Quels sont les anticorps polyclonaux (pAbs) ?

Les anticorps polyclonaux (pAbs) sont un mélange complexe de plusieurs anticorps qui sont habituellement produits par différents clones de lymphocyte B d'un animal. Ces anticorps décèlent et grippent à beaucoup de différents épitopes d'un antigène unique et par conséquent peuvent former des réseaux avec des antigènes.

Anticorps polyclonaux - par ustas7777777

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Comment est-ce que des anticorps polyclonaux sont produits ?

Préparation d'antigène

La qualité et la quantité d'antigène utilisées directement affecte la réaction immunitaire. Même les petites quantités d'impuretés mèneront aux anticorps réagissant davantage à l'impureté qu'à l'antigène désiré. Trop peu ou excessif antigène peut entraîner la sensibilisation, l'élimination, ou d'autres effets immunomodulateurs injustifiés. Ainsi, la purification de l'antigène est un procédé essentiel pour réaliser la spécificité accrue d'anticorps.

L'antigène devrait être préparé dans des conditions stériles pour s'assurer que c'est endotoxine librement. La quantité de l'antigène dépend de plusieurs facteurs tels que des propriétés de l'antigène particulier, la substance animale choisie, route d'injection, fréquence d'injection, et le niveau de pureté de l'antigène.

Choix de substance animale

Les facteurs qui influencent le choix de la substance animale sont quantité de PAB exigé, la relation phylogénétique entre l'animal et l'antigène, l'âge de l'animal, la facilité d'obtenir des prises de sang, et l'application dans laquelle le PAB est employé.

Les substances animales utilisées généralement dans le laboratoire sont des lapins, des rats, des souris, des cobayes, des hamsters, des chèvres, poulet, et des moutons. Les lapins sont dus préféré à leur durée de taille et relativement de longue durée. Cependant, afin de produire de plus grandes quantités de pAbs, des animaux de ferme tels que des chèvres, les moutons, et les chevaux sont employés.

Protocole d'immunisation

Le protocole d'immunisation diffère pour différente substance animale. Les adjuvants sont des composés utilisés comme forme de stimulus dans les cas où la réaction immunitaire induite serait autrement insuffisante. L'adjuvant le plus utilisé généralement pour la production des pAbs est l'adjuvant complet du Freund (FCA).

FCA induit des titres élevés d'anticorps à la plupart des types d'antigènes. Cependant, des soins devraient être pris que FCA n'est pas plus de administré. L'utilisation de FCA devrait être limitée à un seul temps pendant que FCA peut entraîner la lésion du tissu sévère.

Le plus petit volume de l'antigène capable d'induire une réponse immunitaire efficace est injecté dans l'animal. Cependant, la route d'injection dépend de la nature de l'antigène ainsi que de l'animal étant employés. L'antigène peut être injecté comme seul volume ou en tant que plusieurs volumes inférieurs à différents sites.

Des injections de rappel sont fournies si la concentration de titre d'anticorps a atteint un plateau ou se baissent. De telles injections n'exigent pas toujours un adjuvant et les quantités très petites de l'antigène sont suffisantes pour améliorer la concentration en anticorps. Un maximum de trois injections de rappel est recommandé.

observation de Goujon-immunisation

Des animaux sont surveillés quotidiennement pour évaluer les effets secondaires de l'immunisation et du sang est retiré à intervalles réguliers. Le sérum des animaux s'analyse pour surveiller les réactions des anticorps et pour extraire les anticorps quand la quantité suffisante est produite.

Avantages des anticorps polyclonaux

C'est un procédé relativement peu coûteux et il peut être employé pour isoler de grandes quantités d'un anticorps dans une extraction unique. PAbs sont un mélange hétérogène des anticorps qui peuvent gripper à la large gamme d'épitopes antigéniques. Par conséquent, le petit changement dans les épitopes d'un antigène est moins pour affecter des pAbs. Ces anticorps sont très stables en travers d'un large éventail de concentrations en sel et de valeurs du pH.

Désavantages des anticorps polyclonaux

L'affinité des pAbs aux antigènes peut changer au fil du temps mener de ce fait à beaucoup de variabilité entre les lots. D'ailleurs, la quantité de pAbs produits est limitée par la taille et la durée de vie de l'animal. Les niveaux de pureté et de concentration d'un anticorps spécifique sont inférieurs dans les pAbs à celui en anticorps monoclonaux.

Comment est-ce que des anticorps polyclonaux sont employés ?

les pAbs ont le large éventail d'applications, y compris le test diagnostique ainsi que les analyses biologiques qualitatives et quantitatives. Par exemple, des pAbs sont employés dans des techniques d'immunofluorescence et d'immunohistochimique telles que le sandwich ELISA pour trouver des marqueurs tumoraux et d'autres protéines d'intérêt.

des pAbs sont également employés pour des buts de médiation ou de modulation comme dans l'immunothérapie, signalisation active, ou pour des activités de neutralisation. Un exemple de ceci est l'utilisation des pAbs dans la demande de règlement d'ouvrier immunisé de digoxine dans la toxicité fatale de digoxine.

des pAbs tels que l'immunoglobuline du Rho (d) est injectés dans des mères avec le groupe sanguin Rhésus-négatif pour éviter la maladie hémolytique dans un nouveau-né.  Le Rho (d) est produit à partir d'un gisement de plasma humain rassemblé des donneurs Rhésus-négatifs qui ont des anticorps pour l'antigène de D (présent sur des hématies).

les pAbs trouvent également des applications dans les analyses histopathologiques qui utilisent la souillure d'immunoperoxide. Indépendamment de ces applications, des pAbs sont employés dans la purification d'immunoaffinity pour la purification ou l'enrichissement des antigènes.

Des pAbs recombinés sont employés dans le traitement du cancer dû à leur capacité des cellules tumorales multicibles comparées aux anticorps monoclonaux. Bien que les anticorps monoclonaux soient très utilisés dans le traitement du cancer, la rechute est terrain communal dû à l'émergence des cellules tumorales qui sont résistantes à l'anticorps. À l'aide des pAbs, on peut développer de divers anticorps recombinés qui croix-réagissent avec différents types de cancers.

Les pAbs recombinés d'expositions avant de voie étant employés pour réduire à un minimum le polyreactivity inutile comme vu quand des pAbs traditionnels sont employés. L'utilisation des pAbs dans différentes analyses non seulement produit du débit élevé mais peut également être employée pour développer des anticorps spécifiques pour les produits humains de gène qui sont également renouvelables.

Last Updated: Dec 13, 2018

Susha Cheriyedath

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Susha Cheriyedath

Susha has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Chemistry and Master of Science (M.Sc) degree in Biochemistry from the University of Calicut, India. She always had a keen interest in medical and health science. As part of her masters degree, she specialized in Biochemistry, with an emphasis on Microbiology, Physiology, Biotechnology, and Nutrition. In her spare time, she loves to cook up a storm in the kitchen with her super-messy baking experiments.

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