Immunophenotyping no Cytometry de fluxo

Immunophenotyping cytometric do fluxo envolve analisar uma população heterogênea das pilhas a fim identificar uma população da pilha do interesse.

Pilha anormal com os antígenos para ser detectados usar o cytometry immunophenotyping e de fluxoCrédito de imagem: sciencepics/Shutterstock

Etapas de Immunophenotyping

  1. As pilhas de linhagens diferentes são identificadas e caracterizadas como pilhas maduras ou imaturas.
  2. As pilhas anormais são identificadas basearam em diferenças na expressão do antígeno.
  3. As diferenças em pilhas normais e anormais, tais como a presença ou a ausência de determinados antígenos são comparadas e documentadas.
  4. Os dados são analisados então para fazer o diagnóstico (se necessário), e testes adicionais tais como o immunohistochemistry, citogenética convencional, e a hibridação in situ da fluorescência (FISH) é realizada para confirmar o diagnóstico e para fazer uns conlusions mais adicionais.
  5. Os dados podem igualmente ser usados para desenvolver testes prognósticos para doenças específicas.

Combinando immunophenotyping com o cytometry de fluxo

Immunophenotyping pode envolver tipos numerosos da pilha. As seguintes secções tratam as aplicações de immunophenotyping no cytometry de fluxo para cinco tipos das amostras.

Neoplasma lymphoid maduros

O neoplasma ou o crescimento anormal das pilhas do tecido lymphoid maduro incluem dois tipos dos linfomas: leucemia lymphoid e non-Hodgkin crônicos.

Este grupo de neoplasma é caracterizado por um immunophenotype que seja similar às pilhas lymphoid normais. Igualmente não têm as características antigénicas associadas com a imaturidade, incluindo TdT, CD34, ou CD45.

As pilhas lymphoid maduras podem ser divididas dentro às pilhas de B, às pilhas de T, e às pilhas de assassino (NK) naturais. Os estudos mostraram que um cytometry de fluxo multicolorido pode ser usado para identificar o linfoma de Hodgkin nos pacientes.

Neoplasma lymphoid da B-pilha madura

Immunophenotyping pode ser usado para diagnosticar o linfoma da B-pilha, identificando antígenos celulares anormais. Este método pode igualmente ser usado para identificar alvos para a terapia baseada em anticorpos e para fornecer igualmente a informação prognóstica em relação à expressão das moléculas, tais como CD38, e ZAP-70, entre outros.

Dois tipos das anomalias no fenótipo são usados identificando B-pilhas maduras neoplásticas: limitação da corrente clara da imunoglobulina e expressão aberrante do antígeno. As pilhas de B maduras expressam somente um único tipo de corrente clara da imunoglobulina - kappa ou lambda, visto que as células cancerosas expressam diversos outros antígenos.

Neoplasma lymphoid maduros de T e de NK-pilha

Immunophenotyping é usado igualmente para identificar T ou NK-pilhas maduras. Contudo, é mais difícil identificar os fenótipos anormais de T ou de NK-pilhas usando immunophenotyping comparado a identificar B-pilhas anormalmente dadas forma. Isto é porque a classificação de T e de NK-pilhas menos é estabelecida e envolve a entrada da informação de diversas fontes para confirmar sua identidade.

Após ter identificado uma população como T ou NK-pilhas, o cytometry de fluxo pode ser usado para detectar mais a presença de marcadores, tais como CD25 e CD52. Os métodos usados para derivar a informação immunophenotypic são cytometry de fluxo e immunohistochemistry da secção da parafina (IHC).

Desordens da pilha de plasma

As desordens da pilha de plasma envolvem globulina de gama aumentadas do soro ou da urina, e podem ser divididas dentro à proliferação reactiva e à patologia monoclonal da gama. As pilhas de plasma aberrantes são caracterizadas pelos seguintes comportamentos: número aumentado, fenótipo anormal, clonality anormal, e uma combinação de morfologia, de radiologia, e de resultados clínicos.

Para identificar as pilhas de plasma anormais, e distingui-las entre pilhas lymphoid e de plasma, cytometry de fluxo são executadas. Os dados de Immunophenotypic podem igualmente ser usados para derivar a informação para o prognóstico.

Neoplasma de Blastic

A leucemia e o linfoma podem igualmente apresentar com explosões e as pilhas anormais nos líquidos do sangue ou de corpo e em immunophenotyping outra vez podem ser executadas para identificar pilhas imaturas ou anormais, e para distinguir das pilhas imaturas que podem estam presente na medula e no thymus.

Fontes:

[Leitura adicional: cytometry de fluxo]

Last Updated: Oct 25, 2018

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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