Advertencia: Esta página es una traducción de esta página originalmente en inglés. Tenga en cuenta ya que las traducciones son generadas por máquinas, no que todos traducción será perfecto. Este sitio Web y sus páginas están destinadas a leerse en inglés. Cualquier traducción de este sitio Web y su páginas Web puede ser imprecisa e inexacta en su totalidad o en parte. Esta traducción se proporciona como una conveniencia.

Microscopia del contraste de la reflexión para Immunocytochemistry

La microscopia del contraste de la reflexión se utiliza a las células de la imagen con la alta resolución y la sensibilidad perfeccionada. Pues esta técnica puede generar altas imágenes de la definición en las altas profundidades de penetración, es de uso general en immunocytochemistry.

La microscopia del contraste de la reflexión tiene usos en immunocytochemistryLebendkulturen | Shutterstock

Método de microscopia del contraste de la reflexión

La microscopia del contraste de la reflexión puede las pequeñas secciones de la imagen de células suprimiendo reflexiones perdidas. Esto es necesario cuando las muestras biológicas de la proyección de imagen, porque los objetos biológicos tienden a tener intensidades de luz reflejadas abajo de los 1% de luz de incidente comparada hasta la intensidad de la reflexión del 4% en un cristal al interfaz de aire, que son comunes en los microscopios.

La misma cantidad de supresión lograda con esta microscopia no se puede lograr usando otros microscopios. Para suprimir reflexiones perdidas, aplicaciones de la microscopia del contraste de la reflexión una fuente de luz monocromática, típicamente 546 nanómetro, mientras que un polarizador y una placa de onda cuarta de la lambda llevan a la polarización y a la repolarización elípticas de la lente anterior. Así como un analizador alineado, las reflexiones exclusivas de la sección alcanzan el ocular.

Los polarizadores y la placa de la onda usada en microscopia del contraste de la reflexión explican el principio del antiflex donde la luz de la reflexión del objeto se gira el 90° en relación con la luz de incidente, teniendo en cuenta proyección de imagen del objeto. Las reflexiones logradas usando microscopia del contraste de la reflexión se hacen con la epi-iluminación 45°. La iluminación cónica, anular combina las características de la iluminación del darkground.

La microscopia del contraste de la reflexión puede secciones increíblemente finas de la imagen, hacia abajo a 5 nanómetro, y una profundidad de penetración del µm hasta 30. Debido a esto, las reconstrucciones 3D pueden ser creadas. La microscopia del contraste de la reflexión actúa como puente entre la microscopia liviana y la microscopia electrónica, y utiliza típicamente un soporte del microscopio de fluorescencia con adaptaciones metodológicas para generar una imagen de la microscopia del contraste de la reflexión.

Aplicación de microscopia del contraste de la reflexión a immunocytochemistry

La microscopia del contraste de la reflexión fue desarrollada originalmente para el uso en mineralogía y sus usos en biología han emergido solamente muy recientemente, incluyendo el hibridación in situ e immunocytochemistry. Esta microscopia se puede aplicar a las células vivas, que se pueden etiqueta usando immunocytochemistry.

El primer paso es reparar las células. Es importante que el fijador es suave mantener antigenicidad, mientras que los fijadores fuertes son necesarios para los estudios morfológicos. Las moléculas generalmente que embuten y de etiquetas usadas en estudios immunocytochemical de la localización se pueden también aplicar a los estudios de la microscopia del contraste de la reflexión.

Hay dos métodos principales para preparar una muestra para la microscopia del contraste de la reflexión: la inmuno-incubación puede ser realizada antes o después de que se embute el tejido.

el Pre-embutir immunocytochemistry considera el tejido que es cortado en 70-90 secciones gruesas del µm, que después immunostained y se embuten de plástico. Después de esto, se cortan en secciones ultrafinas. Las aplicaciones comunes de pre-embutir immunocytochemistry son etiqueta intercelular de la matriz extracelular en un tejido.

En poste-embutir immunocytochemistry, el tejido se corta inmediatamente en las secciones ultrafinas se embuten y después se manchan que. El tipo de embutir los ambientes usados en poste-embutir immunocytochemistry puede afectar a la accesibilidad de los sitios antigénicos para los anticuerpos, que pueden necesitar pasos más futuros de la aguafuerte, por ejemplo con Epon.

el Poste-embutir immunocytochemistry es de uso frecuente a la imagen el interior de una célula porque la célula necesita ser seccionada en secciones ultrafinas para lograr la resolución intracelular.

Fuentes

Further Reading

Last Updated: Apr 1, 2019

Sara Ryding

Written by

Sara Ryding

Sara is a passionate life sciences writer who specializes in zoology and ornithology. She is currently completing a Ph.D. at Deakin University in Australia which focuses on how the beaks of birds change with global warming.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Ryding, Sara. (2019, April 01). Microscopia del contraste de la reflexión para Immunocytochemistry. News-Medical. Retrieved on June 25, 2021 from https://www.news-medical.net/life-sciences/Reflection-Contrast-Microscopy-for-Immunocytochemistry.aspx.

  • MLA

    Ryding, Sara. "Microscopia del contraste de la reflexión para Immunocytochemistry". News-Medical. 25 June 2021. <https://www.news-medical.net/life-sciences/Reflection-Contrast-Microscopy-for-Immunocytochemistry.aspx>.

  • Chicago

    Ryding, Sara. "Microscopia del contraste de la reflexión para Immunocytochemistry". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/Reflection-Contrast-Microscopy-for-Immunocytochemistry.aspx. (accessed June 25, 2021).

  • Harvard

    Ryding, Sara. 2019. Microscopia del contraste de la reflexión para Immunocytochemistry. News-Medical, viewed 25 June 2021, https://www.news-medical.net/life-sciences/Reflection-Contrast-Microscopy-for-Immunocytochemistry.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.