Facteurs de intervention dans le modèle d'analyse

Il y a plusieurs facteurs qui peuvent affecter la sensibilité et la fiabilité d'une analyse. Celles-ci doivent être considérées en sélectant un système d'amplification de dépistage ou de signe.

Par des medias médicaux dCrédit d'image : Medias médicaux d'Alila/Shutterstock

La gamme de l'analyse

Une des opérations les plus critiques dans le modèle d'analyse est le réglage fin de la sensibilité. La concentration de l'analyte d'objectif doit faire partie d'une marge des concentrations où la réaction d'analyse est directement proportionnelle à la concentration.

Au-dessus ou en dessous de cette gamme, des caractéristiques quantitatives concernant la concentration d'une molécule ne peuvent pas être sûrement impliquées, et ainsi l'échantillon exige des opérations de concentration ou de dilution.

Fluorescence

Une lecture fluorescente se fonde sur l'interaction entre l'analyte d'objectif dans un échantillon et une molécule intégrée dans l'analyse, qui produit ou évite la production de la lumière d'une longueur d'onde et d'une intensité particulières une fois rassemblée. La présence et la concentration d'une molécule peuvent être déterminées en surveillant ces interactions.

Cependant, il est important de s'assurer que l'échantillon à analyser ne contient pas également d'autres molécules capables de l'interaction avec le fluorophore contenu dans l'analyse, par l'excitation ou le trempage.

C'est le plus couramment un problème quand les lysates bruts de cellules, les homogénats de tissu, ou d'autres spécimens biologiques non transformés sont le sujet de l'enquête. Il peut également être induit par le choix faible des composantes, telles que les agents réducteurs ou les détergents, comme utilisé dans quelques analyses de protéine.

Dans des analyses enzymatiques ou cellulaires fluorogenic, utilisées pour l'examen critique composé et profilantes des buts, les composés de ce type eux-mêmes brilleraient par fluorescence, de ce fait donnant un signe de faux positif, ou manifestez alternativement l'activité inhibitrice où aucun n'existe réellement.

L'interférence fluorescente de ce type peut être réduite à l'aide des journalistes fluorescents qui excitent et émettent à de plus longues longueurs d'onde que les molécules trouvées dans un milieu biologique.

Amplification enzymatique

L'amplification enzymatique est fréquemment employée en fonctionnant avec les biomolécules qui sont capables du l'auto-montage à partir d'une matrice, telle que l'ADN ou l'ARN. Ceci améliore la taille de l'échantillon massivement, tenant compte des augmentations grandes de fiabilité et sensibilité, cependant, il augmente également la possibilité d'introduire l'erreur exponentielle dans les résultats obtenus.

La confiance que les analyses enzymatique-accouplées ne mesurent pas par mégarde une molécule autre que l'analyte d'objectif est affirmation essentielle, mais autre que s'accoupler produit réellement l'inhibition pendant les analyses d'examen critique est juste comme importante.

C'est parce que les enzymes peuvent entrer en contact pour produire ou tremper la fluorescence, mais pas réellement de manière permanente des couples, produisant de ce fait un faux positif. Des opérations telles que la précipitation (immuno) ou la purification partielle devraient être considérées si on soupçonne des substances de concurrence pour être présentes dans un échantillon.

D'autres facteurs

Le nombre et la variété de facteurs affectant l'exactitude et la fiabilité des analyses dépendent entièrement de l'échantillon et de l'analyse en question.

Il convient noter qu'il est peu susceptible exécuter une analyse destinée à la mesure d'une molécule dans un type ou un tissu particulier de cellules acceptablement sur des échantillons provenant d'autres sources.

D'autres molécules sans compter que ceux qui concurrencent directement de l'analyte d'objectif peuvent être un facteur d'interférence, telle que les protéines obligatoires d'hormone, qui bloquent ou éliminent l'analyte de l'échantillon. D'autres molécules peuvent modifier la conformation d'analyte, changer le mode obligatoire, ou entraîner d'autres transformations qui évitent le fonctionnement correcte de l'analyse.

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Last Updated: Nov 1, 2018

Michael Greenwood

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Michael Greenwood

Michael graduated from Manchester Metropolitan University with a B.Sc. in Chemistry in 2014, where he majored in organic, inorganic, physical and analytical chemistry. He is currently completing a Ph.D. on the design and production of gold nanoparticles able to act as multimodal anticancer agents, being both drug delivery platforms and radiation dose enhancers.

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