Utilisant la cytométrie de flux pour analyser les globules sanguins périphériques

L'utilisation de la cytométrie de flux dans la recherche hématologique s'est développée immensément au cours des dernières années. Cette technique analytique est capable de fournir des informations qualitatives et quantitatives au sujet des protéines et des glycoprotéines extérieures actuelles sur des globules rouges, des leucocytes et des plaquettes.

Globules blancs - une illustration par SebastiAn Tomus

SebastiAn Tomus | Shutterstock

Cytométrie de flux et analyse de globule rouge

La maladie de rhésus

Une des applications les plus très utilisées de la cytométrie de flux est l'analyse des cellules rouges foetales présentes dans le sang maternel. En particulier, la cytométrie de flux est employée souvent pour diagnostiquer la maladie (Rh) de rhésus dans les femmes enceintes, qui peuvent être trouvées comme antigène (Rh) de Rhesis.

Des antigènes de main droite sont exprimés comme partie d'un composé de protéine sur la membrane des hématies (RBCs). Ils sont censés pour jouer un rôle en mettant à jour l'intégrité de la membrane de GR.

Pour trouver la maladie de rhésus, fluorescent marquée des anticorps à l'antigène de main droite, ainsi que ceux qui sont dirigés contre l'hémoglobine F, peut être combiné avec la cytométrie de flux. Cette méthode est techniquement supérieure au test traditionnel de Kleihauer-Betke utilisé pour le diagnostic de la maladie de rhésus, car elle est plus précise et sensible dans sa capacité de discerner des cellules foetales des cellules rouges adultes qui manifestent des petites quantités d'hémoglobine F.

Forme de évaluation de GR

La membrane d'hématie joue un rôle essentiel dans la déformation cellulaire, un procédé qui est essentiel pour l'échange de l'oxygène dans des GR matures.

Ce processis influencé par un grand choix de caractéristiques cellulaires, y compris la géométrie cellulaire et la viscosité cytoplasmique. Les maladies telles que le diabète, l'insuffisance rénale terminale, la sepsie et les conditions inflammatoires aiguës font montrer des GR une forme plus sphérique par rapport aux GR en forme de disque normaux.

La cytométrie de flux est utile ici, car elle peut trouver n'importe quelle altération de forme dans les GR pour recenser des mécanismes des maladies et la probabilité d'un patient développant un état particulier.  

Par exemple, la cytométrie de flux employée pour classer des GR sphériques peut déterminer si les patients de diabète sont plus susceptibles des conditions microvasculaires diabétiques, telles que la néphropathie diabétique. Pour l'analyse de forme de GR, la cytométrie de flux est une fiable, un rapid et une technique hautement reproductible.

CytoDiff et analyse de WBC

CytoDiff est une méthode de comptage différentielle de cytométrique nouvelle de flux qui utilise un cocktail de réactif de 5 color/6-antibody et un algorithme de automatique-déclenchement pour différencier 18 populations (WBC) de globule blanc, dont peut comprendre des souffles, des immunoglobulines (IGs) et des sous-ensembles de lymphocyte.

Avec la capacité de compter approximativement 20.000 WBCs, CytoDiff fournit sensiblement plus de capacités précises de comptage de cellules comparées aux procédés manuels de comptage de cellules sont employés. C'est une technique hautement sensible, spécifique et rapide qui a été cliniquement appliquée pour le diagnostic et la surveillance du leukopenia, de la sepsie ou du cancer métastatique.

Analyse de plaquette

L'analyse de plaquette par cytométrie de flux peut être réalisée par des les deux dirigent ou des analyses plaquette-associées indirectes d'immunoglobuline. La cytométrie de flux joue un rôle essentiel dans le diagnostic du purpura thrombopénique immunisé (ITP), qui est une affection génétique qui cause la consommation de plaquette d'être accélérée.

Malheureusement, puisque les plaquettes sont relativement petites, non colorées et inférieures dans la quantité comparée à d'autres populations de globule sanguin, il est souvent difficile compter et les caractériser, particulièrement dans les patients d'ITP qui montrent déjà des comptes de plaquette inférieurs.

Pour cette raison, la cytométrie de flux s'est avérée une technique sensible pour la plaquette comptant, ainsi que pour le dépistage de l'immunoglobuline G plaquette-associée (PAIgm), qui est une borne pour des enfants avec ITP.

Conclusion

Indépendamment du type témoin, la cytométrie de flux fournit un moyen utile pour des cliniciens à rapidement mesurent des caractéristiques intracellulaires pour le diagnostic des conditions variées de la maladie, ainsi que surveillent l'efficacité des demandes de règlement pour ces conditions.

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Last Updated: Jun 28, 2019

Benedette Cuffari

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Benedette Cuffari

After completing her Bachelor of Science in Toxicology with two minors in Spanish and Chemistry in 2016, Benedette continued her studies to complete her Master of Science in Toxicology in May of 2018. During graduate school, Benedette investigated the dermatotoxicity of mechlorethamine and bendamustine, which are two nitrogen mustard alkylating agents that are currently used in anticancer therapy.

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