Variación del organismo de RNAi

RNAi es una herramienta potente a utilizado para definir mecanismos celulares, y analiza las funciones del gen de diversos organismos en laboratorios por todo el mundo.

Haber: petarg/Shutterstock.com

Los fragmentos del ARN que comprenden las pequeñas moléculas de interferencia del ARN (siRNA) que ciegan la función de genes específicos vía un proceso natural se conocen como interferencia del ARN (RNAi), que también se llama el imponer silencio del gen.

La interferencia del ARN se sabe para variar en diversos organismos, variando en la eficiencia del alto al ciclón, sobre la base del organismo específico. Debido a esta variación, diverso RNAis se utiliza en organismos modelo genéticos tales como eucariotas, insectos, mamíferos, e instalaciones para investigar las funciones de genes individuales.

RNAi en eucariotas

el ARN Doble-trenzado se determina como inhibidor eficiente para la supresión de una serie específica de la expresión génica en eucariotas, tales como elegans de la C. RNAi se puede lograr en eucariotas de las siguientes maneras:

  • Simple empapar el tornillo sin fin en ambientes siRNA-que contienen
  • Directamente inyección del dsRNA en el tornillo sin fin del nematodo
  • Introduciendo las bacterias del tornillo sin fin que expresan siRNAs

RNAi se ha encontrado para facilitar marcha atrás y genética delantera. Dos mutantes tales como eri-1 y rrf-3 fueron determinados usando RNAi, que son útiles para estudiar el sistema nervioso del nematodo. Este modelo del tornillo sin fin de los elegans de la C. es útil como herramienta dominante para estudiar desordenes de los nervios y neurodegenerative. La integración de tales herramientas genomic con un mecanismo perfeccionado y rápido ayuda a lograr proyectos en grande como resultado del revelado rápido de los usos de RNAi.

RNAi en insectos

RNAi era primer mostrado en melanogaster de la D. por la inoculación del dsRNA en sus embriones. Este tipo de método del lanzamiento de RNAi tiene la limitación que RNAi dura por solamente un período corto en los embriones de moscas. Este problema es resuelto usando un transgén estable integrado del dsRNA de la horquilla. Inyectando el dsRNA en el abdomen de la mosca adulta, RNAi se puede lograr en la carrocería.

RNAi múltiple adicional investiga fue realizado usando cultivo celular de la Drosophila y RNAi fue logrado agregando el dsRNA en el cultivo celular. Un método de cribado de RNAi con la alta producción fue desarrollado usando este cultivo celular para determinar los genes que se relacionan con la morfogénesis de la célula.

Usando extensamente - los métodos y los protocolos disponibles, el método de cribado del microarray de la vivir-célula de RNAi fueron desarrollados, que era otro adelanto importante de RNAi. En este método, las células de la Drosophila se cultivan directamente en la capota de los dsRNAs impresos en los microarrays de cristal. El mecanismo de RNAi del microarray se puede utilizar para la investigación completa del genoma de la mosca en tres diapositivas de cristal estándar para el estudio de acciones recíprocas genéticas, mientras que dos genes se pueden suprimir inmediatamente.

RNAi en mamíferos

Para analizar la función del gen en cualquier sistema empírico, RNAi se utiliza para eliminar la expresión de los genes específicos y para observar los efectos resultantes. Este método ha ganado importancia en sistemas mamíferos por la creación de los modelos knockout de los ratones.

Aunque sea un modelo efectivo, tiene algunos problemas como sigue:

  • Los efectos de desarrollo o célula-tipo-específicos no se pueden estudiar usando este modelo hasta que se empleen los golpes de gracia tejido-específicos;
  • La formación de modelos knockout consume más tiempo, y requiere el trabajo intenso.
  • Sin embargo, estos problemas tienen la solución teórica de adaptar las técnicas de RNAi.

Los vectores incluyendo siRNA y el shRNA se inyectan en ratones adultos, junto con la composición de lípido catiónica, en algunos casos. Para la transferencia acertada de shRNAs en el cerebro de ratones adultos, se inyectan los vectores adenoviral y lentiviral, que suprimen fácilmente la expresión fluorescente verde aumentada (eGFP) de la proteína.

En esta serie experimental, las inoculaciones de RNAi fueron realizadas en el striatum derecho y las inserciones del eGFP fueron hechas en el hemisferio contralateral. Entonces, el eGFP de la precipitación fue observado por una semana, que también es lograda por la inserción del shRNA lentiviral a la semana más adelante, subsiguiente a la inoculación del eGFP.

La precipitación de genes endógenos puede también ser lograda utilizando RNAi viral-mediado. En las neuronas del mediados de-cerebro de ratones adultos, la inoculación de un shRNA adenoviral que apunta hidroxilasa de la tirosina obstruyó la síntesis de la dopamina y llevó al trabajo progresivo reducido.

RNAi en plantas cultivadas

RNAi se puede lograr en instalaciones vía los transgenes, que producen el ARN de la horquilla. RNAi tiene méritos sobre imponer silencio y la co-supresión antisentido-mediados del gen basados en su estabilidad y eficiencia, que ayuda en la mejoría genética de las plantas cultivadas. Tiene la capacidad de cortar la expresión del transgén de las familias del multigene de una manera regulada, y también sugiere varias ventajas sobre genéticas reversas mutación-basadas.

Perspectiva

Los estudios múltiples están en curso en el ARN que impone silencio para perfeccionar la comprensión del mecanismo de RNAi, y prometiendo su uso en la investigación y el campo del tratamiento. Este mecanismo es económico y rinde adaptabilidad enorme.

Otro aspecto inestimable de RNAi es su capacidad de producir resultados fenotípicos dosis-relacionados y nivelados. La neurobiología cosecha la gran ventaja del método de RNAi, como otras áreas de investigación. RNAi tiene cajas de herramientas genéticas radicales a disposición, específicamente para los investigadores de la neurobiología implicando el sistema experimental de la rata.

Fuentes:

  1. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/genome/rnai/
  2. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3249004/
  3. https://academic.oup.com/hmg/article-pdf/13/suppl_2/R275/1711235/ddh224.pdf
  4. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC309050/
  5. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1895153/
  6. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK2557/
  7. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2908776/
  8. https://entomology.ca.uky.edu/pallilab
  9. http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download;jsessionid=DA2C53C2EFB9F5CF3B051B6913C5FA60?doi=10.1.1.589.8702&rep=rep1&type=pdf
  10. https://ncats.nih.gov/rnai/about/action
  11. https://www.umassmed.edu/rti/biology/how-rnai-works/
  12. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15081052

Further Reading

Last Updated: Feb 26, 2019

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Sundaram, Jeyashree. (2019, February 26). Variación del organismo de RNAi. News-Medical. Retrieved on September 23, 2019 from https://www.news-medical.net/life-sciences/RNAi-Organism-Variation.aspx.

  • MLA

    Sundaram, Jeyashree. "Variación del organismo de RNAi". News-Medical. 23 September 2019. <https://www.news-medical.net/life-sciences/RNAi-Organism-Variation.aspx>.

  • Chicago

    Sundaram, Jeyashree. "Variación del organismo de RNAi". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/RNAi-Organism-Variation.aspx. (accessed September 23, 2019).

  • Harvard

    Sundaram, Jeyashree. 2019. Variación del organismo de RNAi. News-Medical, viewed 23 September 2019, https://www.news-medical.net/life-sciences/RNAi-Organism-Variation.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News-Medical.Net.
Post a new comment
Post