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Técnica da braçadeira de correcção de programa

A braçadeira de correcção de programa é uma técnica de laboratório para estudar correntes em pilhas vivas. É realizada geralmente aplicando uma tensão através da membrana de pilha e medindo a corrente resultante.

Uma técnica da braçadeira da corrente alternativa é usada igualmente às vezes, onde uma corrente é passada através da membrana e as mudanças resultantes da tensão são medidas. Estas mudanças são chamadas o potencial de acção.

A técnica da braçadeira de correcção de programa foi desenvolvida nos anos 70 por Erwin Neher e por Bert Sakmann a fim medir as correntes dos canais do íon. Isto permitiu estudos de processos da pilha tais como a actividade do nervo.

A técnica utiliza uma câmara de ar de vidro oca enchida com uma solução do eletrólito em que há uns pares de eléctrodos conectados a um amplificador. O primeiro eléctrodo é posto no contacto com a membrana de uma pilha, e um outro eléctrodo é colocado em uma solução em torno da pilha. O circuito forma entre a gravação e o eléctrodo de referência.

aperto de correcção de programa Pilha-anexado

Na correcção de programa pilha-anexada que aperta, uma pipeta é selada à membrana de pilha a fim medir a corrente através de um ou algum canal do íon nessa área da membrana. A membrana de pilha permanece intacto. A vantagem de anexar somente à parte externa da membrana é que a estrutura de pilha interna não está perturbada, e, daqui, os mecanismos intracelulares funcionam normalmente.

aperto de correcção de programa da Inteiro-pilha

Uma braçadeira de correcção de programa inteira da pilha mede correntes através da membrana de pilha inteira. É realizada similarmente à correcção de programa anexada pilha que aperta, mas mais sucção é aplicada a fim romper a membrana. A câmara de ar pode então alcançar o espaço intracelular, onde as ligantes ou as drogas podem ser adicionadas para estudar seus efeitos. Um método alternativo de romper a membrana é pela aplicação de um grande pulso actual.

Dentro-para fora da braçadeira de correcção de programa

O interior - para fora a braçadeira de correcção de programa funciona anexando uma parte de membrana de pilha à câmara de ar de vidro, expor sua superfície cytosolic. Isto dá o acesso à superfície através do banho da solução do eletrólito. Este método é usado quando as mudanças estão sendo feitas na superfície intracelular dos canais do íon.

Aperto de correcção de programa da Parte externa-para fora

Complementar dentro-para fora ao aperto de correcção de programa, a braçadeira da parte externa-para fora começa com uma técnica inteira da pilha. Depois que a membrana é rompida, o eléctrodo está desenhado fora da pilha, e um bulbo da membrana projecta-se dele enquanto um bit da membrana destaca da pilha e se reforma em um compartimento menor. A parte externa original da membrana está agora no interior, permitindo os estudos da superfície interna da membrana, incluindo movendo a para um outro banho da solução.

Aperto de correcção de programa fraco

O aperto de correcção de programa fraco é similar à pilha anexada que aperta, salvo que o selo usado para anexar a câmara de ar à pilha é mais leve. A vantagem do aperto fraco do selo é que a pipeta pode ser removida repetidamente e a membrana ainda permanece intacto, permitindo medidas da repetição. Uma desvantagem é que a resistência entre a pipeta e a membrana é muito mais baixa, e a corrente pode escapar através do selo, reduzindo a definição com correntes pequenas.

Fontes:

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Last Updated: Oct 23, 2018

Dr. Catherine Shaffer

Written by

Dr. Catherine Shaffer

Catherine Shaffer is a freelance science and health writer from Michigan. She has written for a wide variety of trade and consumer publications on life sciences topics, particularly in the area of drug discovery and development. She holds a Ph.D. in Biological Chemistry and began her career as a laboratory researcher before transitioning to science writing. She also writes and publishes fiction, and in her free time enjoys yoga, biking, and taking care of her pets.

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