Immunophénotypage en cytométrie de flux

L'immunophénotypage de cytométrique de flux concerne analyser une population hétérogène des cellules afin de recenser une population cellulaire d'intérêt.

Cellule anormale avec des antigènes à trouver utilisant lCrédit d'image : sciencepics/Shutterstock

Opérations d'immunophénotypage

  1. Des cellules de différentes lignées sont recensées et caractérisées en tant que cellules matures ou immatures.
  2. Des cellules anormales sont recensées ont basé sur des différences dans l'expression d'antigène.
  3. Les différences en normale et cellules anormales, telles que la présence ou l'absence de certains antigènes sont comparées et documentées.
  4. La caractéristique s'analyse alors pour effectuer le diagnostic (si nécessaire), et les tests complémentaires tels que l'immunohistochimie, cytogénétique conventionnelle, et l'hybridation in situ de fluorescence (FISH) sont effectuées pour confirmer le diagnostic et pour effectuer d'autres conlusions.
  5. Les caractéristiques peuvent également être employées pour développer les tests pronostiques pour des maladies spécifiques.

Combinaison de l'immunophénotypage avec la cytométrie de flux

L'immunophénotypage peut concerner de nombreux types de cellules. Les parties suivantes traitent des applications d'immunophénotypage en cytométrie de flux pour cinq genres d'échantillons.

Tumeurs lymphoïdes matures

La tumeur ou la croissance des cellules anormale du tissu lymphoïde mature comprend deux genres de lymphomes : leucémie lymphoïde et non Hodgkinien continuels.

Ce groupe de tumeurs est caractérisé par un immunophénotype qui est assimilé aux cellules lymphoïdes normales. Elles également n'ont pas les caractéristiques antigéniques liées à l'immaturité, y compris TdT, CD34, ou CD45.

Des cellules lymphoïdes matures peuvent être divisées dedans aux cellules de B, aux cellules de T, et aux cellules tueuses naturelles (NK). Les études ont prouvé qu'une cytométrie de flux en couleurs peut être employée pour recenser le lymphome de Hodgkin dans les patients.

Tumeurs lymphoïdes de lymphocyte B mature

L'immunophénotypage peut être employé pour diagnostiquer le lymphome de lymphocyte B, en recensant les antigènes cellulaires anormaux. Cette méthode peut également être employée pour recenser des objectifs pour le traitement basé sur des anticorps et pour fournir également des informations pronostiques concernant l'expression des molécules, telles que CD38, et ZAP-70, notamment.

Deux genres d'anomalies dans le phénotype sont employés pour recenser les lymphocytes B matures néoplasiques : restriction de réseau léger d'immunoglobuline et expression anormale d'antigène. Les cellules de B matures expriment seulement un type unique de réseau léger d'immunoglobuline - kappa ou lambda, alors que les cellules cancéreuses expriment plusieurs autres antigènes.

Tumeurs lymphoïdes matures de T et de NK-cellule

L'immunophénotypage est également employé pour recenser T mature ou des NK-cellules. Cependant, il est plus difficile de recenser les phénotypes anormaux de T ou des NK-cellules utilisant l'immunophénotypage comparé à recenser les lymphocytes B anormalement formés. C'est parce que la catégorie de T et des NK-cellules moins est déterminée et concerne l'entrée d'information de plusieurs sources pour confirmer son identité.

Après recensement d'une population comme T ou des NK-cellules, la cytométrie de flux peut être employée pour trouver davantage la présence des bornes, telles que CD25 et CD52. Les méthodes employées pour dériver l'information d'immunophénotypique sont cytométrie de flux et immunohistochimie de partie de paraffine (IHC).

Troubles de cellules de plasma

Les troubles de cellules de plasma concernent les gammaglobulines accrues de sérum ou d'urine, et ils peuvent être divisés dedans à la prolifération réactive et à la pathologie gamma monoclonale. Des cellules de plasma anormales sont caractérisées par les comportements suivants : nombre accru, phénotype anormal, clonality anormal, et une combinaison de la morphologie, de la radiologie, et des découvertes cliniques.

Pour recenser les cellules de plasma anormales, et distinguer les cellules lymphoïdes et de plasma, cytométrie de flux est exécuté. Des caractéristiques d'immunophénotypique peuvent également être employées pour dériver l'information pour le pronostic.

Tumeurs de blastique

La leucémie et le lymphome peuvent également présenter avec des souffles et des cellules anormales dans le sang ou les liquide organiques et l'immunophénotypage de nouveau peuvent être exécutés pour recenser immature ou des cellules anormales, et pour les discerner des cellules immatures qui peuvent être présentes dans la moelle osseuse et le thymus.

Last Updated: Oct 25, 2018

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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