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Applications hydrophiles de chromatographie d'interaction

La chromatographie hydrophile d'interaction (HILIC) est une technique de chromatographie liquide qui est employée pour séparer le modéré aux composés hautement hydrophiles et polaires basés sur leur assemblage une phase stationnaire hydrophile contre la phase mobile organique polaire aqueuse hydrophile.

Fioles pour la chromatographieRopisme | Shutterstock

Principes de HILIC

Les composés ioniques et ionisables se fondent type sur la séparation par la chromatographie d'échange ionique (IC) ou l'ion appareillant la chromatographie à phase renversée (IP-RPLC).

En chromatographie liquide d'Inverse-phase traditionnelle (RPLC), des composés polaires, hydrophiles et chargés sont préférentiellement maintenus sur le fléau. Ce contraste avec le mécanisme d'assemblage dans HILIC, qui se fonde sur la segmentation d'un composé entre la couche extérieure aqueuse de la phase stationnaire hydrophile et le compartiment organique et hydrophile de la phase mobile.

Secondaire force, comme le doublet-doublet, électrostatique, et les interactions d'adhérence d'hydrogène influencent cette partition, ayant pour résultat l'assemblage du composé sur la phase stationnaire ou l'élution dans la phase mobile.

Une compréhension complète du mécanisme qui est à la base de HILIC et de la base de la sélectivité et de l'assemblage doit toujours être comprise. L'amélioration du choix d'une phase stationnaire basée sur la composition est un endroit qui est développé.

Comprenant les caractéristiques des composés étant séparés et de leur compatibilité avec des phases stationnaires variées optimisera davantage la séparation.

HILIC comme technique complémentaire

HILIC est une technique complémentaire et peut être employé conjointement avec d'autres techniques pour augmenter le rendement de la séparation.

Une caractéristique discernante de HILIC est que les constituants d'un mélange sont élués dans la commande de plus hydrophile moins à hydrophile. Ceci diffère de la commande vue en chromatographie normale d'inverse-phase, où l'élution se produit dans la commande de mineurs à plus hydrophile. En soi, HILIC maintient effectivement les composés hydrophiles qui sont mauvais maintenus dans le LC à phase renversée.

HILIC est hautement compatible avec la spectrométrie de masse (MS), en particulier avec les surfaces adjacentes electrospray (ESI) d'ionisation qui précèdent Mme. La composante polaire élevée de solvant organique de la phase mobile de HILIC augmente le rendement de l'ionisation dans le procédé d'ESI.

L'ionisation constitue la base d'ESI, qui se fonde sur charger le composé de l'intérêt pendant la phase gazeuse et l'analyse par spectrométrie de masse. HILIC-MS peut, pour cette raison, fournir extrêmement un sensible, analyse quantitative d'un large éventail de solutions complexes contenant les composés polaires.

Les applications de HILIC sont particulièrement centrales dans le produit chimique et les domaines biochimiques de recherches où les composés polaires avec une masse moléculaire d'inférieur-à-support sont les sujets de l'analyse. Celles-ci comprennent des peptides, des hydrates de carbone, des antibiotiques, des médicaments, des acides aminés, des nucléotides, des nucléosides, et des pesticides.

HILIC-MS est un outil d'analyse complémentaire à RPLC-MS qui fournit une séparation plus faible des composantes hydrophiles. HILIC-MS, cependant, permet à ces constituants hydrophiles d'être séparés et par la suite trouvés à la haute résolution. La combinaison des deux techniques augmente ainsi des capacités analytiques pour les composés hydrophiles qui sont mauvais maintenus dans RPLC.

On s'attend à ce que HILIC avance rapidement, en particulier dans les domaines de la chimie et du physique des particules de fléau.

Applications de HILIC en biomédecine

HILIC a un large éventail d'applications biomédicales, comprenant :

  • Génie chimique ;
  • Biochimies - pour séparer les peptides polaires suivant la digestion des protéines pour déterminer le fonctionnement et la stabilité de protéine ;
  • Pharmacologie - pour analyser les médicaments et les métabolites polaires, y compris des protéines, des peptides et des anticorps ;
  • Des instruments aratoires - pour analyser les composantes polaires d'extrait de centrale, de ce type en acides, hydrates de carbone, peptides, et flavonoïdes phénoliques ;
  • Industrie alimentaire - pour trouver des contaminants de nourriture, des biotoxines marines, de petits composés polaires et des amines biogéniques (ceci produit par des organismes).

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Last Updated: Feb 26, 2019

Hidaya Aliouche

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Hidaya Aliouche

Hidaya is a science communications enthusiast who has recently graduated and is embarking on a career in the science and medical copywriting. She has a B.Sc. in Biochemistry from The University of Manchester. She is passionate about writing and is particularly interested in microbiology, immunology, and biochemistry.

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