Attenzione: questa pagina è una traduzione automatica di questa pagina originariamente in lingua inglese. Si prega di notare in quanto le traduzioni sono generate da macchine, non tutte le traduzioni saranno perfetti. Questo sito web e le sue pagine web sono destinati ad essere letto in inglese. Ogni traduzione del sito e le sue pagine web possono essere imprecise e inesatte, in tutto o in parte. Questa traduzione è fornita per comodità.

Come presentare i dati di citometria a flusso in una pubblicazione

La citometria a flusso è una tecnica basata sul laser ampiamente usata che può essere usata per misurare e quantificare la dimensione delle cellule, la granularità delle cellule, gli indicatori cellulari e le componenti intracellulari quali le proteine ed i nucleotidi. Questa tecnica analitica fornisce l'analisi simultanea di multi-parametro che può essere usata per supportare le conclusioni in pubblicazioni scientifiche.

celle per analisi facendo uso di citometria a flusso - unPeeradach R | Shutterstock

Fattori essenziali da considerare prima della pubblicazione dei dati di citometria a flusso

Impostazione e preparato sperimentali del campione

Prima della presentazione della pubblicazione, è cruciale che gli autori comprendono una descrizione dettagliata della progettazione sperimentale. Questa descrizione dovrebbe comprendere il numero degli esperimenti indipendenti che sono stati eseguiti nel corso dello studio e del numero dei campioni analizzati durante l'ogni esperimento. Il preparato delle sospensioni delle cellule o dei campioni analizzate da citometria a flusso deve anche essere spiegato.

I metodi del preparato di citometria a flusso comprendono l'uso delle proteasi specifiche per l'isolamento, filtrazione e lisi di qualunque tipo particolare delle cellule come pure reagenti di fissazione e di permeabilization. Questi informazioni assicurano la riproducibilità ed assistono altri ricercatori negli esperimenti futuri.

Dell'acquisizione dei dati

La metodologia ed i parametri usati per citometria a flusso dell'acquisizione dei dati dovrebbero includere il produttore di macchinari, modello, software, laser e impostazioni della potenza del laser come pure i filtri dall'emissione ottica che sono stati utilizzati per ogni reagente fluorescente.

La compensazione o i trattamenti matematici di correzione per eliminare la sovrapposizione spettrale fra i fluorocromi deve anche essere descritto. Ancora, le strategie di mascheramento esatte, quale uso di determinati pacchetti software egualmente migliorano la riproducibilità degli esperimenti.

La dimensione del campione o il numero delle celle ha incluso la popolazione di interesse ed il numero minimo degli eventi per una popolazione bersaglio deve anche essere indicato.

Analisi dei dati ottenuti e della presentazione

L'analisi di dati attenta di grande quantità di informazioni ottenuta da citometria a flusso è una parte cruciale di tutta la pubblicazione.

Schemi Gating

Quando descrivere gating gli schemi, aspetti quali i portoni leggeri dello spargimento, i portoni dei in tensione-morti, portoni del doppietto e fluorescenza-individuando i portoni deve essere indirizzata.

Definizione delle soglie

È critico che gli autori comprendono tutte le informazioni per quanto riguarda i comandi che sono stati usati. Questi includono non macchiato, biologico, l'isotipo, la fluorescenza meno-un o i comandi negativi presenti all'interno della sospensione delle cellule.

Analisi statistica

L'analisi statistica, includente se i dati rappresentano un confronto in una media, una mediana o una percentuale, dovrebbe anche essere inclusa.

Presentazione dei dati

Gli autori possono scegliere i vari stili della presentazione, quali il punto o i tracciati di densità, evidenziare la popolazione delle cellule di interesse. Quando considerare il punto traccia, è importante da contrassegnare entrambe le asce e da includere se un disgaggio lineare o logaritmico sta usando.

Egualmente ha raccomandato che gli anticorpi o i fluorophores direttamente fossero contrassegnati nel tracciato. Le percentuali dovrebbero essere quotate in portoni, mentre il numero degli eventi totali in un tracciato dovrebbe essere indicato nella il tracciato o la figura legenda.

Normalizzazione nei dati di citometria a flusso

Malgrado la vasta gamma delle applicazioni di citometria a flusso, questa tecnica è stata controllata sulla sua riproducibilità dovuto mancanza di metodi standard confrontare esattamente i dati di citometria a flusso.

La complessità dei dati autorizza l'esigenza degli standard minimi. I ricercatori di citometria a flusso egualmente trarrebbero giovamento da una struttura formalizzata per questa tecnica, compreso le linee guida su sperimentale e campionano le informazioni, l'acquisizione, l'analisi e la presentazione dei dati.

Conclusione

Per migliorare la riproducibilità dei dati ottenuti dall'analisi cytometric di flusso e per renderla facile da capire per i lettori, è essenziale per comprendere le spiegazioni dettagliate di come l'analisi è stata eseguita. Comprendendo questi informazioni, i ricercatori possono convalidare facilmente la qualità dei dati e della conclusione tratti.

Sorgenti

Further Reading

Last Updated: Apr 3, 2019

Benedette Cuffari

Written by

Benedette Cuffari

After completing her Bachelor of Science in Toxicology with two minors in Spanish and Chemistry in 2016, Benedette continued her studies to complete her Master of Science in Toxicology in May of 2018. During graduate school, Benedette investigated the dermatotoxicity of mechlorethamine and bendamustine; two nitrogen mustard alkylating agents that are used in anticancer therapy.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Cuffari, Benedette. (2019, April 03). Come presentare i dati di citometria a flusso in una pubblicazione. News-Medical. Retrieved on September 22, 2021 from https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Present-Flow-Cytometry-Data-in-a-Publication.aspx.

  • MLA

    Cuffari, Benedette. "Come presentare i dati di citometria a flusso in una pubblicazione". News-Medical. 22 September 2021. <https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Present-Flow-Cytometry-Data-in-a-Publication.aspx>.

  • Chicago

    Cuffari, Benedette. "Come presentare i dati di citometria a flusso in una pubblicazione". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Present-Flow-Cytometry-Data-in-a-Publication.aspx. (accessed September 22, 2021).

  • Harvard

    Cuffari, Benedette. 2019. Come presentare i dati di citometria a flusso in una pubblicazione. News-Medical, viewed 22 September 2021, https://www.news-medical.net/life-sciences/How-to-Present-Flow-Cytometry-Data-in-a-Publication.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.