Microscopie de localisation de Photoactivated dans la recherche

La microscopie de localisation de Photoactivated (PALM) est une forme de la microscopie à fluorescence superbe de définition (SR) qui permet à la représentation hautement resolved d'être produite par la désignation d'objectifs sélectrice des bornes fluorescentes dans un spécimen.

microscopie de Superbe-définition
microscopie de Superbe-définition

La technique a différé des techniques plus conventionnelles de microscopie qui étaient procurables au moment de son développement car il pouvait produire la représentation au delà de la limite de diffraction (la remarque à quelles molécules 200 nanomètre ou moins dans la taille peuvent être discerné les uns des autres).

Par l'exposition au rayonnement ultraviolet, des protéines dans un spécimen peuvent être excitées de sorte qu'elles photoactivated. Ceci permet à la position des protéines sensibles à la lumière d'être localisée. Après avoir été exposé au rayonnement ultraviolet pendant une période prolongée, ces protéines photoactivated se blanchiront et ne briller par fluorescence plus. Le procédé peut être répété jusqu'à ce que toutes les protéines dans un spécimen soient localisées.

Comme d'autres techniques de SR, PALM a des applications variées et a eu un choc massif sur la recherche biomédicale.

PALM dans des études de VIH

Le virus de l'immunodéficience humaine est un rétrovirus qui attaque des cellules de T. Il est transmis par certains fluides corporels. Les cellules de T fonctionnelles sont diminuées pendant que la condition progresse, laissant les personnes qui vivent avec le VIH susceptible des formes variées de l'infection et de quelques types de cancer. Le virus reste un problème de santé global avec 1 million de personnes détruisant leurs durées en 2016 aux états de lié au VIH.

Le VIH peut être classent par catégorie dans deux types, HIV-1 et HIV-2. Cette catégorie est basée sur les antigènes et les caractéristiques viraux appartenant à chaque type. Mondial plus de 30 millions de personnes vivent avec HIV-1. Ce type de VIH a évolué d'un virus d'immunodéficience trouvé chez les chimpanzés centrafricains connus sous le nom de SIVcpz.

Le bâillon est un polyprotein responsable d'un grand choix de fonctionnements de clavette dans l'assemblage de HIV-1. Il active l'ensemble des particules immatures à la membrane de plasma des cellules ; recrute d'autres virus aux sites de bourgeonnement (les endroits où les virus peuvent quitter la cellule hôte) et fait produire la maturation de virion. Utilisant PALM, on a observé des boîtiers de bâillon sur des cellules. Ces boîtiers classés par catégorie dans deux groupes indépendants ; grands, immobiles boîtiers responsables de l'ensemble viral et molécules mobiles et différentes de bâillon. Approximativement 40% de boîtiers ont été représentés par de plus petits et/ou différents boîtiers de bâillon. Ceci propose qu'un passage d'un petit boîtier à plus grand à un site viral d'ensemble puisse être un régime limitant l'opération dans la formation de particules de VIH.

Architecture structurelle des mitochondries

Les mitochondries sont essentielles pour le rétablissement de l'énergie en cellules eucaryotes. C'a été le sujet de beaucoup d'études utilisant des techniques de SR dues à la définition améliorée fournie par ces formes de microscopie par rapport à des techniques plus anciennes.

On a observé la première fois la structure mitochondriale utilisant PALM. Le système de cytochrome C oxydase situé dans la modification des mitochondries a été étudié, permettant à des chercheurs de comprendre mieux son agencement spatial. Ceci a préparé le terrain pour d'autres études utilisant le SR de contrôler d'autres aspects d'architecture mitochondriale qui avaient précédemment été peu clairs.

Adhérence focale de compréhension

L'adhérence focale peut être décrite comme interaction ou contact adhésif entre la matrice extracellulaire et la cellule. Ceci est facilité par des intégrines et des protéines d'échafaudage. Utilisant un mode de PALM connu sous le nom de PALM interférométrique (iPALM), les adhérences focales pouvaient être localisées et imagées. Si comparée aux caractéristiques biochimiques, la représentation produite par l'iPALM s'est avérée cohérente. Elle a également fourni des informations neuves concernant l'organisme spatial des adhérences focales.

PALM a eu un choc profond sur la recherche biomédicale et a prouvé pour avoir des applications variées. En dépit de ceci, la technique est toujours comparativement neuve, avec l'espérance de l'adaptation et changement pour répondre mieux aux besoins de ceux qui ont besoin de la représentation superbe-resolved en tant qu'élément de leur recherche.

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Last Updated: Aug 23, 2018

Maryam Mahdi

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Maryam Mahdi

Maryam is a science writer with a passion for travel. She graduated in 2012 with a degree in Biomedical Sciences (B.Sc.) from the University of Manchester. Maryam previously worked in scientific education and has produced articles, videos, and presentations to highlight the association between dietary choices and cancer. She produces a range of articles for News-Medical, with a focus on microbiology and microscopy.

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