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Applicazioni idrofile di cromatografia di interazione

La cromatografia idrofila di interazione (HILIC) è una tecnica di cromatografia a fase mobile liquida che è usata per separare il moderato ai composti altamente idrofili e polari basati sulla loro conservazione su una fase stazionaria idrofila contro la fase mobile organica polare acquosa idrofila.

Fiale per cromatografiaRopisme | Shutterstock

Principi di HILIC

I composti ionici ed ionizzabili contano tipicamente sulla separazione dalla cromatografia di scambio ionico (IC) o sullo ione che accoppia la cromatografia in controfase (IP-RPLC).

In cromatografia a fase mobile liquida di Inverso-fase tradizionale (RPLC), i composti polari, idrofili e fatti pagare sono conservati preferenziale sulla colonna. Ciò è contrariamente al meccanismo della conservazione in HILIC, che conta sulla divisione di un composto fra lo strato superficiale acquoso della fase stazionaria idrofila ed il compartimento organico e idrofilo della fase mobile.

Secondario forza, quale il dipolo-dipolo, elettrostatico e le interazioni di legame dell'idrogeno influenzano questa partizione, con conseguente conservazione del composto sulla fase stazionaria o sull'eluizione nella fase mobile.

Una comprensione completa del meccanismo che è alla base di HILIC e della base di selettività e della conservazione deve ancora essere capita. Il miglioramento nella selezione di una fase stazionaria basata su composizione è un'area che sta sviluppanda.

La comprensione delle caratteristiche dei composti che sono separati e della loro compatibilità con le varie fasi stazionarie più ulteriormente ottimizzerà la separazione.

HILIC come tecnica complementare

HILIC è una tecnica complementare e può essere usato insieme con altre tecniche per aumentare il risparmio di temi della separazione.

Una distinzione caratteristica di HILIC è che i componenti di una miscela sono eluiti per più idrofilo al più minimo idrofilo. Ciò contrappone con l'ordine veduto in cromatografia standard di inverso-fase, dove l'eluizione si presenta per minimo a più idrofilo. Come tale, HILIC efficacemente conserva i composti idrofili che sono conservati male nel LC in controfase.

HILIC è altamente compatibile con spettrometria di massa (MS), specialmente con le interfacce electrospray (ESI) di ionizzazione che precedono sig.ra. L'alta componente polare del solvente organico della fase mobile di HILIC aumenta il risparmio di temi di ionizzazione nel trattamento di ESI.

La ionizzazione fornisce la base di ESI, che conta sul carico del composto di interesse nella fase gassosa e nell'analisi tramite spettrometria di massa. HILIC-MS può, quindi, fornire un'analisi altamente sensibile e quantitativa di una vasta gamma di soluzioni complesse che contengono i composti polari.

Le applicazioni di HILIC sono particolarmente centrali nel prodotto chimico e nei campi biochimici della ricerca in cui i composti polari con la massa molecolare di basso media sono gli argomenti di analisi. Questi includono i peptidi, i carboidrati, gli antibiotici, le droghe, gli amminoacidi, i nucleotidi, i nucleosidi e gli antiparassitari.

HILIC-MS è uno strumento analitico complementare a RPLC-MS che fornisce la separazione più difficile di componenti idrofile. HILIC-MS, tuttavia, permette che questi componenti idrofili siano separati e successivamente siano individuati all'alta risoluzione. La combinazione delle due tecniche aumenta così le capacità analitiche per i composti idrofili che sono conservati male in RPLC.

HILIC si pensa che avanzi rapido, specialmente nei campi di chimica e di fisica delle particelle della colonna.

Applicazioni di HILIC in biomedicina

HILIC ha una vasta gamma di applicazioni biomediche, includenti:

  • Ingegneria chimica;
  • Biochimica - separare i peptidi polari che seguono digestione delle proteine per determinare funzione e stabilità della proteina;
  • Farmacologia - analizzare le droghe ed i metaboliti polari, compreso le proteine, i peptidi e gli anticorpi;
  • Agricolo - analizzare le componenti polari dell'estratto dell'impianto, come quelli in acidi, carboidrati, peptidi e flavonoidi fenolici;
  • Industria alimentare - individuare gli agenti inquinanti dell'alimento, le biotossine marine, i piccoli composti polari e le ammine biogeniche (questo prodotto dagli organismi).

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Last Updated: Feb 26, 2019

Hidaya Aliouche

Written by

Hidaya Aliouche

Hidaya is a science communications enthusiast who has recently graduated and is embarking on a career in the science and medical copywriting. She has a B.Sc. in Biochemistry from The University of Manchester. She is passionate about writing and is particularly interested in microbiology, immunology, and biochemistry.

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