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Despliegue bacteriófago: Usos en la investigación

El despliegue bacteriófago es una técnica analítica usada para estudiar acciones recíprocas de la proteína-proteína y el lazo entre una proteína y la DNA de codificación.

Ejemplo de un bacteriófago - el componente usado en despliegue bacteriófago - por Sebastian KaulitzkiSebastian Kaulitzki | Shutterstock

El despliegue bacteriófago comienza incorporando la proteína del interés en la superficie externa del bacteriófago. Esto es hecha empalmando el segmento de la DNA normal que codifica para la proteína en la serie de la DNA del bacteriófago que codifica para las proteínas bacteriófagas de la cubierta.

Cuando el bacteriófago infecta una bacteria, experimenta un proceso de la réplica, usando la maquinaria celular ofrecida por la célula bacteriana del ordenador principal. La proteína del interés se debe producir durante este proceso, y así, cualquier progenie más otra producirá esta proteína sobre la infección bacteriana.

Ciertos bacteriófagos son de uso general para el despliegue bacteriófago, incluyendo M13, la lambda, y T7. Los tres infectan el Escherichia Coli, un organismo modelo procariótico extensamente estudiado que se pueda crecer fácilmente en condiciones del laboratorio. Esto habilita la proliferación y el estudio fáciles de estos diversos bacteriófagos.

Selección de la afinidad

Se ha creado el despliegue bacteriófago grande “bibliotecas”, que consisten en una mezcla masivo diversa de los bacteriófagos que visualizan diversas proteínas no nativas alterando la serie viral de la DNA.  Estas bibliotecas se pueden utilizar para revisar para las proteínas que atan a ciertos receptores.

Una técnica de uso general en la purificación de la proteína es cromatografía de afinidad. Esta técnica se puede utilizar en coordinación con despliegue bacteriófago reparando los receptores específicos del interés sobre una olumna y un funcionamiento una biblioteca bacteriófaga a través de esta olumna.

El bacteriófago con una proteína superficial que tenga afinidad para estos receptores se conserva y se puede después purificar y crecer en una cultura de las células de Escherichia Coli. Esta técnica de la investigación se puede utilizar para determinar la función de una proteína desconocida determinando las proteínas que obra recíprocamente con.

Diseño de la droga

Las proteínas que atan a los receptores pueden actuar como estimuladores o inhibidores potenciales de los caminos que el receptor regula normalmente. La mayoría de las enfermedades se pueden relacionar con los diversos caminos metabólicos en la carrocería que tienen proteínas asociadas a ellas.

La purificación de las proteínas de la biblioteca bacteriófaga del despliegue puede desarrollar las nuevas drogas potenciales. El sitio activo de una proteína se puede transformar de diversas maneras, y la proteína se puede revisar usando la selección bacteriófaga de la afinidad del despliegue. Esto permite la medición de la fuerza del substrato que ata en el contexto de la mutación.

Las series de aminoácido que están implicadas en el atascamiento pueden entonces obtenido observando la DNA viral en el bacteriófago específico. Modificando el sitio activo y perfeccionando el atascamiento a un inhibidor, puede aumentar la eficacia del inhibidor y del diseño adicional de la droga.

Despliegue bacteriófago en inmunología

Las nuevas vacunas tienen disponible convertida debido a las técnicas bacteriófagas del despliegue. Usando la selección de la afinidad y los anticuerpos específicos como el receptor, los antígenos que imitan los antígenos de ciertos patógeno pueden ser purificados. La introducción de los fagos con estos antígenos en despliegue en la carrocería puede potencialmente actuar como vacuna sin la introducción del patógeno en la carrocería.

Hay también aplicaciones potenciales para el despliegue bacteriófago en diagnosis de la enfermedad. Usando los anticuerpos de un paciente a la afinidad seleccione para los antígenos obligatorios, los antígenos enfermedad-específicos puede ser descubierto que pueden mostrar la presencia de una enfermedad.

Fuentes

Further Reading

Last Updated: Jan 7, 2019

Written by

Jack Davis

Jack is a freelance scientific writer with research experience in molecular biology, genetics, human anatomy and physiology, and advanced analytical chemistry. He is also highly knowledgeable about DNA technology, drug analysis, human disease, and biotechnology.

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