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Usos de anticorpos de Deacetylase do Histone (HDAC) na pesquisa

Os anticorpos do deacetylase do Histone (HDAC) são usados para estudar o processo de deacetylation do histone, uma actividade essencial que aconteça dentro das pilhas humanas.

Immunohistochemistry

Crédito de imagem: David A. Litman/Shutterstock.com

Os ensaios numerosos existem actualmente que confiam no uso de anticorpos do deacetylase do histone (HDAC) explorar as proteínas actuais dentro de uma amostra biológica e ver como interagem com outras biomoléculas, que podem descobrir a informação em uma grande variedade de factores. Os ensaios que incluem o ‐ da tracção do ADN para baixo, a microplaqueta, o immunohistochemistry, e a mancha ocidental utilizaram este tipo do anticorpo. Os campos que estão tirando proveito extremamente destes métodos incluem a investigação do cancro e a farmacologia.

O significado de anticorpos do deacetylase do histone (HDAC)

Os processos essenciais que ocorrem dentro das pilhas humanas, tais como a progressão do ciclo de pilha, regulamento da transcrição, e outras actividades desenvolventes, confiam no mecanismo da acetificação e de seu processo reverso, deacetylation, dos resíduos da lisina que residem dentro dos histones do ADN, especificamente dentro dos domínios da cauda do N-terminal.

Os deacetylases do Histone (HDACs), ao lado dos acetyltransferases do histone (HATs), são vitais ao processo da acetificação. Geralmente, as actividades tais como a condensação dos nucleosomes e a repressão da transcrição são ligadas com o processo do deacetylation.

Durante o deacetylation do histone, o deacetylase do histone (HDAC) catalisa a remoção de grupo funcional do acetil dos histones. Isto pode ser visto pelo uso dos métodos que exploram anticorpos do deacetylase do histone (HDAC). A actividade do deacetylase do histone (HDAC), que conduz a uma redução nos níveis de acetificação, pode ser medida com a repressão relacionada da expressão genética que ocorre através do estado condensado de cromatina.

A pesquisa descobriu os anticorpos numerosos do deacetylase do histone (HDAC) que couberam em quatro grupos discretos. Os anticorpos da classe uma são encontrados na maior parte dentro do núcleo da pilha. A classe dois, aproximadamente duas vezes o tamanho de anticorpos da classe uma, é encontrada no cytosol e no núcleo. A terceira classe ocupa o núcleo e o citoplasma e é activada pelo NADH. O final, quarta classe tem somente um anticorpo atribuído a ele, HDAC11.

Usos na pesquisa

Os anticorpos do deacetylase do Histone (HDAC) podem ser usados para compreender sobre o deacetylation do histone dentro das pilhas. Os métodos numerosos da pesquisa confiam nestes anticorpos para detectar e analisar que proteínas existem dentro das amostras biológicas e como interagem. São actualmente chaves aos seguintes métodos da pesquisa:

O ‐ da tracção do ADN analisa para baixo:

O ensaio suspenso do ADN é usado detectando interacções da proteína e pode extrair complexos do ADN da proteína de uma amostra biológica. O método envolve o uso de uma ponta de prova do ADN que seja isolada usando um anticorpo contra a proteína do alvo. O limite desconhecido da seqüência do ADN pela proteína pode então ser identificado pela análise mais aprofundada, geralmente PCR ou mancha do sul. Estes tipos dos estudos, por exemplo, foram usados para descobrir os papéis de determinadas expressões genéticas na doença, como no cancro.

Ensaio da microplaqueta:

Lasque, ou imunoprecipitação da cromatina, seja um ensaio robusto e adaptável que seja usado para ver as interacções proteína-ADN dentro de uma pilha. Pode igualmente identificar as proteínas múltiplas que são ligadas com um genoma particular simultaneamente, assim como identificar o genoma associado com uma proteína específica. Os anticorpos do deacetylase do Histone (HDAC) foram usados nestas encenações do teste, especificamente, eles foram usados para descobrir as interacções da proteína relativas à revelação do cancro.

Immunohistochemistry:

O processo de immunohistochemistry envolve identificar antígenos (proteínas) dentro das pilhas de uma amostra biológica, e é a técnica immunostaining a mais comum. Utiliza o facto que os anticorpos ligam com determinados antígenos dentro das amostras biológicas. Os anticorpos do deacetylase do Histone (HDAC) são usados frequentemente neste ensaio. Além disso, este método foi usado no campo da investigação do cancro e pôde identificar avenidas terapêuticas novas possíveis para as malignidades lymphoid que envolvem inibidores do deacetylase do histone (HDAC).

Ensaio de mancha ocidental:

A mancha ocidental, igualmente conhecida como immunoblotting, é uma técnica de uso geral para a detecção de proteínas dentro do tecido biológico. Envolve a separação através da electroforese, seguida manchando com os anticorpos. Os anticorpos do deacetylase do Histone (HDAC) são de uso geral durante o processo de mancha. Manchar com estes tipos dos anticorpos foi útil em descobrir os mecanismos que são a base do crescimento e da progressão do tumor.

Campos de estudo

As áreas de pesquisa potenciais para o uso de anticorpos de Deacetylase do Histone (HDAC) são vastas. Contudo, há determinadas áreas para que o uso destes anticorpos provou ser mais fundamental.

O estudo do cancro tirou proveito extremamente do trabalho com os anticorpos de Deacetylase do Histone (HDAC). Os ensaios descritos acima foram usados com sucesso para descobrir os detalhes de vários processos que apoiam a iniciação e o crescimento de tipos diferentes do cancro. Puderam destacar a importância de genes específicos, e sugerem como influenciam o cancro. Também, a farmacologia confiou no uso deste tipo do anticorpo na revelação e no teste de drogas farmacológicas novas. Foram usados para ajudar a identificar como as drogas trabalharão se trabalharão para seu uso pretendido, e o que sua eficiência pode ser.

Fontes:

  • Gloghini, A., Buglio, D., Khaskhely, N., Georgakis, G., Orlowski, R., Neelapu, S., Carbone, A. e Younes, A. (2009). Expressão de deacetylases do histone no linfoma: implicação para a revelação de inibidores selectivos. Jornal britânico da hematologia, 147(4), pp.515-525. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3181219/
  • Karch, K., DeNizio, J., preto, B. e García, B. (2013). Identificação e interrogação de alterações combinatórias do histone. Fronteiras nas genéticas, 4. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24391660
  • Murakami, M., Ito, H., Hagiwara, K., Yoshida, K., Sobue, S., Ichihara, M., Takagi, A., Kojima, T., Tanaka, K., Tamiya-Koizumi, K., Kyogashima, M., Suzuki, M., Banno, Y., Nozawa, Y. e Murate, T. (2010). ATRA inibe a transcrição em uma linha celular humana do neuroblastoma, pilhas da quinase do ceramide de SH-SY5Y: o papel de COUP-TFI. Jornal do Neurochemistry, 112(2), pp.511-520. https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/j.1471-4159.2009.06486.x

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Last Updated: Feb 6, 2020

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