principes et utilisations de Cryo-FIN DE SUPPORT d'Unique-particule

la microscopie électronique cryogénique d'Unique-particule (cryo-FIN DE SUPPORT) est une technique analytique employée pour déduire la structure 3D des macromolécules (en particulier protéines) comme alternative à la cristallographie de rayon X. Elle n'est pas utilisée généralement dans la pratique quotidienne mais offre quelques avantages par rapport à d'autres techniques.

Saut à :

Virus de Zika. Structure de niveau atomique, déterminée par cryo-FIN DE SUPPORTmolekuul_be | Shutterstock

Comment cryo-FIN DE SUPPORT d'unique-particule fonctionne-t-elle ?

La protéine pure est appliquée à un réseau avec les trous très petits, normalement supportés par un cadre en métal. Ceci distribuera idéalement régulièrement les molécules de protéine dans tous ces trous dans le réseau, dans des orientations variables.

Ce réseau est alors instantané congelé en immergeant dans une solution comme l'azote liquide ou la glace carbonique. Ceci produit au commencement un instantané stable de la protéine dans orientations variées, et évite également quelques dégâts à la protéine, ainsi qu'évite l'évaporation du tampon.

Des images sont prises de toutes les différentes protéines dans ce réseau, et puis alignées et ramenées à une moyenne pour produire un plan 3D. Un bon nombre de traitement et d'analyse entre dans les opérations finales de cette caractéristique, produisant finalement un modèle 3D de la structure des protéines.

Qu'effectue l'offre spéciale cryo-FIN DE SUPPORT ?

Cryo-FIN DE SUPPORT unique de particules produit un instantané plus distinct du comportement d'une protéine à un certain moment, comparé à la cristallographie où les protéines doivent former un réseau commandé ensemble avant que la structure puisse être déterminée.

En raison de cette différence, cryo-FIN DE SUPPORT peut potentiellement donner une analyse plus précise dans la forme naturelle d'une protéine et fournir plus d'informations au sujet de la façon dont elles peuvent fonctionner.

Permettre à la protéine d'être mobile jusqu'à ce qu'un instantané soit pris peut être un défi cependant, car elle rend l'analyse de calcul d'une protéine beaucoup plus difficile, parce que beaucoup d'images de la protéine dans différentes positions et orientations doivent être assemblées ensemble.

Utilisant cryo-FIN DE SUPPORT d'unique-particule pour l'analyse de protéine

La détermination de la structure 3D des protéines représente l'application principale de cette technique. Les deux autres méthodes principales de déduire la structure des protéines est cristallographie ou résonance magnétique nucléaire de rayon X (NMR).

Le procédé de la cristallographie peut être très peu fiable et prolongé. Les conditions exacts de l'environnement de la protéine doivent s'avérer pour que la protéine forme un réseau régulier. Beaucoup d'écrans sont nécessaires, pour cette raison, pour produire les meilleurs cristaux de qualité afin de produire des caractéristiques de diffraction des rayons X.

Relativement un grand nombre d'échantillons sont nécessaires pour que la cristallographie et comparé RMN choisisse cryo-FIN DE SUPPORT de particules. C'est un grand avantage de cryo-FIN DE SUPPORT, signifiant qu'il peut potentiellement être plus facile et meilleur marché par rapport à d'autres méthodologies.

Cryo-FIN DE SUPPORT unique de particules peut également être employée pour toutes les tailles de protéine, tandis que RMN a une restriction de taille pour les protéines qui peuvent s'analyser. Ceci donne à cryo-FIN DE SUPPORT une gamme plus étendue des options pour l'analyse de structure des protéines.

Avantages

En raison de la méthodologie simple et fiable de cryo-FIN DE SUPPORT d'unique-particule, il est possible d'analyser non seulement les protéines simples, mais également les composés de protéine et les polymères comme la F-actine et les microtubules, ainsi que les composés d'initiation de la transcription. Beaucoup de composés de protéine existent seulement pour très des courts période, et cette technique leur permet d'être conçus.

D'autres composés que cryo-FIN DE SUPPORT a activé l'étude approfondie de sont les composés nucléaires, où la protéine grippe à l'ADN ou à l'ARN. Beaucoup d'aspects importants des machines cellulaires se fondent sur ces composés, comprenant pendant la synthèse de réplication de l'ADN et d'ARN.

Il y a beaucoup de structures en des lesquelles la cristallographie ne peut pas déterminer la structure, pourtant cryo-FIN DE SUPPORT unique de particules peut. Un exemple de ces derniers sont des protéines de membrane. Le domaine de transmembrane de ces protéines doit être stabilisé dans les solutions par les détergents, qui peuvent rendre la cristallisation des protéines plutôt difficile.

Cryo-FIN DE SUPPORT peut également déterminer la structure des protéines avec des régions flexibles sans devoir les retirer, qui est souvent faite en cristallographie. Ceci a coupé une opération potentiellement très difficile.

Sources

Further Reading

Last Updated: May 2, 2019

Written by

Jack Davis

Jack is a freelance scientific writer with research experience in molecular biology, genetics, human anatomy and physiology, and advanced analytical chemistry. He is also highly knowledgeable about DNA technology, drug analysis, human disease, and biotechnology.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Davis, Jack. (2019, May 02). principes et utilisations de Cryo-FIN DE SUPPORT d'Unique-particule. News-Medical. Retrieved on December 08, 2019 from https://www.news-medical.net/life-sciences/Single-particle-Cryo-EM-Principles-Uses.aspx.

  • MLA

    Davis, Jack. "principes et utilisations de Cryo-FIN DE SUPPORT d'Unique-particule". News-Medical. 08 December 2019. <https://www.news-medical.net/life-sciences/Single-particle-Cryo-EM-Principles-Uses.aspx>.

  • Chicago

    Davis, Jack. "principes et utilisations de Cryo-FIN DE SUPPORT d'Unique-particule". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/Single-particle-Cryo-EM-Principles-Uses.aspx. (accessed December 08, 2019).

  • Harvard

    Davis, Jack. 2019. principes et utilisations de Cryo-FIN DE SUPPORT d'Unique-particule. News-Medical, viewed 08 December 2019, https://www.news-medical.net/life-sciences/Single-particle-Cryo-EM-Principles-Uses.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News-Medical.Net.
Post a new comment
Post