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Vantaggi idrofili di cromatografia di interazione

La cromatografia idrofila di interazione è una variazione di cromatografia in fase liquida che si sovrappone nella funzione con la cromatografia dello ione e la cromatografia a fase mobile liquida in controfase. Questo metodo offre parecchi vantaggi quando esegue l'analisi dei soluti polari o di base.

La cromatografia idrofila di interazione è una variazione di cromatografia in fase liquidaarleksey | Shutterstock

Che cosa è la cromatografia idrofila di interazione?

HILIC usa una fase stazionaria polare, quali la silice o la fase tenuta da adesivo polare e la fase mobile consiste dell'acqua di 40% - di 5 che si combina con un solvente meno polare, quale acetonitrile. Le fasi stazionarie della silice polare o persino non polare sono state usate insieme con il solvente organico altamente.

Le fasi di cromatografia idrofila di interazione possono essere raggruppate in cinque classi: la silice unbonded semplice, la fase tenuta da adesivo amminica, ammide ha saldato la fase, la fase tenuta da adesivo cationica e la fase tenuta da adesivo zwitterionic.

Sebbene la scelta usuale per la fase mobile sia acetonitrile, tutto il solvente aprotic che è miscibile con acqua può essere usato a questo fine. Nei casi in cui l'alcool è usato, la concentrazione dovrebbe essere più alta tali che possono avere un simile grado di conservazione come combinazione di solvente e di acqua aprotic.

Gli additivi in alcuni casi ionici, compreso l'acetato di ammonio ed il formiato dell'ammonio, possono essere usati per gestire le due fasi. Similmente, i sali possono aumentare la polarità della fase mobile e pregiudicare il trattamento dell'eluizione.

Vantaggi di cromatografia idrofila di interazione

Sensibilità aumentata di rilevazione

Questo metodo può migliorare la sensibilità di rilevazione di spettrometria di massa. La cromatografia idrofila di interazione ha contenuto organico elevato, rendendolo efficiente per la polverizzazione e il desolvation durante la spettrometria di massa electrospray. In uno studio, la sensibilità ha potuto essere aumentata di tre ordini di grandezza confrontati a cromatografia a fase mobile liquida in controfase mentre eseguiva l'analisi del salbutamolo del broncodilatatore.

Più alte portate

Poichè la viscosità della fase mobile è bassa, la portata può essere più alta in questo metodo in paragone a cromatografia a fase mobile liquida in controfase. Nel caso di HPLC di inverso-fase, la viscosità di acetonitrile è 0.9-0.86 centipoise (cP).

Ciò è due volte la viscosità di acetonitrile utilizzata nella cromatografia idrofila di interazione, dove è intorno 0,4 centipoise. Il vantaggio di più alte portate è maggior risparmio di temi confrontato a HPLC di inverso-fase. Inoltre, la diffusività del soluto è più alta nella fase mobile di questa tecnica.

Alta efficienza

L'uso delle fasi mobili che hanno bassa viscosità egualmente permette l'uso delle colonne che sono due volte finchè quelle utilizzate nel HPLC inverso di fase. Gli studi indicano che la contro-pressione bassa facendo uso delle fasi superficiale porose della silice con una dimensione delle piccole particelle può raggiungere l'alta efficienza molto. Ciò può combinarsi con la viscosità più bassa della fase mobile in cromatografia idrofila di interazione per raggiungere l'alta efficienza globalmente.

Velocità più veloci di separazione

La viscosità dell'eluente egualmente piombo estremamente per digiunare la separazione del campione, che è associato con più di bassa impedenza durante la separazione. In uno studio, tre colonne porose della silice (15 cm di lunghezza) coppia superficiale seriale e la separazione sono state raggiunte dentro intorno 15 minuti, dimostranti il più alta velocità di questo metodo.

In un altro studio, è stato indicato che l'etilene gettato un ponte su colonne ibride (BEH) potrebbe raggiungere una separazione più efficiente che ha prodotto i picchi più marcati. Ciò può aumentare la sensibilità del metodo.

Capacità di carico per i soluti di base

La capacità di carico per i soluti di base è più alto confrontata a HPLC inverso di fase. Tuttavia, poichè il solvente soprattutto consiste dell'acetonitrile, ci possono essere emissioni per quanto riguarda la solubilità di determinati analiti.

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Last Updated: Apr 15, 2019

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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