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Microscopia de la localización de Photoactivated en la investigación

La microscopia de la localización de Photoactivated (PALMA) es una forma de la microscopia de fluorescencia estupenda de la resolución (SR) que permite a proyección de imagen altamente resuelta ser producida con el alcance selectivo de marcadores fluorescentes dentro de un espécimen.

microscopia de la Estupendo-resolución
microscopia de la Estupendo-resolución

La técnica difirió de técnicas más convencionales de la microscopia que estaban disponibles a la hora de su revelado pues podía producir proyección de imagen más allá del límite de difracción (el punto en qué moléculas pueden ser distinguidos 200 nanómetro o menos de tamaño a partir del uno otro).

Con la exposición a la luz ultravioleta, las proteínas dentro de un espécimen pueden ser emocionadas para las photoactivated. Esto permite a la posición de las proteínas photoactive ser localizada. Siendo expuesto a la luz ultravioleta por un período prolongado, estas proteínas photoactivated serán blanqueadas y ser fluorescente no más. El proceso puede ser relanzado hasta que todas las proteínas dentro de un espécimen se localicen.

Como otras técnicas del SR, la PALMA tiene diversos usos y ha tenido un impacto masivo en la investigación biomédica.

PALMA en estudios del VIH

El virus de inmunodeficiencia humana es un retrovirus que ataca las células de T. Se transmite a través de ciertos líquidos corporales. Se disminuyen las células de T funcionales como progresa la condición, dejando a los individuos que viven con el VIH susceptible a las diversas formas de la infección y a algunos tipos de cáncer. El virus sigue siendo un problema de salud global con 1 millones de personas de que pierden sus vidas en 2016 a las condiciones VIH-relacionadas.

El VIH puede ser categoriza en dos tipos, HIV-1 e HIV-2. Esta clasificación se basa en los antígenos y las características virales que pertenecen a cada tipo. Global más de 30 millones de personas de viven con HIV-1. Este tipo de VIH se desarrolló de un virus de la inmunodeficiencia encontrado en los chimpancés centroafricanos conocidos como SIVcpz.

La mordaza es un polyprotein responsable de una variedad de funciones de la llave en el proceso de montaje de HIV-1. Habilita el montaje de partículas no maduras en la membrana de plasma de células; recluta otros virus a los sitios de florecimiento (las áreas en donde los virus pueden salir la célula huesped) y hace la maduración del virion ocurrir. Usando la PALMA, los atados de la mordaza en las células se han observado. Estos atados categorizados en dos grupos separados; atados grandes, inmóviles responsables de montaje viral y moléculas movibles, individuales de la mordaza. Los aproximadamente 40% de atados fueron representados por atados más pequeños e individuales de la mordaza. Esto sugiere que una transición de un pequeño atado más grande en un sitio viral del montaje pueda ser un régimen que limita paso en la formación de la partícula del VIH.

Configuración estructural de mitocondrias

Las mitocondrias son cruciales para la generación de energía en células eucarióticas. Éste ha sido el tema de muchos estudios usando las técnicas del SR debido a la resolución aumentada ofrecida por estas formas de la microscopia con respecto a más viejas técnicas.

La estructura mitocondrial primero fue observada usando la PALMA. El sistema de la oxidasis del citocromo c situado en la matriz de mitocondrias fue estudiado, permitiendo que los investigadores entiendan mejor su ordenación espacial. Esto pavimentó la manera para otros estudios usando el SR de escudriñar otros aspectos de la configuración mitocondrial que habían sido previamente no entendibles.

Adherencia focal de comprensión

La adherencia focal se puede describir como la acción recíproca o el contacto adhesivo entre la matriz extracelular y la célula. Esto es facilitada por los integrins y las proteínas del andamio. Usando una manera de la PALMA conocida como PALMA interferométrica (iPALM), las adherencias focales podían ser localizadas y reflejadas. Cuando estaba comparada a los datos bioquímicos, la proyección de imagen producida por el iPALM fue encontrada para ser constante. También ofreció la nueva información con respecto a la organización espacial de adherencias focales.

La PALMA ha tenido un impacto profundo en la investigación biomédica y lo ha demostrado haber variado usos. A pesar de esto, la técnica sigue siendo comparativamente nueva, con la perspectiva de la adaptación y cambio para cubrir mejor las necesidades de los que requieran proyección de imagen estupendo-resuelta como parte de su investigación.

Fuentes

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Last Updated: Aug 23, 2018

Maryam Mahdi

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Maryam Mahdi

Maryam is a science writer with a passion for travel. She graduated in 2012 with a degree in Biomedical Sciences (B.Sc.) from the University of Manchester. Maryam previously worked in scientific education and has produced articles, videos, and presentations to highlight the association between dietary choices and cancer. She produces a range of articles for News-Medical, with a focus on microbiology and microscopy.

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