Cromatografía líquida comparado con la cromatografía de gas

La cromatografía es un método probado usado para separar muestras complejas en sus componentes, y es indiscutible el procedimiento más importante para aislar y purificar las substancias químicas. Se clasifica en dos tipos basados en el estado físico de la fase movible usada - cromatografía líquida (LC) y cromatografía de gas (GC).

La cromatografía incluye una serie de procedimientos que tengan en campo común la separación de componentes de una mezcla por una serie de operaciones del equilibrio que den lugar a la separación de las entidades como resultado de su división entre dos fases distintas - una estacionaria con una superficie grande y otra que se mueve que esté en contacto con la primera.

Cromatografía líquida

El LC es una de las técnicas de separación más populares usadas en los laboratorios para la separación de una mezcla de la muestra en base de las acciones recíprocas entre las moléculas individuales en la muestra con las fases estacionarias y movibles ya mencionadas. Puede ser realizado en una olumna o en una hoja con una fase movible líquida y apoyo sólido como la fase estacionaria.

La fase movible viaja abajo de la fase estacionaria que trae a lo largo de los componentes de la muestra separada durante la cromatografía. En el LC, la acción recíproca entre las moléculas de la muestra y el ambiente de la cromatografía se puede basar en varios factores tales como talla, carga, atascamiento de la afinidad, o hydrophobicity.

Una forma avanzada de la técnica del LC que utiliza alta presión para forzar la muestra a través de la olumna se llama cromatografía líquida del alto rendimiento o la cromatografía líquida de alta presión (HPLC). Es actualmente el método lo más extensivamente posible usado de análisis cuantitativo en laboratorios farmacéuticos del análisis y en la industria farmacéutica en conjunto.

Cromatografía de gas

La CROMATOGRAFÍA GASEOSA es otra técnica ampliamente utilizada de la cromatografía. Aquí la fase movible es generalmente un gas inerte tal como helio o argón (también conocido como el gas portador), mientras que la técnica sí mismo se realiza en un capilar o una olumna cargada compuesta de materiales inertes. Aunque las olumnas cargadas son más baratas y conviviales, las olumnas capilares ofrecen la mayor resolución y son relativamente costosas.

La fase estacionaria es un macizo granular (es decir cromatografía gas-sólido), o un macizo granular recubierto con una película fina del líquido no volátil (es decir cromatografía gaseosa líquida). Una mayoría de cromatografías de gas analíticas emplea las olumnas capilares, donde la fase estacionaria recubre directamente las paredes de un tubo con un diámetro bajo.

La CROMATOGRAFÍA GASEOSA se utiliza generalmente para separar composiciones vaporizables o del volátil y para probar su pureza. También se utiliza para cuantificar los diversos componentes en una mezcla. Aunque la volatilidad de una muestra sea un requisito previo para el análisis de la CROMATOGRAFÍA GASEOSA, la modificación del grupo funcional de cierta molécula por un proceso conocido como derivatización habilita el análisis de las composiciones que no se podrían vigilar de otra manera fácilmente por la CROMATOGRAFÍA GASEOSA.

En CROMATOGRAFÍA GASEOSA, la separación de componentes de una mezcla depende del largo y de la temperatura de la olumna, así como del flujo del gas portador. Estas condiciones se deben optimizar para un análisis determinado.

En CROMATOGRAFÍA GASEOSA y el LC, la detección de los componentes individuales en la muestra se puede realizar por varios métodos. El método de detección más común y más sensible es la espectrometría de masa, que determina las composiciones basadas en la organización atómica de la muestra de las moléculas y de su estado de la carga.

Diferencias en medio del LC y de la CROMATOGRAFÍA GASEOSA

Las diferencias claves entre el líquido y la cromatografía de gas se tabulan abajo.

Cromatografía líquida

Cromatografía de gas

La fase movible es un líquido

La fase movible es un gas

La separación se basa en la acción recíproca del soluto con el ambiente de la cromatografía

La separación se basa sobre todo en los puntos de ebullición de las moléculas del soluto

Puede ser realizado en una hoja o una olumna

Puede ser realizado solamente en una olumna

Puede ser utilizado para separar cualquier composición soluble, e.g aminoácidos, proteínas, drogas, ácidos nucléicos, lípidos, antioxidantes, hidratos de carbono, y polímeros naturales y artificiales

Puede ser aplicado en la separación de composiciones volátiles y de mezclas gaseosas

Realizado generalmente en las composiciones tan sensibles al calor de la temperatura ambiente puede ser analizado con seguridad usando la técnica

Realizado en substancias inestables más altas de las temperaturas pudo conseguir tan térmicamente desnaturalizado

La retención del soluto aquí se basa en la acción recíproca de solutos con las fases movibles y estacionarias así que es fácil optimizar resultados

La separación se basa en los puntos de ebullición de las moléculas del soluto así que no es muy flexible en términos de separación óptima

Esto es una técnica relativamente más lenta

El análisis se mide más rápidamente y generalmente en minutos, aunque pueda tomar tan poco como un par de segundos

Da generalmente un mayor pico o una banda más amplia dando por resultado una resolución más inferior

Ofrece una resolución comparativamente mejor

Los disolventes polares de las aplicaciones tienen gusto del agua o del metanol

Utiliza cualquier disolvente que se vaporice

Revista adicional del Dr. Tomislav Meštrović, Doctor en Medicina, doctorado

Referencias

  1. http://chemwiki.ucdavis.edu/Core/Analytical_Chemistry/Instrumental_Analysis/Chromatography/Liquid_Chromatography
  2. http://www.cdc.gov/niosh/pdfs/74-177-k.pdf
  3. https://www.jcu.edu.au/advanced-analytical-centre/analytical-facilities/all-instruments/gas-chromatography-liquid-chromatography-gclc
  4. http://cdn.intechopen.com/pdfs/32817.pdf
  5. http://www.chem.ucla.edu/~bacher/General/30BL/gc/theory.html
  6. http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ac60117a004?journalCode=ancham
  7. http://arlok.com/articles/High-Performance%20Liquid%20Chromatography.pdf
  8. Blumberg LM. Teoría de la cromatografía de gas. En: CF de Poole, editor. Cromatografía de gas, primera edición. Elsevier, 2012; págs. 19-78.
  9. Hacendado CK. Análisis químico: Análisis de gas. En: Walt Boyes, editor. Libro de consulta de la instrumentación. Butterworth-Heinemann, 2009; págs. 327-340.

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Last Updated: Feb 26, 2019

Susha Cheriyedath

Written by

Susha Cheriyedath

Susha has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Chemistry and Master of Science (M.Sc) degree in Biochemistry from the University of Calicut, India. She always had a keen interest in medical and health science. As part of her masters degree, she specialized in Biochemistry, with an emphasis on Microbiology, Physiology, Biotechnology, and Nutrition. In her spare time, she loves to cook up a storm in the kitchen with her super-messy baking experiments.

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Comments

  1. Paul Salverda Paul Salverda United States says:

    There are a number of mistakes.  Hydrogen is not an inert gas.  GC column separation is not only by boiling point or vapor pressure. She mentions gas/liquid partitioning herself, which should lead to talking about the wide variety of GC column stationary phases that are necessary for the diversity of GC applications. GC is not only for volatile compounds as separation of gases is a typical application. Many non-volatile compounds can also be derivatized before analysis.  GC methods are only some few seconds to many minutes long. Any solvent that vaporizes can be used, not only the two mentioned.   An LC specialist should talk about all the mistakes in that part of the article.

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