Interferencia corta del ARN de la horquilla (shRNA)

¿Cuál es ARN corto de la horquilla?

El ARN sirve una amplia variedad de papeles dentro de una célula, de funciones transferal catalíticas, reguladoras, estructurales y genéticas de la realización. Un tipo de ARN artificial, llamado ARN corto de la horquilla (shRNA), contiene un giro apretado de la horquilla y se utiliza con frecuencia para imponer silencio a genes en un proceso llamado interferencia del shRNA.

El pequeño ARN de interferencia limita a un ARN de mensajero, modelo del ejemplo con la superficie semitransparente. los siRNAs son herramientas sintetizadas de la interferencia del ARN usadas para inducir la reducción temporal de la expresión del mRNA. Haber de imagen: Petarg/Shutterstock
Pequeño ARN de interferencia limitado a un ARN de mensajero, modelo del ejemplo con la superficie semitransparente. los siRNAs son herramientas sintetizadas de la interferencia del ARN usadas para inducir la reducción temporal de la expresión del mRNA. Haber de imagen: Petarg/Shutterstock

Este RNAs se introduce en la célula con la integración y la inserción de la DNA en vectores bacterianos/virales o plásmidos.

Los plásmidos se pueden utilizar solamente in vitro, que limita su potencial del uso. Muchos diversos tipos de vectores virales se han utilizado en estudios anteriores, tales como virus, lentiviruses, y adenovirus adeno-asociados. Sin embargo, varios problemas se han mostrado recientemente en juicios clínicas, tales como el revelado del cáncer debido a la inserción inexacta del plásmido.

Finalmente, los vectores bacterianos se han sugerido solamente recientemente como vectores para el shRNA. Varios tipos se pueden utilizar, por ejemplo Escherichia Coli, que se ha utilizado en las juicios clínicas para Polyposis adenomatoso familiar.

¿Cuál es interferencia del ARN?

Este proceso implica la inhibición de genes con el alcance de las moléculas del mRNA. el mRNA se analiza, previniendo la transcripción y la formación de proteínas. Esto se realiza a través de la introducción de ARN (ds) doble-trenzado en la célula, que después es hendida y limitada por el complejo que impone silencio ARN-inducido (RISC), que degrada eventual el mRNA de una manera serie-específica, usando un pequeño ARN de interferencia (siRNA) como guía.

¿Cuál es interferencia corta del ARN de la horquilla (shRNA)?

La síntesis de shRNAs ocurre en el núcleo de las células que transfected o transduced. Se introducen posteriormente vía vectores virales o bacterianos en los núcleos de las células apuntadas que permiten la integración estable en el genoma en algunos casos.

los shRNAs forman las estructuras que se asemejan a una horquilla y consisten en un rizo de los nucleótidos desparejados que se conectan con a vástago-como la región de sentido y de cabos antisentido se emparejen que. el shRNA es exportado del núcleo por Exportin 5. En un complejo con TRBP y Ago2, Dicer entonces corta el shRNA en siRNA doble del nucleótido 19-23.

Este duplex también contiene 3' las proyecciones de aproximadamente 2 nucleótidos. La hendidura adicional por Ago2 lleva a la baja del cabo del pasajero, saliendo solamente del cabo de la guía.

Este cabo después se combina dentro de la especificidad activa de la interferencia del ARN compleja (RISC) y se utiliza como guía para apuntar el mRNA de una manera muy específica. Una vez que ata al mRNA, se forma una carrocería de P, donde se hiende y se analiza el mRNA.

Usos

Uno de los usos principales de la interferencia del shRNA bajo investigación es actualmente el imponer silencio de genes enfermedad-asociados. Por ejemplo, los estudios han investigado las aplicaciones potenciales de este análisis para el tratamiento de FAP, del cáncer metastático, y de otros cánceres avanzados. Sin embargo, estos estudios tienen todos los problemas difíciles hechos frente, tales como métodos del lanzamiento.

Los métodos virales se han demostrado para ser peligrosos, con algunos pacientes desarrollando leucemia. El otro tema es los efectos del lejos-objetivo, que podrían llevar a imponer silencio no específico del gen. Esto, particularmente, podía tener consecuencias desastrosas. Por lo tanto, este método todavía requiere la optimización antes de que pueda ser de uso general tratar a pacientes.

Fuentes

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Last Updated: Nov 1, 2018

Hannah Simmons

Written by

Hannah Simmons

Hannah is a medical and life sciences writer with a Master of Science (M.Sc.) degree from Lancaster University, UK. Before becoming a writer, Hannah's research focussed on the discovery of biomarkers for Alzheimer's and Parkinson's disease. She also worked to further elucidate the biological pathways involved in these diseases. Outside of her work, Hannah enjoys swimming, taking her dog for a walk and travelling the world.

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