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Cómo presentar datos del Cytometry de flujo en una publicación

El cytometry de flujo es una técnica laser-basada ampliamente utilizada que se puede utilizar para medir y para cuantificar talla de célula, granulosidad de la célula, marcadores celulares, y componentes intracelulares tales como proteínas y nucleótidos. Esta técnica analítica ofrece el análisis simultáneo del multiparámetro que se puede utilizar para soportar conclusiones en publicaciones científicas.

células para el análisis usando cytometry de flujo - un ejemplo por Peeradach RPeeradach R | Shutterstock

Factores esenciales a considerar antes de publicar datos del cytometry de flujo

Montaje y preparación experimentales de la muestra

Antes de someter una publicación, es crucial que los autores incluyen una descripción detallada del diseño experimental. Esta descripción debe incluir el número de experimentos independientes que fueron realizados durante el curso del estudio y del número de muestras analizadas durante cada experimento. La preparación de las suspensiones de las muestras o de las células analizadas por cytometry de flujo debe también ser explicada.

Los métodos de la preparación del cytometry de flujo incluyen el uso de las proteasas específicas para el aislamiento, filtración y lisis de cualquier tipo determinado de la célula, así como los reactivos del permeabilization y de la fijación. Esta información asegura reproductibilidad y ayuda a otros investigadores en los experimentos futuros.

De adquisición de datos

La metodología y los parámetros usados para el cytometry de flujo de adquisición de datos deben incluir el fabricante de equipo, modelo, software, los laseres y las fijaciones de potencia del laser, así como los filtros de la emisión óptica que fueron utilizados para cada reactivo fluorescente.

La remuneración o los procesos matemáticos de la corrección para eliminar recubrimiento espectral entre los fluorocromos debe también ser descrita. Además, las estrategias de encubrimiento exactas, tales como uso de ciertas características del programa también perfeccionan la reproductibilidad de experimentos.

El tamaño de muestra o el número de células contadas en la población de interés y el número mínimo de acciones para una población objetivo deben también ser indicados.

Análisis de los datos obtenidos y de la presentación

El análisis de datos cuidadoso de la gran cantidad de información obtenida de cytometry de flujo es una parte crucial de cualquier publicación.

Esquemas que bloquean

Cuando la descripción bloqueando los esquemas, aspectos tales como entradas livianas de la dispersión, entradas vivo-muertas, entradas del doblete y fluorescencia-descubriendo las entradas debe ser dirigida.

Definición de umbrales

Es crítico que los autores incluyen toda la información con respecto a los mandos que fueron utilizados. Éstos incluyen sin manchas, biológico, el isotipo, la fluorescencia menos-uno o los mandos negativos presentes dentro de la suspensión de la célula.

Análisis estadístico

El análisis estadístico, incluyendo si los datos representan una comparación entre un medio, un punto medio o un porcentaje, debe también ser incluido.

Presentación de datos

Los autores pueden elegir diversos estilos de la presentación, tales como punto o gráficos de la densidad, de destacar la población de la célula de interés. Cuando la consideración del punto traza, es importante etiqueta ambas hachas e incluirlas si se está utilizando una escala lineal o logarítmica.

También recomendó que los anticuerpos o los fluorophores etiqueta directamente en el gráfico. Los porcentajes se deben enumerar en entradas, mientras que el número de acciones totales en un gráfico se debe indicar en el gráfico o la figura leyenda.

Estandarización en datos del cytometry de flujo

A pesar de la amplia gama de los usos del cytometry de flujo, esta técnica se ha escudriñado en su reproductibilidad debido a la falta de métodos estándar comparar exacto datos del cytometry de flujo.

La complejidad de los datos autoriza la necesidad de patrones mínimos. Los investigadores del cytometry de flujo también se beneficiarían de un marco formalizado para esta técnica, incluyendo pautas en experimental y muestrean la información, la adquisición, el análisis, y la presentación de datos.

Conclusión

Para perfeccionar la reproductibilidad de los datos obtenidos de análisis cytometric del flujo y hacerla fácil entender para los programas de lectura, es esencial incluir explicaciones detalladas de cómo el análisis fue realizado. Incluyendo esta información, los investigadores pueden validar fácilmente la calidad de los datos y de la conclusión extraídos.

Fuentes

Further Reading

Last Updated: Apr 3, 2019

Benedette Cuffari

Written by

Benedette Cuffari

After completing her Bachelor of Science in Toxicology with two minors in Spanish and Chemistry in 2016, Benedette continued her studies to complete her Master of Science in Toxicology in May of 2018. During graduate school, Benedette investigated the dermatotoxicity of mechlorethamine and bendamustine; two nitrogen mustard alkylating agents that are used in anticancer therapy.

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