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Avantages hydrophiles de chromatographie d'interaction

La chromatographie hydrophile d'interaction est une variation de la chromatographie en phase liquide qui superpose dans le fonctionnement avec la chromatographie d'ion et la chromatographie liquide à phase renversée. Cette méthode offre plusieurs avantages en exécutant l'analyse des corps dissous polaires ou fondamentaux.

La chromatographie hydrophile darleksey | Shutterstock

Quelle est chromatographie hydrophile d'interaction ?

HILIC emploie une phase stationnaire polaire, telle que la silice ou la phase métallisée polaire, et la phase mobile se compose de l'eau de 5 - de 40% qui est combinée avec un solvant moins polaire, tel que l'acétonitrile. Des phases stationnaires polaires ou même non polaires de silice ont été employées conjointement avec le solvant hautement organique.

Les phases de la chromatographie hydrophile d'interaction peuvent être groupées dans cinq types : la silice unbonded simple, phase métallisée aminée, amide a collé la phase, la phase métallisée cationique, et la phase métallisée zwitterionic.

Bien que le choix habituel pour la phase mobile soit acétonitrile, n'importe quel solvant aprotic qui est miscible avec de l'eau peut être employé à cet effet. Dans les cas où l'alcool est employé, la concentration devrait être plus élevée tels qu'ils peuvent avoir un degré assimilé d'assemblage comme combinaison de solvant et d'eau aprotic.

Des additifs dans certains cas ioniques, y compris l'acétate d'ammonium et le formiate d'ammonium, peuvent être employés pour régler les deux phases. De même, les sels peuvent augmenter la polarité de la phase mobile et affecter le procédé de l'élution.

Avantages de la chromatographie hydrophile d'interaction

Sensibilité accrue de dépistage

Cette méthode peut améliorer la sensibilité de détection de la spectrométrie de masse. La chromatographie hydrophile d'interaction a le teneur organique élevé, le rendant efficace pour la pulvérisation et le desolvation pendant la spectrométrie de masse electrospray. Dans une étude, la sensibilité a pu être grimpée par trois ordres de grandeur comparés jusqu'à la chromatographie liquide à phase renversée tout en exécutant l'analyse du salbutamol de bronchodilatateur.

Des débits plus élevés

Car la viscosité de la phase mobile est inférieure, le débit peut être plus élevé dans cette méthode en comparaison avec la chromatographie liquide à phase renversée. Dans le cas de la CLHP d'inverse-phase, la viscosité de l'acétonitrile est 0.9-0.86 centipoise (cP).

C'est deux fois la viscosité de l'acétonitrile utilisée en chromatographie hydrophile d'interaction, où c'est environ 0,4 centipoise. L'avantage des débits plus élevés est CLHP comparée d'inverse-phase de rendement plus grand. En outre, la diffusivité du corps dissous est plus élevée dans la phase mobile de cette technique.

Un rendement plus élevé

L'utilisation des phases mobiles qui ont la viscosité inférieure également permet l'utilisation des fléaux qui sont deux fois tant que ceux utilisés dans la CLHP inverse de phase. Les études prouvent que la contre-pression inférieure utilisant des phases superficiellement poreuses de silice avec une petite dimension particulaire peut réaliser très la haute performance. Ceci peut être combiné avec la viscosité inférieure de la phase mobile en chromatographie hydrophile d'interaction pour réaliser un rendement globalement plus élevé.

Des vitesses plus rapides de séparation

La viscosité de l'éluant aboutit également à jeûner extrêmement séparation de l'échantillon, qui est associé à l'impédance inférieure pendant la séparation. Dans une étude, trois superficiellement fléaux poreux de silice (cm 15 longtemps) ont été séquentiel accouplés, et séparation ont été réalisés dedans environ 15 mn, expliquant la vitesse plus élevée de cette méthode.

Dans une autre étude, on lui a montré que l'éthylène pont les fléaux hybrides (BEH) pourrait réaliser une séparation plus efficace qui a produit des crêtes plus pointues. Ceci peut augmenter la sensibilité de la méthode.

Capacité de charge pour les corps dissous fondamentaux

La capacité de charge pour les corps dissous fondamentaux est plus haut comparée pour renverser la CLHP de phase. Cependant, car le solvant se compose principalement de l'acétonitrile, il peut y avoir des éditions concernant la solubilité de certaines analytes.

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Last Updated: Apr 15, 2019

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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