¿Cuáles son anticuerpos policlonales (pAbs)?

Los anticuerpos policlonales (pAbs) son una mezcla compleja de varios anticuerpos que sean producidos generalmente por diversas copias del linfocito B de un animal. Estos anticuerpos reconocen y atan a muchos diversos epitopos de un único antígeno y por lo tanto pueden formar enrejados con los antígenos.

Anticuerpos policlonales - por ustas7777777

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¿Cómo se generan los anticuerpos policlonales?

Preparación del antígeno

La calidad y la cantidad del antígeno usadas directamente afecta a la inmunorespuesta. Incluso las pequeñas cantidades de impurezas llevarán a los anticuerpos que reaccionan más a la impureza que al antígeno deseado. Demasiado o demasiado poco antígeno puede causar la sensibilización, la supresión, u otros efectos inmunomoduladores injustificables. Así, la purificación del antígeno es un proceso crucial para lograr especificidad creciente del anticuerpo.

El antígeno se debe preparar bajo condiciones estéril para asegurarse de que es endotoxina libremente. La cantidad del antígeno es relacionada en varios factores tales como propiedades del antígeno determinado, la especie animal elegida, ruta de la inyección, frecuencia de la inyección, y el nivel de la pureza del antígeno.

Selección de la especie animal

Los factores que influencian la opción de la especie animal son cantidad de PAB requerido, el lazo filogenético entre el animal y el antígeno, la edad del animal, la facilidad de obtener muestras de sangre, y el uso en el cual se utiliza el PAB.

Las especies animales de uso general en el laboratorio son conejos, ratas, ratones, conejillos de Indias, hámsteres, cabras, pollo, y ovejas. Los conejos son preferido debido a su envergadura de la talla y relativamente de la larga vida. Sin embargo, para producir mayores cantidades de pAbs, los animales del campo tales como cabras, las ovejas, y los caballetes se utilizan.

Protocolo de la inmunización

El protocolo de la inmunización difiere para diversa especie animal. Los coadyuvantes son composiciones usadas como forma del estímulo en caso de que la inmunorespuesta inducida fuera de otra manera inadecuada. El coadyuvante más de uso general para la producción de pAbs es el coadyuvante completo del Freund (FCA).

FCA induce altos títulos del anticuerpo a la mayoría de los tipos de antígenos. Sin embargo, el cuidado debe ser tomado que FCA encima no está administrado. El uso de FCA se debe limitar a un único rato mientras que FCA puede causar daño severo del tejido.

El volumen más pequeño de antígeno capaz de inducir una inmunorespuesta efectiva se inyecta en el animal. Sin embargo, la ruta de la inyección depende de la naturaleza del antígeno así como del animal que son utilizados. El antígeno se puede inyectar como único volumen o como varios bajos volúmenes en diversos sitios.

Las inyecciones de amplificador auxiliar se ofrecen si la concentración del título del anticuerpo ha alcanzado un platillo o están disminuyendo. Tales inyecciones no requieren siempre un coadyuvante y las cantidades muy pequeñas del antígeno son suficientes perfeccionar la concentración del anticuerpo. Un máximo de tres inyecciones de amplificador auxiliar se recomienda.

observación de la Poste-inmunización

Los animales se vigilan diariamente para evaluar los efectos secundarios de la inmunización y la sangre se repliega a intervalos regulares. El suero de los animales se analiza para vigilar las reacciones del anticuerpo y para extraer los anticuerpos cuando se produce la suficiente cantidad.

Ventajas de anticuerpos policlonales

Esto es un proceso relativamente barato y puede ser utilizada para aislar una gran cantidad un anticuerpo en una única extracción. PAbs es una mezcla heterogénea de anticuerpos que puedan atar a la amplia gama de epitopos antigénicos. Por lo tanto, el pequeño cambio en los epitopos de un antígeno es menos probable afectar a pAbs. Estos anticuerpos son muy estables a través de una amplia gama de concentraciones de la sal y de valores de pH.

Desventajas de anticuerpos policlonales

La afinidad de pAbs a los antígenos puede cambiar en un cierto plazo de tal modo llevar a mucha variabilidad entre las mezclas. Por otra parte, la cantidad de pAbs producidos es limitada por la talla y la vida útil del animal. Los niveles de la pureza y de concentración de un anticuerpo específico son más inferiores en pAbs que ése en anticuerpos monoclonales.

¿Cómo se utilizan los anticuerpos policlonales?

los pAbs tienen amplia gama de usos, incluyendo la prueba diagnóstica así como análisis biológicos cualitativos y cuantitativos. Por ejemplo, los pAbs se utilizan en inmunofluorescencia y técnicas immunohistochemical tales como ELISA del bocadillo para descubrir marcadores del tumor y otras proteínas del interés.

los pAbs también se utilizan para los propósitos de la mediación o de la modulación por ejemplo en la inmunoterapia, transmisión de señales activa, o para las actividades de neutralización. Un ejemplo de esto es el uso de pAbs en el tratamiento de fabuloso inmune del digoxin en toxicidad fatal del digoxin.

los pAbs tales como globulina inmune de rho (d) se inyectan en moldes-madre con el grupo sanguíneo Macaco de la India-negativo para prevenir enfermedad hemolítica en un recién nacido.  Rho (d) se produce de un centro común del plasma humana cerco de los donantes Macaco de la India-negativos que tienen anticuerpos para el antígeno de D (presente en los glóbulos rojos).

los pAbs también encuentran usos en los análisis histopatológicos que emplean la coloración del immunoperoxide. Aparte de estos usos, los pAbs se utilizan en la purificación del immunoaffinity para la purificación o el enriquecimiento de antígenos.

Los pAbs recombinantes se utilizan en la terapia del cáncer debido a su capacidad a las células de objetivos múltiples del tumor comparadas a los anticuerpos monoclonales. Aunque los anticuerpos monoclonales sean ampliamente utilizados en terapia del cáncer, la recaída es campo común debido a la aparición de las células del tumor que son resistentes al anticuerpo. Usando pAbs, los anticuerpos recombinantes diversos pueden ser desarrollados que cruz-reaccionan con diversos tipos de cánceres.

Los pAbs recombinantes de las demostraciones delanteras de la manera que son utilizados para disminuir polyreactivity innecesario según lo visto cuando se utilizan los pAbs tradicionales. El uso de pAbs en diversos análisis no sólo genera la alta producción pero se puede también utilizar para desarrollar los anticuerpos específicos para los productos humanos del gen que son también renovables.

Fuentes

[Lectura adicional: anticuerpos, anticuerpo

Last Updated: Dec 13, 2018

Susha Cheriyedath

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Susha Cheriyedath

Susha has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Chemistry and Master of Science (M.Sc) degree in Biochemistry from the University of Calicut, India. She always had a keen interest in medical and health science. As part of her masters degree, she specialized in Biochemistry, with an emphasis on Microbiology, Physiology, Biotechnology, and Nutrition. In her spare time, she loves to cook up a storm in the kitchen with her super-messy baking experiments.

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