Que são anticorpos Polyclonal (pAbs)?

Os anticorpos Polyclonal (pAbs) são uma mistura complexa de diversos anticorpos que são produzidos geralmente por clone diferentes da B-pilha de um animal. Estes anticorpos reconhecem e ligam a muitos resumos diferentes de um único antígeno e daqui podem formar estrutura com os antígenos.

Anticorpos Polyclonal - por ustas7777777

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Como os anticorpos polyclonal são gerados?

Preparação do antígeno

A qualidade e a quantidade de antígeno usadas directamente afectam a resposta imune. Mesmo as pequenas quantidades de impurezas conduzirão aos anticorpos que reagem mais à impureza do que ao antígeno desejado. Demasiado pouco ou demasiado antígeno podem causar a sensibilização, a supressão, ou outros efeitos immunomodulatory despropositados. Assim, a purificação do antígeno é um processo crucial para conseguir a especificidade aumentada do anticorpo.

O antígeno deve ser preparado sob circunstâncias estéreis para certificar-se que é endotoxina livre. A quantidade do antígeno é dependente de diversos factores tais como propriedades do antígeno particular, a espécie animal escolhida, rota da injecção, freqüência da injecção, e o nível da pureza do antígeno.

Selecção da espécie animal

Os factores que influenciam a escolha da espécie animal são uma quantidade de PAB exigido, o relacionamento filogenética entre o animal e o antígeno, a idade do animal, a facilidade de obter amostras de sangue, e a aplicação em que o PAB é usado.

As espécies animais de uso geral no laboratório são coelhos, ratos, ratos, cobaias, hamster, cabras, galinha, e carneiros. Os coelhos são preferido devido a seu período do tamanho e relativamente de longa vida. Contudo, a fim produzir quantidades maiores de pAbs, os animais de exploração agrícola tais como cabras, os carneiros, e os cavalos são usados.

Protocolo da imunização

O protocolo da imunização difere para a espécie animal diferente. Os assistentes são compostos usados como um formulário do estímulo nos casos onde a resposta imune induzida seria de outra maneira inadequada. O assistente o mais de uso geral para a produção de pAbs é o assistente completo do Freund (FCA).

FCA induz titers altos do anticorpo à maioria de tipos de antígenos. Contudo, deve ser tomado que FCA não está administrado sobre. O uso de FCA deve ser limitado a uma única estadia enquanto FCA pode causar ferimento severo do tecido.

O volume o menor de antígeno capaz de induzir uma resposta imune eficaz é injectado no animal. Contudo, a rota da injecção depende da natureza do antígeno assim como do animal que estão sendo usados. O antígeno pode ser injectado como um único volume ou como diversos baixos volumes em locais diferentes.

As injecções de impulsionador são fornecidas se a concentração do titer do anticorpo alcançou um platô ou estão diminuindo. Tais injecções não exigem sempre um assistente e as quantidades muito pequenas do antígeno são suficientes para melhorar a concentração do anticorpo. Um máximo de três injecções de impulsionador é recomendado.

observação da Cargo-imunização

Os animais são monitorados diariamente para avaliar os efeitos secundários da imunização e o sangue é retirado em intervalos regulares. O soro dos animais está analisado para monitorar as respostas do anticorpo e para extrair os anticorpos quando a suficiente quantidade é produzida.

Vantagens de anticorpos polyclonal

Este é um processo relativamente barato e pode ser usado para isolar grandes quantidades de um anticorpo em uma única extracção. PAbs é uma mistura heterogênea de anticorpos que podem ligar à vasta gama de resumos antigénicos. Daqui, a pequena alteração nos resumos de um antígeno é menos provável afectar pAbs. Estes anticorpos são muito estáveis através de uma vasta gama de concentrações de sal e de valores de pH.

Desvantagens de anticorpos polyclonal

A afinidade dos pAbs aos antígenos pode mudar ao longo do tempo desse modo a condução a muita variabilidade entre grupos. Além disso, a quantidade de pAbs produzidos é limitada pelo tamanho e pelo tempo do animal. Os níveis da pureza e de concentração de um anticorpo específico são mais baixos nos pAbs do que aquele em anticorpos monoclonais.

Como os anticorpos polyclonal são usados?

os pAbs têm a vasta gama de aplicações, incluindo o teste diagnóstico assim como análises biológicas qualitativas e quantitativas. Por exemplo, os pAbs são usados na imunofluorescência e em técnicas immunohistochemical tais como ELISA do sanduíche para detectar marcadores do tumor e outras proteínas do interesse.

os pAbs são usados igualmente para finalidades da mediação ou da modulação como na imunoterapia, sinalização activa, ou para actividades de neutralização. Um exemplo deste é o uso dos pAbs no tratamento de fabuloso imune do digoxin na toxicidade fatal do digoxin.

os pAbs tais como a globulina imune do ró (d) são injectados em matrizes com grupo sanguíneo Rhesus-negativo para impedir a doença hemolytic em um recém-nascido.  O ró (d) é produzido de uma associação do plasma humano recolhida dos doadores Rhesus-negativos que têm anticorpos para o antígeno de D (presente em glóbulos vermelhos).

os pAbs igualmente encontram aplicações nas análises histopatológicas que empregam a mancha do immunoperoxide. Independentemente destas aplicações, os pAbs são usados na purificação do immunoaffinity para a purificação ou o enriquecimento dos antígenos.

Os pAbs de recombinação são usados na terapia do cancro devido a sua capacidade às pilhas a várias línguas de chegada do tumor comparadas aos anticorpos monoclonais. Embora os anticorpos monoclonais sejam amplamente utilizados na terapia do cancro, ter uma recaída é terra comum devido à emergência das pilhas do tumor que são resistentes ao anticorpo. Usando pAbs, os anticorpos de recombinação diversos podem ser desenvolvidos que cruz-reagem com os tipos diferentes de cancros.

Os pAbs de recombinação das mostras dianteiras da maneira que estão sendo usados para minimizar o polyreactivity desnecessário como visto quando os pAbs tradicionais forem usados. O uso dos pAbs em ensaios diferentes gera não somente a produção alta mas pode igualmente ser usado para desenvolver anticorpos específicos para os produtos humanos do gene que são igualmente renováveis.

Fontes

[Leitura adicional: anticorpos, anticorpo

Last Updated: Dec 13, 2018

Susha Cheriyedath

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Susha Cheriyedath

Susha has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Chemistry and Master of Science (M.Sc) degree in Biochemistry from the University of Calicut, India. She always had a keen interest in medical and health science. As part of her masters degree, she specialized in Biochemistry, with an emphasis on Microbiology, Physiology, Biotechnology, and Nutrition. In her spare time, she loves to cook up a storm in the kitchen with her super-messy baking experiments.

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