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Technique de bride de correction

La bride de correction est une technique de laboratoire pour étudier des courants en cellules vivantes. Elle est habituellement effectuée en appliquant une tension en travers de la membrane cellulaire et en mesurant le courant donnant droit.

Une technique de bride de courant alterne est également parfois employée, où un courant est réussi par la membrane et les modifications donnantes droit de tension sont mesurées. Ces modifications sont appelées le potentiel d'action.

La technique de bride de correction a été développée pendant les années 1970 par Erwin Neher et Bert Sakmann afin de mesurer les courants des canaux ioniques. Ceci a activé des études des procédés de cellules tels que l'activité de nerf.

La technique se sert d'un tube de verre creux rempli de solution d'électrolyte dans laquelle il y a des paires d'électrodes branchées à un amplificateur. La première électrode est mise dans le contact avec la membrane d'une cellule, et une autre électrode est mise dans une solution autour de la cellule. Le circuit forme entre l'enregistrement et l'électrode de référence.

serrage de correction Cellule-fixé

Dans la correction cellule-fixée se serrant, une pipette est scellée à la membrane cellulaire afin de mesurer le courant par un ou quelque canaux ioniques dans cet endroit de la membrane. La membrane cellulaire demeure intacte. L'avantage de fixer seulement à l'extérieur de la membrane est que la structure cellulaire intérieure n'est pas dérangée, et, par conséquent, les mécanismes intracellulaires fonctionnent normalement.

serrage de correction d'Entier-cellule

Une bride de correction entière de cellules mesure des courants par la membrane cellulaire entière. Elle est effectuée assimilé à la correction jointe par cellule se serrant, mais plus d'aspiration est appliquée afin de rompre la membrane. Le tube peut alors atteindre l'espace intracellulaire, où des ligands ou les médicaments peuvent être ajoutés pour étudier leurs effets. Une autre méthode de rompre la membrane est par l'application d'un grand pouls actuel.

À l'envers bride de correction

À l'envers la bride de correction fonctionne à côté de fixer une pièce de membrane cellulaire dans le tube de verre, exposant sa surface cytosolique. Ceci donne l'accès à la surface par le bain de solution d'électrolyte. Cette méthode est employée quand des modifications sont apportées sur la surface intracellulaire des canaux ioniques.

Serrage de correction d'Extérieur-à l'extérieur

Complémentaire à l'envers au serrage de correction, la bride d'extérieur-à l'extérieur commence par une technique entière de cellules. Après que la membrane soit rompue, l'électrode est entraînée hors de la cellule, et un bulbe rachidien de membrane dépasse de lui pendant qu'un morceau de la membrane détache de la cellule et se reprend dans un plus petit compartiment. L'extérieur originel de la membrane est maintenant sur l'intérieur, activant des études de la surface de la membrane intérieure, y compris la déménager à un autre bain de solution.

Serrage de correction desserré

Le serrage de correction desserré est assimilé à la cellule jointe se serrant, sauf que le visa utilisé pour fixer le tube à la cellule est plus léger. L'avantage du serrage desserré de visa est que la pipette peut être retirée à plusieurs reprises et la membrane restent toujours intacte, permettant des mesures de répétition. Un désavantage est que la résistance entre la pipette et la membrane est beaucoup inférieure, et le courant peut couler par le visa, réduisant la définition avec de petits courants.

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Last Updated: Oct 23, 2018

Dr. Catherine Shaffer

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Dr. Catherine Shaffer

Catherine Shaffer is a freelance science and health writer from Michigan. She has written for a wide variety of trade and consumer publications on life sciences topics, particularly in the area of drug discovery and development. She holds a Ph.D. in Biological Chemistry and began her career as a laboratory researcher before transitioning to science writing. She also writes and publishes fiction, and in her free time enjoys yoga, biking, and taking care of her pets.

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