Advertencia: Esta página es una traducción de esta página originalmente en inglés. Tenga en cuenta ya que las traducciones son generadas por máquinas, no que todos traducción será perfecto. Este sitio Web y sus páginas están destinadas a leerse en inglés. Cualquier traducción de este sitio Web y su páginas Web puede ser imprecisa e inexacta en su totalidad o en parte. Esta traducción se proporciona como una conveniencia.

Transcripción Activador-como el determinante Nucleases (TALENs)

Por Jeyashree Sundaram, MBA

La transcripción Activador-Como el determinante Nucleases (TALENs) es las enzimas artificiales de la restricción que tienen la capacidad de cortar la DNA actualmente contacto con una serie de nucleótidos.

Haber: Sergey Nivens/Shuttershock

TALENs implica la síntesis de la C-terminal con el tipo enzima de la restricción de II, Fokl, para producir los heterodimers que forman un interruptor doble-trenzado (DSB) en la DNA.

Los adelantos recientes en TALEN incluyen la nucleasa DNA-que parte no específica combinada con un dominio obligatorio de la DNA que se pueda diseñar fácilmente para facilitar TALENs para el alcance efectivo de las diversas series del gen.

La capacidad de TALENs soporta el revelado de la investigación biológica y aumenta los métodos de tratamiento para las enfermedades genéticas.

Técnicas de TALEN basadas en la ingeniería del genoma

El corregir del genoma es un nuevo método emergente que permite la manipulación directa de cualquier tipo de gen que pertenece a los diversos organismos y células.

Este método se basa en la utilización de los nucleases dirigidos que consisten en un dominio DNA-obligatorio serie-específico combinado con un módulo regular del escupitajo de la DNA.

Estos nucleases ilusorios consisten en los módulos DNA-obligatorios programables y serie-específicos acoplados con un dominio hendido DNA regular que permita cambios genéticos exactos y eficientes estimulando los interruptores apuntados del doble-cabo de la DNA para inducir la reparación celular de la DNA, incluyendo NHEJ falible y HDR.

Por lo tanto, la adaptabilidad y la facilidad de las técnicas de TALENs han llevado al revelado de la ingeniería genética.

dominio DNA-obligatorio

las moléculas DNA-obligatorias se pueden combinar con varios dominios del determinante para influenciar las estructuras y las funciones genomic; incluyendo nucleases, recombinases, transposasas, activadores y represores transcriptivos, acetiltransferasas de la histona de la DNA, y methyltransferases de la histona de la DNA. Así pues, la capacidad de la ejecución de cambios genéticos depende con éxito del atascamiento de la DNA y de la proximidad selectivos de las proteínas del CUENTO.

La unidad básica usada para construir los dominios DNA-obligatorios de TALENs es altamente series repetidores conservadas detectadas de cuentos cifrados proteobacteria del Xanthomonas.

Un tipo sistema de la secreción de III se utiliza para inocular estos cuentos en las células de las plantas huésped; para modificar la transcripción en las células huesped, estos cuentos entonces están limitados a la DNA genomic. Este proceso permiso la colonización de las bacterias patógenas.

las repeticiones Alto-conservadas de 33-35 grupos del aminoácido que sean limitados por otros Cuento-derivados en los extremos terminales del carboxy- y de las amino-unidades facilitan el mecanismo DNA-obligatorio completo.

Usos de TALENs

Los usos mayores de la transcripción Activador-Como el determinante Nucleases (TALENs) se discuten abajo:

Inserción de la DNA apuntada en instalaciones de patata

La adición de la DNA apuntada en la situación conocida del genoma es más ventajosa que el mecanismo arbitrario de la inserción que implica métodos genéticos estándar de la modificación.

La combinación exacta de transgenes puede asegurar la co-segregación y aumentar la predicción del nivel de expresión génica, que hace la línea selección y caracterización rio abajo más útiles. Los procedimientos de la desregulación de cosechas transgénicas se hacen un más simple debido a la integración in situ de la DNA.

Los diversos procedimientos experimentales implican la combinación de DSB TALEN-inducido y la selección no autónoma del marcador para la inserción del transgén en un sitio pre-elegido y transcriptionally activo presente en genoma de la patata.

Un vector de la citocinina también se utiliza en experimentos para obtener la expresión de TALEN y para prevenir la integración estable de nucleases. Los resultados de experimentos representan el acontecimiento de T-DNA estimulado por TALEN, con la expresión genomic de alta frecuencia y segura.

El corregir del genoma

El genoma que corrige implicando el sistema de TALENs es ampliamente utilizado en instalaciones. El corregir apuntado del genoma de la instalación se puede utilizar para la investigación de la función del gen. Puede también ser utilizado para generar las instalaciones con nuevas características tales como resistencia a los patógeno y a los herbicidas, cambios en metabolismo, productividad etc.

El genoma que corregía en instalaciones usando TALENs se ha realizado usando cuatro objetos modelo.

TALENs se ha desarrollado recientemente como un genoma progresivo que corregía la herramienta usada en diversos células y organismos. Los interruptores cromosómicos específicos in situ del doble-cabo inducidos por TALENs han aumentado considerablemente la eficiencia de la modificación del genoma.

Diversos aplicaciones y valores de TALENs

  • TALENs tiene valor para la formación de deformaciones knockout y para el estudio de las mutaciones de la célula de diversos organismos como la levadura, las bacterias, las células madres embrionarias de la rata, los pescados, xenopus, variedades de células humanas, roedores, e instalaciones. Los diversos análisis habilitan la evaluación de las eficiencias del corte de TALENs.

 

  • TALENs se puede formar para habilitar la inducción de mutaciones en los marcos de lectura abiertos de los virus, tales como hepatitis B, el VIH, y el herpes, que están presentes en el estado latente dentro de la carrocería y son inafectados por el tratamiento que inhibe virus y sus réplicas. Por lo tanto, sus síntomas se evaden permanente con modificaciones genomic exactas.

 

  • TALENs permite la inducción efectiva de cambios apuntados en los diversos organismos modelo que son desafiadores para la manipulación genética como ascáride, mosca del vinagre, zebrafish, lingote, rata y rana. También están implicados en la modificación genomic endógena en células del gusano de seda, del grillo, y de la vaca.

 

  • Las mejorías recientes en la técnica de TALENs soportan el estudio de genomas en instalaciones del trigo y permiten la modificación rápida en las propiedades agronómicas de la cosecha. También ayudan en evitar la necesidad de la DNA del no-ordenador principal. Las mejorías en propiedades de la cosecha incluyen el rendimiento creciente y la inmunidad creciente contra varias enfermedades.

Fuentes:

Further Reading

Last Updated: Feb 26, 2019

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.