El híbrido Captura-Basó la detección humana del Papillomavirus comparado con la polimerización en cadena

Los tipos de alto riesgo de virus de papiloma humano (HPV) son uno del factor de riesgo más importante para los carcinomas cervicales en mujeres. Convencional, la citología del prueba Pap y la polimerización en cadena se han utilizado para revisar para la presencia de HPV. Recientemente, una nueva prueba del anuncio publicitario HPV se ha propuesto para la diagnosis del análisis de la captura del HPV-Híbrido.

Fondo con el virus. Papillomavirus humano en la superficie de una célula. Un modelo se construye usando datos de la estructura macromolecular viral del banco de datos de proteína (PDB 3J6R). Haber de imagen: Kateryna Kon/Shutterstock
Fondo con el virus. Papillomavirus humano en la superficie de una célula. Un modelo se construye usando datos de la estructura macromolecular viral del banco de datos de proteína (PDB 3J6R). Haber de imagen: Kateryna Kon/Shutterstock

Principio de la detección híbrida (HC) de la captura HPV

Este análisis utiliza un análisis del hibridación del ácido nucléico donde las muestras con la DNA del objetivo cruzan por hibridación con una antena del ARN de HPV. Los híbridos de RNA-DNA entonces se capturan usando un microplate que esté recubierto con los anticuerpos para los híbridos de DNA-RNA. Éstos entonces se descubren usando quimioluminescencia. Los anticuerpos conjugaron con el fosfato alcalino y el específico para los híbridos de DNA-RNA reacciona con los híbridos que entonces se descubren posteriormente usando un substrato quimioluminescente. La amplificación de la señal ocurre mientras que varios anticuerpos conjugados atan a cada híbrido. El fosfato alcalino hiende el substrato quimioluminescente, llevando a la emisión de la luz que se captura usando un luminometer. Si la DNA del objetivo está presente, puede ser descubierta usando la presencia de luz.

Medición del nivel de series de alto riesgo

Allí dos tipos de HPV: de alto riesgo y poco arriesgado. Los tipos de alto riesgo incluyen: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 y 68, mientras que los tipos poco arriesgados incluyen: 6, 11, 42, 43 y 44. La luz del luminometer se mide como unidades livianas relativas (RLU). Cuando el RLU es mayor que el valor del atajo, la presencia de tipos de alto riesgo es alta; considerando que, un valor inferior de RLU indicó la presencia inferior de series de alto riesgo.

Sensibilidad y especificidad de la polimerización en cadena comparado con HC

La sensibilidad de una prueba es su capacidad de descubrir correctamente una muestra (o el régimen positivo verdadero), mientras que la especificidad es la capacidad de una prueba de determinar correctamente una muestra negativa (o el régimen negativo verdadero). Las sensibilidades y las especificidades del método de la polimerización en cadena y de HC se han determinado en diversos casos. En el caso de lesiones intraepiteliales de alto grado, la sensibilidad del análisis de HC y la polimerización en cadena eran 85,2 y 74,0%. En otro estudio de neoplasmas intraepiteliales cervicales, la especificidad era 83,5% para la polimerización en cadena y 85,4% para HC. La especificidad ambas las pruebas era el 80% en este estudio.

Índice profético positivo y negativo de polimerización en cadena comparado con HC

El valor profético positivo es la probabilidad que los temas que probaron el positivo en una prueba son de hecho positivos para una condición, mientras que el valor profético negativo es la probabilidad que una muestra que probó la negativa sea de hecho negativo para una condición. En un estudio de lesiones cervicales, los valores proféticos positivos y negativos de la polimerización en cadena eran los 27% y los 97%, mientras que los valores proféticos positivos y negativos de HC eran los 50% y los 97%. Sin embargo, diversos estudios denuncian resultados variables. En otro estudio, los valores proféticos positivos de HC y la polimerización en cadena para descubrir lesiones intraepiteliales eran 4,5% y 3,6%. Los valores proféticos negativos de HC y de la polimerización en cadena fueron denunciados para ser 99,6% y 99,5%.

Agreeability de la Inter-Prueba (valor de Kappa de Cohen)

Los estudios también han intentado medir el índice de agreeability entre los métodos de la polimerización en cadena y de HC. Esto se hace usando una estadística llamada el valor de la kappa de Cohen. Esta estadística mide el inter-acuerdo entre dos parámetros que midan la misma cosa. Diversos estudios muestran un valor de la kappa de alrededor 0,7, que muestra un acuerdo sustancial entre la polimerización en cadena y HC.

Ventajas del análisis de HC sobre la polimerización en cadena

Aunque ambas las pruebas tengan niveles similares de valor profético negativo, la sensibilidad y la especificidad son más altas para el análisis de HC comparado a la polimerización en cadena. También, los pasos en análisis de HC se controlan y se pueden fácilmente realizar por un técnico. Sin embargo, los pasos en la polimerización en cadena requirieron varios pasos que necesitan ser optimizados en cada paso.

Desventajas del análisis de HC sobre la polimerización en cadena

La prueba de alto riesgo de HC HPV se debe realizar en las muestras que han cerco usando el dispositivo de la colección de la DNA de HC.  También, las muestras se deben colocar inmediatamente en ambiente del transporte del espécimen y salvar en -20°. Este dispositivo de la colección no se debe utilizar para cerco muestras de mujeres embarazadas. Ciertos factores, tales como presencia de crema antihongos, jalea anticonceptiva, ducha pueden llevar a los resultados del falso negativo.
De acuerdo con todos estos factores, los laboratorios individuales deben decidir que el protocolo y el análisis que se seguirán basaron en los requisitos específicos.

Fuentes

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Last Updated: Sep 19, 2018

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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