Types d'électrophorèse capillaire

Dans l'évolution des techniques employées pour séparer des molécules basées sur leur mobilité électrophorétique, l'électrophorèse capillaire a été réglée avec précision afin d'obtenir des résultats optimaux pour varier des expériences. Il y a six formes principales d'électrophorèse capillaire, étant branchées de deux sous-ensembles principaux, l'un d'entre eux est encore subdivisé en deux subdivisions.

Généralement, les deux sous-ensembles principaux d'électrophorèse capillaire sont une électrophorèse capillaire de système continu et une électrophorèse capillaire discontinue de système. Le système discontinu s'assure qu'un échantillon est maintenu dans une zone distincte, qui est divisée par deux électrolytes différents. La seule forme de l'électrophorèse capillaire qui est classifiée dans la catégorie discontinue est connue en tant qu'isotachophoresis capillaire.

Le système continu a un électrolyte contextuel qui agit principalement comme un neutralisant en travers du capillaire. Ce système a deux subdivisions importantes, à savoir, une électrophorèse capillaire de processus équilibrée, que la mise au point isoélectrique capillaire est un membre, et une électrophorèse capillaire de procédé cinétique, qui est composée des quatre techniques demeurantes.

Isotachophoresis capillaire (CITP)

En étant le membre unique du système discontinu, molécules avec la technique de CITP émigrez dans des zones définitives. Ces zones peuvent être mesurées la quantification des buts d'échantillon. L'échantillon est essentiellement ajouté entre deux tampons différents, l'un d'entre eux a une mobilité plus élevée dans le procédé de séparation et est connu comme principal électrolyte.

Le deuxième tampon est la composante la plus lente dans le système entier, plus lent que les molécules témoin. Les longueurs des zones sont proportionnelles à la concentration des analytes dans elles. CITP est particulièrement grand en spectrométrie de masse ultra-sensible pour la découverte des biomarqueurs dans le profilage proteomic.

Mise au point isoélectrique capillaire (CIEF)

Cette forme d'électrophorèse capillaire est couramment utilisée aux peptides indépendants et aux protéines. Les facteurs déterminants dans cette technique sont la charge des groupes de protéine impliqués et le pH des solutions. Puisque la charge est modifiée avec modifier le pH, c'est la base du mécanisme pour séparer des molécules dans le mélange avec cette technique.

Chromatographie capillaire électrocinétique micellaire (MEKC)

MEKC emploie le surfactant pour former des micelles (grosses molécules permutant pour former une sphère quand dans la solution aqueuse). Ces micelles sont impérieuses pour leur négativité polaire, qui entraîne une traction vers le pôle positif.

Les molécules qui sont hydrophobes (l'eau détestant) tendront à totaliser avec la micelle, alors que ceux qui sont hydrophiles (l'eau aimant) déménageront assez rapidement par la solution. Les paramètres principaux pour cette technique sont pH, concentration en surfactant, tous les additifs et les revêtements en polymère qui sont employés sur la paroi capillaire.

Électrophorèse capillaire de zone (CZE)

C'est la méthode la plus utilisée généralement d'électrophorèse capillaire d'électrophorèse capillaire. CZE, également connu sous le nom d'électrophorèse capillaire libre de solution, est une technique de séparation qui tient compte principalement du rapport de la charge des particules à la masse, où ceux avec la grande charge au rapport de masse séparé du reste d'abord ; pour cette raison, plus le rapport est grand, plus la séparation est rapide.

En plus de la mobilité électrophorétique des molécules, CZE dépend fortement de l'application de l'intensité de champ continuelle dans tout le capillaire et du pH de la solution tampon. CZE est un excellent choix de la technique à utiliser dans les cas où il y a des différences très petites de pi (remarque isoélectrique) dans des isoforms de protéine.

Electrochromatography capillaire (CEC)

Cette méthode ressemble à la chromatographie de plusieurs manières, car c'est une combinaison d'électrophorèse capillaire et de chromatographie liquide. Elle se compose de trois pièces : (i) l'électromyographie capillaire tubulaire ouverte, qui est une phase stationnaire qui est immobilisée, (ii) la CCE a bourré avec quelques fléaux et (iii) la CCE avec le monolithe.

La CCE et les CZE sont assimilés en termes d'avoir un fiche-type de flux par rapport au flux parabolique qui est pompé, qui augmente l'élargissement de bande.

Électrophorèse en gel capillaire (CGE)

Comme CZE, CGE exige l'intensité de champ continuelle et dépend du pH de la solution tampon pendant que les particules déménagent par le gel et séparent à l'extérieur basé sur la différence de leur taille et forme. C'est un choix grand pour des macromolécules telles que l'ADN et les protéines. Les gels sont supplémentaire avantageux en réduisant la diffusion de corps dissous et le transfert thermique.

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Last Updated: Jun 28, 2019

Dr. Damien Jonas Wilson

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Dr. Damien Jonas Wilson

Dr. Damien Jonas Wilson is a medical doctor from St. Martin in the Carribean. He was awarded his Medical Degree (MD) from the University of Zagreb Teaching Hospital. His training in general medicine and surgery compliments his degree in biomolecular engineering (BASc.Eng.) from Utrecht, the Netherlands. During this degree, he completed a dissertation in the field of oncology at the Harvard Medical School/ Massachusetts General Hospital. Dr. Wilson currently works in the UK as a medical practitioner.

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