Microscopia da localização de Photoactivated na pesquisa

A microscopia da localização de Photoactivated (PALMA) é um formulário da microscopia de fluorescência super da definição (SÉNIOR) que permite imagem lactente altamente resolved de ser produzida com da escolha de objectivos selectiva de marcadores fluorescentes dentro de um espécime.

microscopia da Super-definição
microscopia da Super-definição

A técnica diferiu de umas técnicas mais convencionais da microscopia que estivessem disponíveis na altura de sua revelação porque podia produzir a imagem lactente além do limite de difracção (o ponto em que moléculas 200 nanômetro ou menos em tamanho podem ser distintos de um outro).

Com a exposição à luz ultravioleta, as proteínas dentro de um espécime podem ser entusiasmado de modo que photoactivated. Isto permite a posição das proteínas photoactive de ser localizado. Sendo expor à luz ultravioleta por um período prolongado, estas proteínas photoactivated serão descoradas e para brilhar já não. O processo pode ser repetido até que todas as proteínas dentro de um espécime estejam localizadas.

Como outras técnicas do SÉNIOR, a PALMA tem várias aplicações e teve um impacto maciço na pesquisa biomedicável.

PALMA em estudos do VIH

O vírus de imunodeficiência humana é um retrovirus que ataque pilhas de T. É transmitido através de determinados líquidos corporais. As pilhas de T funcionais são diminuídas como a circunstância progride, deixando os indivíduos que vivem com o VIH suscetível aos vários formulários da infecção e aos alguns tipos de cancro. O vírus permanece um problema de saúde global com milhões de pessoas 1 que perde suas vidas em 2016 às circunstâncias VIH-relacionadas.

O VIH pode ser categoriza em dois tipos, HIV-1 e HIV-2. Esta classificação é baseada nos antígenos e nas características virais que pertencem a cada tipo. Global mais de 30 milhões de pessoas vivem com o HIV-1. Este tipo de VIH evoluiu de um vírus da imunodeficiência encontrado nos chimpanzés da África Central conhecidos como SIVcpz.

A mordaça é um polyprotein responsável para uma variedade de funções da chave no processo de conjunto de HIV-1. Permite o conjunto de partículas imaturas na membrana de plasma das pilhas; recruta outros vírus aos locais de brotamento (as áreas onde os vírus podem retirar a pilha de anfitrião) e faz com que a maturação do virion ocorra. Usando a PALMA, os conjuntos da mordaça em pilhas foram observados. Estes conjuntos categorizados em dois grupos separados; grandes, conjuntos imóveis responsáveis para o conjunto viral e moléculas móveis, individuais da mordaça. Aproximadamente 40% dos conjuntos foram representados por conjuntos menores e/ou individuais da mordaça. Isto sugere que uma transição de um conjunto pequeno a um maior em um local viral do conjunto possa ser uma taxa que limita a etapa na formação da partícula do VIH.

Arquitetura estrutural das mitocôndria

As mitocôndria são cruciais para a geração de energia em pilhas eucarióticas. Este foi o assunto de muitos estudos usando as técnicas do SÉNIOR devido à definição aumentada fornecida por estes formulários da microscopia em comparação com umas técnicas mais velhas.

A estrutura mitocondrial foi observada primeiramente usar a PALMA. O sistema da oxidase do citocromo c situado na matriz das mitocôndria foi estudado, permitindo que os pesquisadores compreendam melhor seu regime espacial. Isto pavimentou a maneira para uns estudos mais adicionais usando o SÉNIOR para examinar outros aspectos da arquitetura mitocondrial que tinham sido previamente obscuros.

Adesão focal compreensiva

A adesão focal pode ser descrita como a interacção ou o contacto adesivo entre a matriz extracelular e a pilha. Isto é facilitado por integrins e por proteínas do andaime. Usando um modo de PALMA conhecido como a PALMA interferometric (iPALM), as adesões focais podiam ser localizadas e imaged. Quando comparada aos dados bioquímicos, a imagem lactente produzida pelo iPALM foi encontrada para ser consistente. Igualmente forneceu a informação nova em relação à organização espacial de adesões focais.

A PALMA teve um impacto profundo na pesquisa biomedicável e provou-o ter variado aplicações. Apesar disto, a técnica é ainda comparativamente nova, com a perspectiva da adaptação e a mudança para encontrar melhor as necessidades daquelas que exigem imagem lactente super-resolved como parte de sua pesquisa.

Fontes

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Last Updated: Aug 23, 2018

Maryam Mahdi

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Maryam Mahdi

Maryam is a science writer with a passion for travel. She graduated in 2012 with a degree in Biomedical Sciences (B.Sc.) from the University of Manchester. Maryam previously worked in scientific education and has produced articles, videos, and presentations to highlight the association between dietary choices and cancer. She produces a range of articles for News-Medical, with a focus on microbiology and microscopy.

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