Attenzione: questa pagina è una traduzione automatica di questa pagina originariamente in lingua inglese. Si prega di notare in quanto le traduzioni sono generate da macchine, non tutte le traduzioni saranno perfetti. Questo sito web e le sue pagine web sono destinati ad essere letto in inglese. Ogni traduzione del sito e le sue pagine web possono essere imprecise e inesatte, in tutto o in parte. Questa traduzione è fornita per comodità.

Come analizzare Necroptosis cellulare

Necroptosis è un modulo recentemente caratterizzato della morte delle cellule che ha simili beni sia al apoptosis che alla necrosi. Necroptosis è stato associato con i vari stati di malattia, quindi la ricerca e l'analisi delle celle che subiscono questa via di morte delle cellule è vitali.

Credito di immagine: Vshivkova/Shutterstock

Che cosa è necroptosis?

Necroptosis è un modulo della morte programmata delle cellule, distinto rompendosi della membrana cellulare, gonfiore degli organelli e versamento delle componenti cellulari interne. Questo modulo della morte delle cellule accade quando il apoptosis non può essere effettuato, per esempio quando la proteasi di caspase 8 è inibita dal vaccinia-virus.

La via di questo trattamento estesamente è stata caratterizzata ed è altamente controllata. In generale, l'alfa (TNFα) segnalazione di fattore di necrosi tumorale provoca l'attivazione della chinasi d'interazione 1 (RIPK) del ricevitore, assunzione di RIPK 3, formazione del necrosome e la fosforilazione e l'oligomerizzazione della chinasi mista di stirpe del tipo di dominio (MLKL). Questo modulo attivato delle inserzioni di MLKL infine nella membrana cellulare e piombo al permeabilization ed alla morte della cella.

Questa via è molto importante nella ricerca poichè recentemente è stato suggerito come centro di interesse possibile per trattamento del cancro. Uno degli marchi di garanzia principali di cancro è l'evasione del apoptosis, che provoca le celle immortali che eludono la morte cellulare. Di conseguenza, recentemente è stato suggerito che l'attivazione del necroptosis in celle Cancro-specifiche potrebbe contribuire a sormontare questa resistenza.

Ci sono egualmente molte malattie in cui il necroptosis è implicato, compreso il colpo e l'infarto miocardico. Di conseguenza, è molto importante che i ricercatori possono analizzare e caratterizzare le celle che subiscono il necroptosis. Tali sforzi piombo a vari meccanismi per lo studio loro, come descritto qui sotto.

Rilevazione della presenza di necroptosis via i biomarcatori

Un biomarcatore è una sostanza che è presente in un organismo vivente che può essere quantificato per analizzare un trattamento biologico. Ci sono molti biomarcatori differenti che sono stati utilizzati per indicare la presenza di necroptosis sia in in vitro che in vivo studi.

Per esempio, parecchi studi in vitro hanno identificato il complesso RIPK1/3 con immunoprecipitazione e l'analisi di microscopia elettronica, che indica la presenza del necrosome e, a loro volta, la presenza di necroptosis.

Ulteriormente, l'attivazione di RIPK1 può essere individuata con macchiare occidentale contro hRIP1 fosforilato a S166. In terzo luogo, l'attivazione di RIPK3 può essere identificata con la rilevazione occidentale della macchia di mRTP3 fosforilato a S232. Un altro metodo usato frequentemente è con la rilevazione di attività di caspase 8, che suggerisce che il necroptosis non stia accadendo.

Tuttavia, dei la metodi più accurati e, pertanto, maggior parte più importanti di analisi in vitro di necroptosis sono misure di fosforilazione, di oligomerizzazione o dello spostamento di MKLK. Ciò può essere effettuata via rilevazione di vari biomarcatori - compreso MLKL fosforilato a T357/S358 con macchiare o immunoprecipitazione occidentale, rilevazione di MLKL oligomerized con macchiare occidentale o con rilevazione della localizzazione di MLKL con immunostaining, rispettivamente.

Ancora, ci sono egualmente biomarcatori del immunohistochemistry che sono stati usati in vivo per identificare il necroptosis negli studi clinici e nei modelli animali (per esempio, rilevazione di hMLKL fosforilato a Thr357 e a Ser358). Ciò può dimostrare che il necroptosis sta presentandosi nei campioni di tessuto, che specialmente gli aiuti ricercano sulle malattie dove il necroptosis è implicato. Per esempio, uno studio recente ha indicato che il necroptosis è attivato in lesioni corticali dei pazienti con la sclerosi a placche.

L'uso degli inibitori di necroptosis per l'analisi purposes

Un altro modo di analizzare il necroptosis è through inibendo il trattamento, rivelante se il modulo specifico della morte delle cellule implicato nella malattia è necroptosis.

Ci sono vari tipi di inibitori usati frequentemente. Questi includono gli inibitori di RIPK1, quali Necrostatin-1 e 7-Cl-O-Nec-1. Questo metodo, tuttavia, non è il più affidabile poiché Nec1 ha fuori da attività dell'obiettivo e RIPK1 egualmente è compreso nel apoptosis.

Altri inibitori utilizzati frequentemente nell'analisi del necroptosis includono GSK-872, che inibisce RIPK3 e il necrosulfonamide, che inibisce MLKL.

Sorgenti:

Further Reading

Last Updated: Feb 26, 2019

Hannah Simmons

Written by

Hannah Simmons

Hannah is a medical and life sciences writer with a Master of Science (M.Sc.) degree from Lancaster University, UK. Before becoming a writer, Hannah's research focussed on the discovery of biomarkers for Alzheimer's and Parkinson's disease. She also worked to further elucidate the biological pathways involved in these diseases. Outside of her work, Hannah enjoys swimming, taking her dog for a walk and travelling the world.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Simmons, Hannah. (2019, February 26). Come analizzare Necroptosis cellulare. News-Medical. Retrieved on June 02, 2020 from https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Analyze-Cellular-Necroptosis.aspx.

  • MLA

    Simmons, Hannah. "Come analizzare Necroptosis cellulare". News-Medical. 02 June 2020. <https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Analyze-Cellular-Necroptosis.aspx>.

  • Chicago

    Simmons, Hannah. "Come analizzare Necroptosis cellulare". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Analyze-Cellular-Necroptosis.aspx. (accessed June 02, 2020).

  • Harvard

    Simmons, Hannah. 2019. Come analizzare Necroptosis cellulare. News-Medical, viewed 02 June 2020, https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Analyze-Cellular-Necroptosis.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.