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Étalage de ribosome : Applications dans la recherche

L'étalage de ribosome est une technique in vitro d'évolution de protéine employée pour recenser les protéines qui grippent fortement à un objectif. D'autres méthodes assimilées à cette technique comprennent l'étalage bactériophage, l'étalage d'ARNm, l'étalage de levure, et l'étalage bactérien ; cependant, l'étalage de ribosome fournit plusieurs avantages.

Ribosomes multiples (polysomes) toute lMeletios Verras | Shutterstock

Pourquoi l'étalage de ribosome est-il employé ?

L'étalage de ribosome peut être employé pour étudier les interactions protéine-protéine qui se produisent pendant le métabolisme quotidien. De plus, la technique permet à des scientifiques de recenser les protéines et les antigènes actuels dans certaines maladies, de développer les médicaments neufs pour bloquer des voies dans le fuselage, et de comprendre comment les protéines agissent l'un sur l'autre dans des systèmes biologiques normaux.

Principes d'étalage de ribosome

Une condition principale derrière l'étalage de ribosome est l'accès à une grande bibliothèque des séquences d'ADN qui codent des protéines. Ces séquences sont transcrites et traduites in vitro, mais le codon non-sens de chaque gène est enlevé.

L'extrémité du gène est fixée à une séquence d'espaceur, une partie courte de non-codage ADN. Ceci permet la traduction du gène dans le produit de protéine utilisant le ribosome, tout en maintenant toutes les composantes ensemble. L'absence d'un condon d'arrêt signifie qu'à la fin de la traduction, le composé de ribosome ne peut pas désassembler faute de codon non-sens.

L'ARNm, le ribosome et la protéine tout le séjour ont stablement fixé en raison des ions de magnésium et d'une basse température. Une chromatographie d'affinité appelée de technique est alors effectuée, utilisant une protéine de limite d'intérêt aux talons dans un fléau, et puis de l'utilisation au-dessus des échantillons de la transcription et de la traduction de la bibliothèque d'ADN.

Si les protéines l'unes des des séquences d'ADN ont l'affinité pour la protéine d'intérêt, elles seront liées et maintenues dans le fléau. Elles peuvent alors être éluées et l'ARNm est inverse transcrit en ADNc et amplifié utilisant l'ACP.

Cet ADNc peut subir des mutations. L'étalage de ribosome est alors effectué sur cet ADN modifié, avec de la plus grande pression de choix, de produire une protéine qui a une affinité plus élevée à la protéine d'intérêt, menant au choix pour le grippement intense.

Avantages d'étalage de ribosome

Le principal avantage de l'étalage de ribosome est qu'il joint le génotype et le phénotype, avec l'ARNm étant lié dans le même composé que la protéine qu'il code pour. Ceci permet l'amplification facile avec l'ACP après l'identification de la protéine.

De plus, l'étalage de ribosome ne se fonde pas sur la capacité d'une cellule d'être transformé, comme dans d'autres techniques. Il est pour cette raison plus simple et moins complexe, exigeant moins d'opérations. Cette méthode permet également la mutation facile des séquences d'ADN sélectées, car la bibliothèque originelle n'a pas besoin d'être modifiée.

Applications d'étalage de ribosome

Modèle de médicament

Concevant les protéines qui grippent fortement à d'autres protéines comme les récepteurs peuvent potentiellement mener au développement des inhibiteurs ou des stimulateurs qui peuvent influencer beaucoup de voies et arrêter le début de la maladie. Par exemple, des peptides antibactériens qui manifestent l'activité contre salmonella typhi de bactérie, qui entraîne la fièvre typhoïde, ont été découverts utilisant l'étalage de ribosome.

Les polypeptides qui sont trouvés sur l'extérieur du staphylocoque doré ont été également recensés par l'étalage de ribosome, fournissant les avenues neuves pour le développement des antibiotiques.

Évolution d'anticorps

L'étalage de ribosome est un mécanisme important dans l'évolution de protéine, et peut améliorer la concentration et la stabilité obligatoires des anticorps. On a produit des anticorps qui ont une affinité 40 fois plus intense comparée à l'anticorps originel. Ceci peut promouvoir la compréhension de l'interaction des anticorps avec des bornes de cancer dans une cellule.

Nanotechnologie

Nanoparticles sont les outils médicinaux puissants utilisés dans la diagnose et comme transporteur des médicaments et d'autres biomolécules. des ligands Objectif-grippants sont nécessaires dans ces particules, et ils peuvent être conçus par l'étalage de ribosome. L'évolution de protéine et l'étalage in vitro de ribosome deviennent pour cette raison ever more plus importants pendant que les technologies médicinales se développent.

Further Reading

Last Updated: Jan 4, 2019

Written by

Jack Davis

Jack is a freelance scientific writer with research experience in molecular biology, genetics, human anatomy and physiology, and advanced analytical chemistry. He is also highly knowledgeable about DNA technology, drug analysis, human disease, and biotechnology.

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