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Análisis del azúcar usando la cromatografía

Varias comidas crudas (frutas, verduras, drogas, etc.) y los productos alimenticios tramitados consisten en sobre todo los azúcares, y carboxílicos y los aminoácidos. Así, la necesidad del análisis cuantitativo de azúcares está ganando importancia crítica, y las diversas formas de las técnicas de la cromatografía se están aplicando con este fin.

La determinación del contenido del azúcar de los alimentos diarios es esencial para la salud humana.Alexander Weickart | Shutterstock

¿Qué hace análisis del azúcar difícil?

Las propiedades sensoriales y de textura de comidas se pueden atribuir a los monosacáridos, tales como glucosa, fructosa, sucrosa, y oligo y los polisacáridos. La dificultad principal mientras que analiza los azúcares es las formas isoméricas variables que pueden estar presentes hacia adentro. Por ejemplo, la glucosa puede estar presente en varias formas: forma simple del no-glucósido, forma hidratada, y α- o β-glucopyranose.

También, varios monosacáridos difieren de uno a de maneras de menor importancia, tales como un grupo de oxhidrilo diferentemente orientado. Así, el análisis de la glucosa, por ejemplo, puede implicar la separación de seis diversos isómeros de la glucosa que requieren métodos de separación altamente selectivos y sofisticados.

Sin embargo, para el análisis de polisacáridos dentro de la comida, la distribución exacta de isómeros puede no ser esencial. De hecho, en muchos casos, una abundancia de información puede llevar a la información falsa. En estos casos, las técnicas cromatográficas, tales como cromatografía líquida de alto rendimiento pueden separar los azúcares con la resolución, la selectividad, y la sensibilidad limitadas.

Cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC)

La cromatografía líquida de alto rendimiento se utiliza para separar y para determinar componentes en una mezcla. En este método, el disolvente líquido se pasa a través de una olumna que se llene del material adsorbente tal como sílice. Mientras que el disolvente pasa a través de él, diversos componentes obran recíprocamente con el disolvente a diversos regímenes, llevando a diversos flujos. Esto lleva a la separación de los componentes individuales.

Este método se ha utilizado extensivamente para analizar los azúcares underivatized. Las olumnas grafitadas del carbono se han utilizado para separar mono o los disacáridos, y los azúcares de la maltosa. La cromatografía líquida de alto rendimiento se ha utilizado en los campos del análisis de alimentos, determinando los sacáridos en instalaciones, los ambientes de la fermentación, y otros componentes.

Incluso los niveles de trazo de azúcares se han cuantificado usando la cromatografía líquida de alto rendimiento de la reverso-fase. Este método también se ha acoplado con la ionización electrospray (ESI) para caracterizar talla, serie, y las estructuras del brazo de azúcares estrechamente vinculados.

Cromatografía de gas

Se utiliza la cromatografía de gas en caso de que la composición que se analizará pueda ser vaporizada sin experimentar la descomposición. Las aplicaciones de la cromatografía de gas incluyen la prueba de la pureza de una composición, la separación de los componentes de una mezcla, o determinar una composición. Este método se ha utilizado para analizar los azúcares en muestras ambientales.

En un estudio, los tiempos de la fragmentación y de retención de cincuenta azúcares, incluyendo los monosacáridos, los alcoholes de azúcar, los anhydrosugars, y el di y los trisacáridos eran resueltos. El análisis fue realizado en las partículas del aerosol, suelo y las muestras del sedimento y el método podían descubrir varios azúcares ambientales, tales como glucosa, fructosa, inositol, manitol, sorbitol, levoglucosan, sucrosa, y las micosis.

Cromatografía del ión

La cromatografía del ión puede separar los iones y las moléculas polares dependiendo de su afinidad con la olumna de intercambio iónico. En un estudio, la cromatografía del ión fue utilizada para determinar la presencia de cinco monosacáridos, incluyendo la arabinosa, la glucosa, la fructosa, la xilosa, la ribosa, y los disacáridos (sucrosa y lactosa) de las muestras de azúcares sin procesar.

El análisis fue realizado en la olumna del PA 10 de CarboPac y una elución de gradiente del hidróxido y del agua de sodio fue utilizada como la fase movible. Un electrodo de trabajo hecho del oro fue utilizado para descubrir el mono y los disacáridos. Este método podía lograr un límite de detección de menos de 0,5 µm/ml.

Fuentes

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Last Updated: Apr 15, 2019

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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