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Tecniche di biologia molecolare

La biologia molecolare è un'area di biologia responsabile del trattamento della trascrizione del gene per rendere il RNA, la traduzione di RNA nelle proteine ed il ruolo gioco di quelle proteine nella funzione cellulare. Da verso il 1960, i biologi molecolari hanno messo a punto i metodi per identificare, isolare e manipolare le componenti molecolari in celle compreso DNA, RNA e proteine.

Parecchie tecniche utilizzate nel campo di biologia molecolare sono descritte qui sotto.

  • Reazione a catena della polimerasi (PCR) - questa è una delle tecniche più importanti utilizzate nella biologia molecolare e basicamente è usata per copiare il DNA. La PCR permette che una sola sequenza del DNA sia ampliata in milioni di molecole del DNA. La PCR può anche essere usata per introdurre le mutazioni all'interno del DNA o per presentare i siti speciali degli enzimi della restrizione. Inoltre, la PCR è usata per determinare se una determinata sequenza di DNA esiste in una libreria del cDNA. I tipi differenti di PCR comprendono la PCR inversa della trascrizione (RT-PCR) per l'amplificazione di RNA e la PCR quantitativa (QPCR) per misurare la quantità di presente del DNA o del RNA.
  • Clonazione di espressione - questa tecnica aiuta gli scienziati a capire la funzione della proteina. Il DNA che codifica per una proteina particolare è clonato o copiato facendo uso della PCR in un vettore di espressione chiamato un plasmide. Il plasmide è presentato ad una cella animale o ad una cella batterica. Questo plasmide ha elementi del promotore che possono stimolare l'alta espressione della proteina desiderata in moda da potere poi esaminare la sua attività enzimatica.
  • Elettroforesi del gel - questa è un'altra tecnica importante utilizzata nella biologia molecolare per separare il DNA, il RNA e le proteine basate sulla loro dimensione applicando un campo elettrico poichè il DNA è gel di agarosio passato.
  • Macromolecola che macchia e che sonda - i trattamenti come macchiare del sud, macchiare nordico, macchiare occidentale e macchiare orientale sono usati per trasferire il DNA o proteine del RNA su una membrana macchiante (spesso dopo che elettroforesi del gel) così possono essere macchiati o essere contrassegnati radioattivo e poi essere visualizzati.
  • Schiere - i microarrays Di un DNA o il chip del DNA è una collezione di punti del DNA montati su una superficie solida quale una diapositiva del microscopio che può essere utilizzata per quantificare simultaneamente i livelli di espressione della proteina attraverso tantissimi geni. La tecnica può anche essere usata alle varie regioni genomiche differenti di genotipo.

Sorgenti

  1. http://www.cs.helsinki.fi/bioinformatiikka/mbi/courses/09-10/itb/Lectures_1509_and_1709.pdf
  2. http://www.esp.org/mol-bio.pdf
  3. http://www.fao.org/docrep/014/i1905e/i1905e00.pdf
  4. http://www.nyu.edu/projects/fitch/courses/moleccell/precellevo.pdf
  5. http://www.pasteur.fr/~tekaia/BCGA/Ch03_molbio.pdf

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Last Updated: Feb 26, 2019

Dr. Ananya Mandal

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Dr. Ananya Mandal

Dr. Ananya Mandal is a doctor by profession, lecturer by vocation and a medical writer by passion. She specialized in Clinical Pharmacology after her bachelor's (MBBS). For her, health communication is not just writing complicated reviews for professionals but making medical knowledge understandable and available to the general public as well.

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