Interferência curto do RNA do gancho de cabelo (shRNA)

Que é RNA curto do gancho de cabelo?

O RNA serve uma grande variedade de papéis dentro de uma pilha, de umas funções transferal catalíticas, reguladoras, estruturais e genéticas da execução. Um tipo de RNA artificial, chamado RNA curto do gancho de cabelo (shRNA), contem uma volta apertada do gancho de cabelo e é usado freqüentemente para silenciar genes em um processo chamado interferência do shRNA.

O RNA de interferência pequeno limita a um RNA de mensageiro, modelo da ilustração com superfície semi-transparente. os siRNAs são ferramentas sintéticas da interferência do RNA usadas induzindo a redução provisória da expressão do mRNA. Crédito de imagem: Petarg/Shutterstock
RNA de interferência pequeno limitado a um RNA de mensageiro, modelo da ilustração com superfície semi-transparente. os siRNAs são ferramentas sintéticas da interferência do RNA usadas induzindo a redução provisória da expressão do mRNA. Crédito de imagem: Petarg/Shutterstock

Este RNAs é introduzido na pilha com a integração e a inserção do ADN vectores bacterianos/virais ou em plasmídeo.

Os plasmídeo podem somente ser usados in vitro, que limita seu potencial da aplicação. Muitos tipos diferentes de vectores virais foram usados em estudos precedentes, tais como vírus, lentiviruses, e vírus adenóides adeno-associados. Contudo, diversos problemas têm sido mostrados recentemente nos ensaios clínicos, tais como a revelação do cancro devido à inserção impreciso do plasmídeo.

Finalmente, os vectores bacterianos têm sido sugeridos somente recentemente como vectores para o shRNA. Diversos tipos podem ser usados, como Escherichia Coli, que foi usado nos ensaios clínicos para Polyposis adenómato familiar.

Que é interferência do RNA?

Este processo envolve a inibição de genes com da escolha de objectivos de moléculas do mRNA. o mRNA é dividido, impedindo a formação da transcrição e de proteína. Isto é realizado através da introdução de RNA (ds) dobro-encalhado na pilha, que então é fendida e limitada pelo complexo de silêncio RNA-induzido (RISC), que degrada eventualmente o mRNA em uma maneira seqüência-específica, usando um RNA de interferência pequeno (siRNA) como guia.

Que é interferência curto do RNA do gancho de cabelo (shRNA)?

A síntese dos shRNAs ocorre no núcleo das pilhas que transfected ou transduced. São introduzidos subseqüentemente através dos vectores virais ou bacterianos nos núcleos das pilhas visadas que permitem a integração estável no genoma em alguns casos.

os shRNAs formam as estruturas que se assemelham a um gancho de cabelo e consistem em um laço dos nucleotides desirmanados que são conectados à haste-como a região de sentido e de costas antisentido que são emparelhados. o shRNA é exportado do núcleo por Exportin 5. Em um complexo com TRBP e Ago2, Dicer corta então o shRNA no siRNA frente e verso do nucleotide 19-23.

Este duplex igualmente contem 3' saliências de aproximadamente 2 nucleotides. Uma segmentação mais adicional por Ago2 conduz à perda da costa do passageiro, saindo somente da costa do guia.

Esta costa então é combinada dentro da especificidade activa da interferência do RNA complexa (RISC) e usada como guia para visar o mRNA em uma maneira muito específica. Uma vez que liga ao mRNA, um corpo de P está formado, onde o mRNA é fendido e dividido.

Aplicações

Uma das aplicações principais da interferência do shRNA actualmente sob a investigação é o silêncio de genes doença-associados. Por exemplo, os estudos investigaram os usos potenciais deste ensaio para o tratamento de FAP, do cancro metastático, e de outros cancros avançados. Contudo, estes estudos têm todos os problemas difíceis enfrentados, tais como métodos da entrega.

Os métodos virais foram demonstrados para ser perigosos, com alguns pacientes que desenvolvem a leucemia. Outros tema são os efeitos do fora-alvo, que poderiam conduzir ao silêncio não específico do gene. Isto, em particular, podia ter conseqüências desastrosas. Conseqüentemente, este método ainda exige a optimização antes que possa ser de uso geral tratar pacientes.

Fontes

[Leitura adicional: RNA]

Last Updated: Nov 1, 2018

Hannah Simmons

Written by

Hannah Simmons

Hannah is a medical and life sciences writer with a Master of Science (M.Sc.) degree from Lancaster University, UK. Before becoming a writer, Hannah's research focussed on the discovery of biomarkers for Alzheimer's and Parkinson's disease. She also worked to further elucidate the biological pathways involved in these diseases. Outside of her work, Hannah enjoys swimming, taking her dog for a walk and travelling the world.

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