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Usos de RNAi

La interferencia del ARN (RNAi) es un sistema regulador del gen poste-transcriptivo que hace uso de las moléculas del ARN de la no-codificación llamadas los microRNAs en células.

Haber: Rost9/Shutterstock.com

Las secciones cortas del ARN son tomadas por el ARN inducido imponiendo silencio al complejo (RISC) que entonces apunta al mensajero específico RNAs (mRNAs) para la degradación. Esto suprime la expresión del gen correspondiente al mRNA.

RNAi se ha aprovechado en el campo de la biotecnología para imponer silencio del gen, el golpe de gracia del gen, y la precipitación del gen. Las herramientas más de uso general para imponer silencio del gen son pequeño ARN de interferencia (siRNA), ARN corto de la horquilla (shRNA), e imitadores e inhibidores del microRNA.

RNAi ha ganado enorme renombre con usos a través de todas las áreas de ciencias de la vida. Este artículo da una reseña de algunos estudios recientes en el campo.

Revelado de la terapia génica para la epilepsia

Los investigadores desarrollaron un gen que imponía silencio a la aproximación para la precipitación de la cinasa de la adenosina (ADK) en las células madres mesenquimales de la jalea de Wharton (un tipo de célula humana). Apuntaron ADK mRNA en el 3' extremo con ocho magazines de codificación que contenían shRNAs de la cinasa de la anti-adenosina.

Los magazines primero fueron reproducidos en un vector lentiviral, después los vectores fueron revisados para encontrar los que expresaron anti-ADK más eficiente MIR-shRNA. Ese vector fue utilizado para transduce estable las células. El resultado era hacia abajo-regla del 95% de ADK medió por RNAi.

Este estudio demostró uso eficiente de un magazín del shRNA para la precipitación de ADK. El método puede producir las células que se podrían utilizar para desarrollar una terapia génica para la epilepsia.

Gen que impone silencio para la terapia del cáncer

La molécula 1 (Kim-1) del daño del riñón es un biomarker para el daño próximo del túbulo del riñón y probablemente un objetivo para el cáncer renal. Xu y otros investigó los efectos de la precipitación Kim-1 sobre 786-0 células con RNAi lentivirus-mediado.

Kim-1 inhibió la capacidad de la formación de la proliferación y de la colonia de las células, con la detención en la fase G0/G1. El apoptosis temprano y último aumentó de las células tratadas con el siRNA.

También probaron el gen Kim-1 que imponía silencio a la construcción en ratones, y encontraron la inhibición del incremento, concluyendo que Kim-1 inhibe el incremento de 786-0 células in vitro y in vivo y es objetivos potenciales para la terapia renal del carcinoma de la célula sin obstrucción.

Investigación de la biblioteca

RNAi ha mostrado gran utilidad en el estudio de pantallas individuales, pero la tecnología también se ha desplegado a las altas pantallas de la biblioteca de la producción en las cuales los centenares o los millares de genes, o aún genomas enteros, se pueden revisar para la significación usando una aproximación de RNAi.

En un ejemplo, un gen cardiaco-apuntado que impone silencio a método se desarrolla en Drosophila para estudiar los efectos de la estructura y de la función del corazón para 134 genes de la enfermedad del candidato. Los genes humanos del candidato tienen homólogos en las moscas del vinagre, haciendo Drosophila un organismo modelo conveniente.

Las construcciones de RNAi fueron insertadas en las moscas y las moscas fijadas para el fenotipo. El experimento empleó un protocolo fenotípico cuantitativo de la investigación que observaba varios parámetros de la salud del corazón: mortalidad, estructura del corazón, y longevidad adulta.

Los investigadores encontraron que los 52% de los genes del candidato fueron requeridos para el revelado y la función cardiacos en moscas. El estudio demostró que la Drosophila es un sistema modelo valioso para la investigación y la validación funcionales de los genes de la enfermedad del candidato determinados con la secuencia en grande.

Fuentes:

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Last Updated: Feb 26, 2019

Dr. Catherine Shaffer

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Dr. Catherine Shaffer

Catherine Shaffer is a freelance science and health writer from Michigan. She has written for a wide variety of trade and consumer publications on life sciences topics, particularly in the area of drug discovery and development. She holds a Ph.D. in Biological Chemistry and began her career as a laboratory researcher before transitioning to science writing. She also writes and publishes fiction, and in her free time enjoys yoga, biking, and taking care of her pets.

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