Franchissement de la dégradation d'ADN en la Science légale

Des échantillons légaux qui ont été endommagés ou à bon escient détruits doivent être réparés pour l'analyse et l'usage devant le tribunal. Plusieurs méthodes existent qui peuvent réparer ces dégâts.

Illustration de dégradation d'ADN - par le studio de tête d'épingle

Studio de tête d'épingle | Shutterstock

Mort cellulaire et dégradation d'ADN

La mort cellulaire active différentes enzymes intracellulaires, telles que des lipases, des protéases, et des nucleases. Les Lysosomes, celui contiennent les enzymes hydrolytiques, peuvent décomposer des biomolécules comme des protéines d'histone. Le démontage des protéines d'histone facilite consécutivement l'action des endonucléases qui peuvent fendre l'ADN.

Nucleases a relâché par des micros-organismes dans l'environnement dégradent davantage des fragments d'ADN, et une augmentation en calcium cytosolique libre active les phospholipases qui dégradent la membrane et mènent au desserrage des enzymes plus dégradantes. Ainsi, les dégâts répandus d'ADN sont la goujon-mort imminente.

ACP amplifiant l'ADN dégradé

Les éditions au sujet de l'ACP de l'ADN dégradé peuvent être attribuées à trois problèmes : échec dans l'amplification, l'amplification préférentielle, et les lésions miscoding. Pour recenser des séquences répétées en tandem courtes (STRs) dans l'ADN exige au moins 1 NG d'ADN et de 28-30 cycles d'amplification.

L'amplification peut être améliorée par l'ajout de la polymérase de Taq, et les cycles supplémentaires de l'ACP. Dans le cas des échantillons dégradés, des amplicons plus courts peuvent être amplifiés plus fréquemment, parce que de plus longs amplicons sont dégradés. Ceci désigné sous le nom de l'amplification préférentielle. Pour surmonter cette édition, des technologies douces, telles que la période de la spectrométrie de masse de vol ou de la séparation électrophorétique de microcanal peuvent être employées.

ADN mitochondrial (ADNmt)

L'analyse de l'ADN mitochondrial (ADNmt) a été considérée comme comme stratégie alterne recensere l'ADN génomique.  Cet ADN circulaire est présent dans le cytoplasme des mitochondries et plus d'une copie d'ADNmt peut être présente dans les mitochondries.

La plupart des cellules mammifères peuvent avoir 200-1700 copies d'ADNmt, qui le rendent très utile pour des investigations concernant les groupes dégradés d'ADN des êtres humains - particulièrement pour les restes squelettiques, y compris des os, des dents et des ongles.

Améliorations des méthodes de pré-ACP et d'ACP

Pour des échantillons avec le nombre de copie inférieur, des extractions répétées et les amplifications sont exécutées pour réduire des erreurs. D'autres méthodes comprennent la réduction du volume d'ACP, augmentation du numéro de cycle d'ACP, ACP emboîté, amplifiant le génome entier avant ACP, retirant des ions après l'opération d'amplification, ou augmentant la période de l'injection au cours du processus de l'électrophorèse capillaire. Une autre stratégie augmente également la concentration de l'amorce. Pour recenser des personnes disparues ou des restes d'être humain, taper inférieur de numéro de copie peut être exécuté.

Quelles sont quelques méthodes de réparation de l'ADN ?

Des stratégies peuvent également être utilisées pour réduire les dégâts à l'ADN, bien que ces méthodes soient actuel limitées. Une méthode concerne réparer l'ADN dans l'étape pré-ACP, où les entailles sont traduites par l'ADN polymérase I d'Escherichia coli et les lacunes sont comblées par la ligase de T4 ADN. De telles méthodes où deux enzymes concertées sont employées peuvent seulement être utilisées en présence d'un 3' l'OH ou de 5' le terminus de P qui n'a pas été modifié. Celles-ci peuvent être oblongues et scellées par la ligase de l'ADN polymérase I et du T4 ADN, respectivement.

Une autre méthode est amplification multiple de déplacement, où le génome entier peut être amplifié utilisant de petits niveaux d'ADN génomique. Ceci est réalisé par amplification isotherme utilisant un ADN polymérase de bactériophage.

Des réticulations entre les sucres et d'autres composantes ont été montrées pour être retirées utilisant le bromure N-phénylique de thiazolium (PTB). Cependant, dans certains cas, on l'a observé que PTB peut également entraîner l'inhibition et le démontage d'ACP.

Comment l'ADN peut-il être préservé ou évité de subir davantage de délabrement ?

Les méthodes pour préserver et éviter davantage de dégradation, comprennent un environnement sec, parce que la présence de l'eau et l'humidité encouragent l'accroissement des bactéries et promeuvent les dégâts. De même, la basse température peut également préserver et limiter les dégâts d'ADN, car elle réduit le régime de la décomposition de base de nucléotide.

Last Updated: Dec 17, 2018

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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