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Aplicações de RNAi

A interferência do RNA (RNAi) é um sistema regulador do gene cargo-transcricional que utilize as moléculas do RNA da não-codificação chamadas microRNAs nas pilhas.

Crédito: Rost9/Shutterstock.com

As secções curtos do RNA são pegadas pelo RNA induzido silenciando o complexo (RISC) que visa então o mensageiro específico RNAs (mRNAs) para a degradação. Isto suprime a expressão do gene que corresponde ao mRNA.

RNAi foi aproveitado no campo da biotecnologia para o silêncio do gene, o KO do gene, e o knockdown do gene. As ferramentas as mais de uso geral para o silêncio do gene são RNA de interferência pequeno (siRNA), RNA curto do gancho de cabelo (shRNA), e indicações e inibidores do microRNA.

RNAi ganhou a popularidade tremenda com aplicações através de todas as áreas de ciências da vida. Este artigo dá uma vista geral de alguns estudos recentes no campo.

Revelação da terapia genética para a epilepsia

Os pesquisadores desenvolveram um gene que silencia a aproximação para o knockdown da quinase da adenosina (ADK) nas células estaminais mesenchymal da geléia de Wharton (um tipo de pilha humana). Visaram ADK mRNA no 3' extremidade com as oito gavetas de codificação que contêm shRNAs da quinase da anti-adenosina.

As gavetas foram clonadas primeiramente em um vector lentiviral, a seguir os vectores foram seleccionados para encontrar aqueles que expressaram o anti-ADK RIM-shRNA o mais eficiente. Esse vector foi usado para transduce estàvel as pilhas. O resultado era para baixo-regulamento de 95% de ADK negociado por RNAi.

Este estudo demonstrou o uso eficiente de uma gaveta do shRNA para o knockdown de ADK. O método pode produzir as pilhas que poderiam ser usadas desenvolvendo uma terapia genética para a epilepsia.

Gene que silencia para a terapia do cancro

A molécula 1 de ferimento do rim (Kim-1) é um biomarker para ferimento proximal do tubule do rim e provavelmente um alvo para o cancro renal. Xu investigou e outros os efeitos do knockdown Kim-1 em 786-0 pilhas com RNAi lentivirus-negociado.

Kim-1 inibiu a capacidade da formação da proliferação e da colônia das pilhas, com apreensão na fase G0/G1. O apoptosis adiantado e atrasado aumentou nas pilhas tratadas com o siRNA.

Igualmente testaram o gene Kim-1 que silencia a construção nos ratos, e encontraram a inibição de crescimento, concluindo que Kim-1 inibe um crescimento de 786-0 pilhas in vitro e in vivo e é um alvo potencial para a terapia renal da carcinoma da pilha clara.

Selecção da biblioteca

RNAi mostrou o grande serviço público no estudo de telas individuais, mas a tecnologia foi expandida igualmente às telas altas da biblioteca da produção em que as centenas ou os milhares de genes, ou mesmo em genomas inteiros, podem ser seleccionados para o significado usando uma aproximação de RNAi.

Em um exemplo, um gene cardíaco-visado que silencia o método é desenvolvido na drosófila para estudar os efeitos da estrutura e da função do coração para 134 genes da doença do candidato. Os genes humanos do candidato têm homólogos nas moscas de fruto, fazendo a drosófila um organismo modelo apropriado.

As construções de RNAi foram introduzidas nas moscas e nas moscas avaliadas para o fenótipo. A experiência empregou um protocolo fenotípico quantitativo da selecção que olhasse diversos parâmetros da saúde do coração: mortalidade, estrutura do coração, e longevidade adulta.

Os pesquisadores encontraram que 52% dos genes do candidato estiveram exigidos para a revelação e a função cardíacas nas moscas. O estudo demonstrou que a drosófila é um sistema modelo valioso para a selecção e a validação funcionais dos genes da doença do candidato identificados com arranjar em seqüência em grande escala.

Fontes:

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Last Updated: Feb 26, 2019

Dr. Catherine Shaffer

Written by

Dr. Catherine Shaffer

Catherine Shaffer is a freelance science and health writer from Michigan. She has written for a wide variety of trade and consumer publications on life sciences topics, particularly in the area of drug discovery and development. She holds a Ph.D. in Biological Chemistry and began her career as a laboratory researcher before transitioning to science writing. She also writes and publishes fiction, and in her free time enjoys yoga, biking, and taking care of her pets.

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