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Usos hidrofílicos de la cromatografía de la acción recíproca

La cromatografía hidrofílica de la acción recíproca (HILIC) es una técnica de la cromatografía líquida que se utiliza para separar al moderado a las composiciones altamente hidrofílicas y polares basadas en su retención en una fase estacionaria hidrofílica comparado con la fase movible orgánica polar acuosa hidrofílica.

Frascos para la cromatografíaRopisme | Shutterstock

Principios de HILIC

Las composiciones iónicas e ionizables confían típicamente en la separación por la cromatografía de intercambio iónico (IC) o el ión que empareja la cromatografía inversa (IP-RPLC).

En cromatografía líquida de la Reverso-fase tradicional (RPLC), las composiciones polares, hidrofílicas y cargadas se conservan preferencial en la olumna. Esto está en contraste con el mecanismo de la retención en HILIC, que confía en la división de una composición entre la capa superficial acuosa de la fase estacionaria hidrofílica y la división orgánica, hidrofílica de la fase movible.

Secundario fuerza, por ejemplo el dipolo-dipolo, electroestático, y las acciones recíprocas de la vinculación del hidrógeno influencian esta partición, dando por resultado la retención de la composición en la fase estacionaria o la elución en la fase movible.

Una comprensión completa del mecanismo que es la base de HILIC y de la base de la selectividad y de la retención debe todavía ser entendida. La mejoría en la selección de una fase estacionaria basada en la composición es una área se está desarrollando que.

La comprensión de las características de las composiciones que son separadas y de su compatibilidad con diversas fases estacionarias optimizará más lejos la separación.

HILIC como técnica complementaria

HILIC es una técnica complementaria y se puede utilizar conjuntamente con otras técnicas para aumentar la eficiencia de la separación.

Una distinción característica de HILIC es que los componentes de una mezcla están enjuagados en la orden de la más hidrofílico al lo más menos posible hidrofílico. Esto pone en contraste con la orden vista en la cromatografía estándar de la reverso-fase, donde la elución ocurre en la orden de lo menos a la más hidrofílico. Como tal, HILIC conserva efectivo las composiciones hidrofílicas que se conservan mal en el LC inverso.

HILIC es altamente compatible con espectrometría de masa (MS), determinado con los interfaces electrospray (ESI) de la ionización que preceden al ms. El alto componente polar del disolvente orgánico de la fase movible de HILIC aumenta la eficiencia de la ionización en el proceso de ESI.

La ionización ofrece la base de ESI, que confía en cargar la composición del interés en la fase y el análisis de gas por espectrometría de masa. HILIC-MS puede, por lo tanto, ofrecer un análisis altamente sensible, cuantitativo de una amplia gama de soluciones complejas que contienen composiciones polares.

Los usos de HILIC son determinado centrales en la substancia química y los campos bioquímicos de la investigación donde están los temas las composiciones polares con una masa molecular del inferior-a-ambiente del análisis. Éstos incluyen los péptidos, los hidratos de carbono, los antibióticos, las drogas, los aminoácidos, los nucleótidos, los nucleósidos, y los pesticidas.

HILIC-MS es una herramienta analítica complementaria a RPLC-MS que ofrezca una separación más pobre de componentes hidrofílicos. HILIC-MS, sin embargo, permite que descubrens estos componentes hidrofílicos sean separados y posteriormente en la alta resolución. Combinar las dos técnicas aumenta así las capacidades analíticas para las composiciones hidrofílicas que se conservan mal en RPLC.

Se prevee que HILIC avance rápidamente, determinado en los campos de la química y de la física de partículas de la olumna.

Usos de HILIC en biomedecina

HILIC tiene una amplia gama de usos biomédicos, incluyendo:

  • Ingeniería química;
  • Bioquímica - separar los péptidos polares que siguen la digestión de proteínas para determinar la función y la estabilidad de la proteína;
  • Farmacología - analizar las drogas y los metabilitos polares, incluyendo las proteínas, los péptidos y los anticuerpos;
  • Agrícola - analizar componentes polares del extracto de la instalación, tales como ésos en ácidos, hidratos de carbono, péptidos, y flavonoides fenólicos;
  • Industria alimentaria - descubrir los contaminantes de la comida, las biotoxinas marinas, las pequeñas composiciones polares y las aminas biogénicas (éste producido por los organismos).

Fuentes

Further Reading

Last Updated: Feb 26, 2019

Hidaya Aliouche

Written by

Hidaya Aliouche

Hidaya is a science communications enthusiast who has recently graduated and is embarking on a career in the science and medical copywriting. She has a B.Sc. in Biochemistry from The University of Manchester. She is passionate about writing and is particularly interested in microbiology, immunology, and biochemistry.

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