica a quantidade de antígeno do alvo dentro de uma amostra.

Contudo, em um immunoassay não-competitivo, os anticorpos são etiquetados, e a quantidade de ligação indica a quantidade de antígeno do alvo dentro de uma amostra. Tais ensaios não-competitivos igualmente exibem vantagens adicionais tais como uma escala de trabalho mais larga e uma precisão mais alta.

Fontes

Further Reading

Last Updated: Jan 18, 2019

Hannah Simmons

Written by

Hannah Simmons

Hannah is a medical and life sciences writer with a Master of Science (M.Sc.) degree from Lancaster University, UK. Before becoming a writer, Hannah's research focussed on the discovery of biomarkers for Alzheimer's and Parkinson's disease. She also worked to further elucidate the biological pathways involved in these diseases. Outside of her work, Hannah enjoys swimming, taking her dog for a walk and travelling the world.

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