Che cosa sono anticorpi policlonali (pAbs)?

Gli anticorpi policlonali (pAbs) sono una miscela complessa di parecchi anticorpi che sono prodotti solitamente dai cloni differenti del linfocita B di un animale. Questi anticorpi riconoscono e legano a molti epitopi differenti di singolo antigene e quindi possono formare le grate con gli antigeni.

Anticorpi policlonali - da ustas7777777

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Come gli anticorpi policlonali sono generati?

Preparato dell'antigene

La qualità e la quantità di antigene usate direttamente pregiudica la risposta immunitaria. Anche le piccole quantità di impurità piombo agli anticorpi che reagiscono più all'impurità che all'antigene desiderato. Troppo poco o troppo antigene può causare la sensibilizzazione, la soppressione, o altri effetti immunomodulatory ingiustificati. Quindi, la depurazione dell'antigene è un trattamento cruciale per raggiungere la specificità aumentata dell'anticorpo.

L'antigene dovrebbe essere preparato nelle circostanze sterili per assicurarsi che sia liberamente endotossina. La quantità dell'antigene dipende da parecchi fattori quali i beni dell'antigene particolare, le specie animali scelte, itinerario dell'iniezione, frequenza dell'iniezione ed il livello della purezza dell'antigene.

Selezione di specie animali

I fattori che influenzano la scelta delle specie animali sono quantità di PAB richiesto, la relazione filogenetica fra l'animale e l'antigene, l'età dell'animale, la facilità di ottenere i campioni di sangue e l'applicazione in cui il PAB è utilizzato.

Le specie animali comunemente usate in laboratorio sono conigli, ratti, mouse, cavie, criceti, capre, pollo e pecore. I conigli sono preferito dovuto la loro portata di lunga vita relativamente e di dimensione. Tuttavia, per produrre le più grandi quantità di pAbs, gli animali da allevamento quali le capre, le pecore ed i cavalli sono usati.

Protocollo di immunizzazione

Il protocollo di immunizzazione differisce per le specie animali differenti. Gli adiuvanti sono composti usati come modulo dello stimolo nei casi in cui la risposta immunitaria indotta fosse altrimenti insufficiente. L'adiuvante più comunemente usato per produzione dei pAbs è l'adiuvante completo del Freund (FCA).

FCA induce gli alti titoli dell'anticorpo alla maggior parte dei tipi di antigeni. Tuttavia, la cura dovrebbe essere catturata che FCA più non è amministrato. L'uso di FCA dovrebbe essere limitato ad un singolo tempo mentre FCA può provocare ferite severe del tessuto.

Il più piccolo volume di antigene capace dell'induzione della risposta immunitaria efficace è iniettato nell'animale. Tuttavia, l'itinerario dell'iniezione dipende dalla natura dell'antigene come pure dell'animale che sono usando. L'antigene può essere iniettato come singolo volume o come parecchi volumi bassi ai siti differenti.

Le iniezioni di richiamo sono fornite se la concentrazione di titolo dell'anticorpo ha raggiunto un plateau o sta diminuendo. Tali iniezioni non richiedono sempre un adiuvante e le quantità molto piccole dell'antigene sono sufficienti per migliorare la concentrazione nell'anticorpo. Un massimo di tre iniezioni di richiamo è raccomandato.

osservazione di Post-immunizzazione

Gli animali sono riflessi giornalmente per valutare gli effetti secondari di immunizzazione ed il sangue è ritirato ad intervalli regolari. Il siero dagli animali è analizzato per riflettere le risposte dell'anticorpo e per estrarre gli anticorpi quando la quantità sufficiente è prodotta.

Vantaggi degli anticorpi policlonali

Ciò è un trattamento relativamente economico e può essere usata per isolare un gran quantità un anticorpo in una singola estrazione. PAbs è una miscela eterogenea degli anticorpi che possono legare a vasta gamma degli epitopi antigenici. Quindi, il piccolo cambio negli epitopi di un antigene è meno probabile pregiudicare i pAbs. Questi anticorpi sono molto stabili attraverso una vasta gamma di concentrazioni nel sale e gradi di pH.

Svantaggi degli anticorpi policlonali

L'affinità dei pAbs agli antigeni può cambiare col passare del tempo quindi il piombo a molta variabilità fra i batch. Inoltre, la quantità di pAbs prodotti è limitata dalla dimensione e dalla durata della vita dell'animale. I livelli di concentrazione e della purezza di anticorpo specifico sono più bassi nei pAbs che quello in anticorpi monoclonali.

Come gli anticorpi policlonali sono usati?

i pAbs hanno vasta gamma delle applicazioni, compreso la prova diagnostica come pure le analisi biologiche qualitative e quantitative. Per esempio, i pAbs sono utilizzati nell'immunofluorescenza e nelle tecniche immunohistochemical quale ELISA del panino per individuare i marcatori tumorali ed altre proteine di interesse.

i pAbs egualmente sono utilizzati per gli scopi di modulazione o della mediazione quale in immunoterapia, segnalazione attiva, o per le attività di neutralizzazione. Un esempio di questo è l'uso dei pAbs nel trattamento di favoloso immune di digossina nella tossicità interna di digossina.

pAbs quale il Rho (D) l'immunoglobulina è iniettata nelle madri con il gruppo sanguigno Reso-negativo per impedire la malattia emolitica in un neonato.  Rho (D) è prodotto da un raggruppamento di plasma umano raccolto dai donatori Reso-negativi che hanno anticorpi per l'antigene di D (presente sui globuli rossi).

i pAbs egualmente trovano le applicazioni nelle analisi istopatologiche che impiegano la macchiatura di immunoperoxide. Oltre a queste applicazioni, i pAbs sono utilizzati nella depurazione di immunoaffinity per depurazione o arricchimento degli antigeni.

I pAbs recombinanti sono utilizzati nella terapia del cancro dovuto le loro celle del tumore dell'multi-obiettivo di abilità confrontate agli anticorpi monoclonali. Sebbene gli anticorpi monoclonali siano ampiamente usati nella terapia del cancro, la ricaduta è terreno comunale dovuto l'emergenza delle celle del tumore che sono resistenti all'anticorpo. Usando i pAbs, i diversi anticorpi recombinanti possono essere sviluppati che inter-reagiscono con differenti tipi di cancri.

I pAbs recombinanti di manifestazioni di andata di modo che sono usando per minimizzare polyreactivity inutile come veduto quando i pAbs tradizionali sono usati. L'uso dei pAbs nelle analisi differenti non solo genera l'alta capacità di lavorazione ma può anche essere usato per sviluppare gli anticorpi specifici per i prodotti umani del gene che sono egualmente rinnovabili.

Sorgenti

[Ulteriore lettura: anticorpi, anticorpo

Last Updated: Dec 13, 2018

Susha Cheriyedath

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Susha Cheriyedath

Susha has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Chemistry and Master of Science (M.Sc) degree in Biochemistry from the University of Calicut, India. She always had a keen interest in medical and health science. As part of her masters degree, she specialized in Biochemistry, with an emphasis on Microbiology, Physiology, Biotechnology, and Nutrition. In her spare time, she loves to cook up a storm in the kitchen with her super-messy baking experiments.

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