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Aplicações actuais e futuras de anticorpos monoclonais do coelho

Em a maioria de aplicações clínicas, os anticorpos monoclonais (mAbs) usados são da origem murine; contudo, o baço pequeno do rato é limitado em sua capacidade para gerar anticorpos. Também, os ratos usados para experiências do laboratório são geralmente inatos em um ambiente controlado, mais adicional restringindo sua capacidade para demonstrar respostas imunes diversas.

Anticorpos que ligam a um receptor da superfície da pilha.Liga de Juan | Shutterstock

Vantagens de mAbs do coelho

Independentemente de ter uma estrutura mais simples, os mAbs do coelho oferecem uma afinidade obrigatória mais alta (10 a 100 vezes mais) e uma especificidade do que mAbs murine, e são mais fáceis de humanizar. Estas propriedades de mAbs do coelho fazem-nos úteis nos casos onde os antígenos exibem a imunogenicidade fraca. Os anticorpos do coelho podem reconhecer um número de resumos targetable em seres humanos do que anticorpos do roedor que é giratório na investigação básica e em experimentações pré-clínicas.

Produção de mAbs do coelho

O coelho é injectado primeiramente com o antígeno para produzir uma resposta imune humoral. Deste coelho imunizado, as pilhas do baço são isoladas e fundidas com pilhas do mieloma. Após a fusão, as pilhas do hybridoma são isoladas, seleccionadas, e cultivadas para produzir o anticorpo exigido.

As tecnologias diferentes usadas para a produção do mAb do coelho são tecnologia do hybridoma, tecnologia de reprodução de imagem do fago, e outros métodos alternativos.

Tecnologia do Hybridoma

Quando os mAbs do coelho desenvolvidos por esta tecnologia forem reagentes valiosos para o laboratório pesquisam finalidades e em aplicações diagnósticas, a metodologia é difícil.

Tecnologia de reprodução de imagem da fase

Este método desenvolve bibliotecas do anticorpo do coelho no formato variável da único-corrente (scFv) assim como em formato (fabuloso) obrigatório do fragmento do antígeno. O formato fabuloso tem uma vantagem maior devido a suas natureza monomeric, estabilidade mais alta, e afinidade. os formatos do scFv têm a tendência submeter-se ao dimerization, ao trimerization, e ao tetramerization.

O método do indicador da fase pode igualmente ser usado para projectar únicos formatos do anticorpo do domínio, tais como a corrente clara variável do N-terminal (VL) e a corrente pesada variável do N-terminal (VH) dos mAbs do coelho. Os tamanhos menores de VL e de VH fazem-nos úteis no reconhecimento de resumos enigmáticos.

Métodos alternativos

Outros métodos que são usados para produzir mAbs do coelho e para analisar repertórios imunes do anticorpo são tecnologias do ADN da alto-produção com espectrometria em massa.

Aplicação de mAbs do coelho

In vitro ferramentas diagnósticas

Aproximadamente 11 mAbs do coelho foram aprovados pela Agência de Medicamentos e Alimentos dos Estados Unidos (USFDA) para in vitro o diagnóstico nas clínicas. Por exemplo, os mAbs do coelho foram desenvolvidos para detectar a expressão de antígenos tumor-associados, tais como o receptor epidérmico humano 2 do factor de crescimento (HER2) no cancro da mama, infecções dos piloros do helicobacter, circulando pilhas do tumor no cancro da próstata, e assim por diante.

Os mAbs do coelho são considerados reagentes superiores no immunohistochemistry, análise ocidental da mancha, cytometry de fluxo, assim como na detecção de alteração cargo-transcricional das proteínas. Um exemplo de um biomarker é GCET2 o coelho mAb desenvolvido pela bandeja e outros. Este marcador é um marcador immunohistochemical sensível que demonstre a maior sensibilidade diagnóstica para detectar o grande linfoma difuso da B-pilha.

Construção de bibliotecas fabulosos imunes do coelho

Estas bibliotecas são geradas para identificar mAbs com afinidade e especificidade altas. Isto é conseguido isolando repertórios variáveis do domínio do anticorpo do ADN complementar da B-pilha (cDNA) obtido do baço do coelho e amplificando os em um repertório fabuloso pelo método da reacção em cadeia (PCR) da polimerase.

Aplicações na oncologia

Um número de mAbs do coelho estão sob ensaios clínicos e alguns estão sendo usados já na terapia do cancro. Por exemplo, coelho endothelial humanizado mAb do factor do crescimento anti-vascular um anti-VEGF) (que esteja actualmente sob a investigação para seu efeito no cancro colorectal metastático e em outros tumores contínuos. Similarmente, um outro coelho humanizado anti-VEGF mAb está actualmente sob ensaios clínicos para o uso em degeneração macular relativa à idade.

Detecção rápida de vírus de Ebola

Recentemente, Wei Y e outros desenvolveram um ultrasensitive, almofada nanoparticle-etiquetada carbono com o anti-Ebola vírus do coelho (EBOV) - anticorpo de G da imunoglobulina (IgG) VP40 para a detecção rápida de EBOV. Esta almofada conjugada junto com uma almofada da nitrocelulose mergulhada com um anticorpo monoclonal (McAb, 4B7F9) contra EBOV-VP40 e anti-coelho Ig da cabra, a almofada da aplicação de amostra, e a almofada absorvente foram montadas junto para formar uma tira de teste lateral do fluxo.

A tira de teste demonstrou a especificidade forte contra EBOV assim como contra os vírus que eram clìnica e geogràfica similares a EBOV, tal como o vírus de febre amarela, o vírus de dengue, o virus da gripe, e o vírus de Marburg.

Com os repertórios distintos do anticorpo oferecidos por pilhas de B do coelho e a possibilidade de humanização de mAbs do coelho, as aplicações terapêuticas de mAbs do coelho ganharão um impulso mais adicional nos próximos anos.

Source

  • Feng L, e outros (2011). Anticorpo monoclonal do coelho: aplicação potencial na terapia do cancro. Jornal americano da pesquisa Translational. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3102571/
  • Por que anticorpos monoclonais do coelho? www.prosci-inc.com/.../ alcançou o 4 de maio de 2019
  • Weber J e outros (2017). Dos repertórios do anticorpo do coelho aos anticorpos monoclonais do coelho. Medicina experimental e molecular. https://www.nature.com/articles/emm201723
  • Anticorpos monoclonais do coelho. ThermoFisher científico. www.thermofisher.com/.../rabbit-monoclonal-antibodies.html
  • Webber J e outros (2017) dos repertórios do anticorpo do coelho aos anticorpos monoclonais do coelho. Medicina experimental e molecular. doi: 10.1038/emm.2017.23 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5382564/
  • Nguyen TT e outros (2018). Construção de bibliotecas imunes do anticorpo do coelho. Métodos na biologia molecular. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29116503
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  • Wei Y e outros (2018). Um nanoparticle novo do carbono ponta de prova-baseou o ensaio lateral ultrasensitive do fluxo para a detecção rápida de vírus de Ebola. Jornal chinês da biotecnologia. doi: 10.13345/j.cjb.180074. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30584713

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Last Updated: Jul 1, 2019

Deepthi Sathyajith

Written by

Deepthi Sathyajith

Deepthi spent much of her early career working as a post-doctoral researcher in the field of pharmacognosy. She began her career in pharmacovigilance, where she worked on many global projects with some of the world's leading pharmaceutical companies. Deepthi is now a consultant scientific writer for a large pharmaceutical company and occasionally works with News-Medical, applying her expertise to a wide range of life sciences subjects.

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