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Despliegue del ribosoma: Usos en la investigación

El despliegue del ribosoma es una técnica in vitro de la evolución de la proteína usada para determinar las proteínas que atan fuertemente a un objetivo. Otros métodos similares a esta técnica incluyen el despliegue bacteriófago, el despliegue del mRNA, el despliegue de la levadura, y el despliegue bacteriano; sin embargo, el despliegue del ribosoma ofrece varias ventajas.

Ribosomas múltiples (polisomas) todo el un cabo que traduce de mRNA - Meletios VerrasMeletios Verras | Shutterstock

¿Por qué se utiliza el despliegue del ribosoma?

El despliegue del ribosoma se puede utilizar para estudiar las acciones recíprocas de la proteína-proteína que ocurren durante metabolismo diario. Además, la técnica permite que los científicos determinen las proteínas y los antígenos presentes en ciertas enfermedades, que desarrollen las nuevas drogas para cegar caminos en la carrocería, y que entiendan cómo las proteínas obran recíprocamente en sistemas biológicos normales.

Principios del despliegue del ribosoma

Un requisito fundamental detrás del despliegue del ribosoma es el acceso a una biblioteca grande de las series de la DNA que codifican las proteínas. Estas series se transcriben y se traducen in vitro, pero el codón de parada de cada gen se quita.

El extremo del gen se sujeta a una serie del espaciador, una sección corta de la DNA de la no-codificación. Esto permite la traslación del gen en el producto de la proteína usando el ribosoma, mientras que guarda todos los componentes juntos. La ausencia de un condon del parada significa que en el final de la traslación, el complejo del ribosoma no puede desmontar en ausencia del codón de parada.

El mRNA, el ribosoma y la proteína todo el retén sujetaron estable debido a iones del magnesio y a una baja temperatura. Una técnica llamada cromatografía de afinidad entonces se realiza, usando una proteína del salto del interés a las molduras en una olumna, y después de ejecutarse sobre las muestras de la transcripción y de la traslación de la biblioteca de la DNA.

Si las proteínas unas de los de las series de la DNA tienen afinidad para la proteína del interés, estarán limitadas y conservadas en la olumna. Pueden entonces ser enjuagadas y el mRNA es marcha atrás transcrita en cDNA y amplificada usando la polimerización en cadena.

Este cDNA puede experimentar mutaciones. El despliegue del ribosoma entonces se realiza en esta DNA modificada, con una presión más grande de la selección, para producir una proteína que tenga afinidad más alta a la proteína del interés, llevando a la selección para el atascamiento fuerte.

Ventajas del despliegue del ribosoma

La ventaja mayor del despliegue del ribosoma es que conecta el genotipo y el fenotipo, con el mRNA que es limitado en el mismo complejo que la proteína que cifra para. Esto permite la amplificación fácil con la polimerización en cadena después de la identificación de la proteína.

Además, el despliegue del ribosoma no confía en la capacidad de una célula de ser transformado, como en otras técnicas. Es por lo tanto más simple y menos complejo, requiriendo menos pasos. Este método también permite la mutación fácil de las series seleccionadas de la DNA, pues la biblioteca original no necesita ser alterada.

Usos del despliegue del ribosoma

Diseño de la droga

Diseñando las proteínas que atan fuertemente a otras proteínas como los receptores pueden potencialmente llevar al revelado de los inhibidores o de los estimuladores que pueden influenciar muchos caminos y parar inicio de la enfermedad. Por ejemplo, los péptidos antibacterianos que visualizan la actividad contra los tifus de las salmonelas de la bacteria, que causa fiebre tifoidea, se han descubierto usando despliegue del ribosoma.

Los polipéptidos que se encuentran en el exterior del estafilococo áureo también han sido determinados por el despliegue del ribosoma, ofreciendo las nuevas avenidas para el revelado de antibióticos.

Evolución del anticuerpo

El despliegue del ribosoma es un mecanismo importante en la evolución de la proteína, y puede perfeccionar la fuerza y la estabilidad obligatorias de anticuerpos. Se han producido los anticuerpos que tienen una afinidad 40 veces más fuerte comparada al anticuerpo original. Esto puede fomentar la comprensión de la acción recíproca de anticuerpos con los marcadores del cáncer en una célula.

Nanotecnología

Nanoparticles es herramientas medicinales potentes usadas en diagnósticos y como onda portadora de drogas y de otras biomoléculas. los ligands Objetivo-obligatorios se necesitan en estas partículas, y pueden ser diseñados por el despliegue del ribosoma. La evolución de la proteína y el despliegue ines vitro del ribosoma por lo tanto están llegando a ser más importantes mientras que las tecnologías medicinales se convierten.

Fuentes

Further Reading

Last Updated: Jan 4, 2019

Written by

Jack Davis

Jack is a freelance scientific writer with research experience in molecular biology, genetics, human anatomy and physiology, and advanced analytical chemistry. He is also highly knowledgeable about DNA technology, drug analysis, human disease, and biotechnology.

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