Facendo uso di citometria a flusso per analizzare i globuli periferici

L'uso di citometria a flusso nella ricerca ematologica si è sviluppato immenso negli ultimi anni. Questa tecnica analitica è capace di fornire sia informazioni qualitative che quantitative sulle proteine e sulle glicoproteine di superficie presenti sugli eritrociti, sui leucociti e sulle piastrine.

Globuli bianchi - un

Sebastian Tomus | Shutterstock

Citometria a flusso ed analisi dell'eritrocito

Malattia del reso

Una delle applicazioni più ampiamente usate di citometria a flusso è l'analisi delle celle rosse fetali presenti all'interno di sangue materno. In particolare, la citometria a flusso è usata spesso diagnosticare la malattia (Rh) del reso in donne incinte, che possono essere individuate come antigene (Rh) di Rhesis.

Gli antigeni di Rh sono espressi come parte di un complesso della proteina sulla membrana dei globuli rossi (RBCs). Sono creduti per svolgere un ruolo nel mantenimento dell'integrità della membrana di RBC.

Per diagnosticare la malattia del reso, fluorescente contrassegnata anticorpi all'antigene di Rh come pure quelli che sono diretti contro emoglobina F, può combinarsi con citometria a flusso. Questo metodo è tecnicamente superiore alla prova tradizionale di Kleihauer-Betke usata per la diagnosi di malattia del reso, poichè è più preciso e sensibile nella sua capacità di distinguere le celle fetali dalle celle rosse adulte che video le piccole quantità di emoglobina F.

Forma di valutazione di RBC

La membrana di globulo rosso svolge un ruolo cruciale nella deformazione cellulare, un trattamento che è essenziale per lo scambio di ossigeno all'interno di RBCs maturo.

Questo processis influenzato da varie caratteristiche cellulari, compreso la geometria cellulare e la viscosità citoplasmica. Le malattie quali il diabete, l'insufficienza renale terminale, la sepsi e gli stati infiammatori acuti inducono RBCs ad esibire una forma più sferica rispetto a RBCs a forma di disco normale.

La citometria a flusso è utile qui, poichè può individuare tutte le alterazioni di forma in RBCs per identificare i meccanismi di malattia e la probabilità di un paziente che sviluppa uno stato particolare.  

Per esempio, la citometria a flusso usata per categorizzare RBCs sferico può determinare se i pazienti del diabete sono più suscettibili delle circostanze microvascolari diabetiche, quale la nefropatia diabetica. Per l'analisi di forma di RBC, la citometria a flusso è un affidabile, una rapida e una tecnica altamente riproducibile.

CytoDiff ed analisi di WBC

CytoDiff è un metodo di conteggio differenziale cytometric di flusso novello che utilizza un cocktail del reagente di 5 color/6-antibody e un algoritmo automatico-gating per differenziare 18 popolazioni bianche (WBC) del globulo, di cui può comprendere i fischi, le immunoglobuline (IGs) ed i sottoinsiemi del linfocita.

Con la capacità di contare circa 20.000 WBCs, CytoDiff fornisce significantly more abilità precise del contaggio di cellule confrontate ai trattamenti manuali del contaggio di cellule è usato. È una tecnica altamente sensibile, specifica e rapida che è stata fatta domanda clinicamente per la diagnosi ed il video della leucopenia, della sepsi o del cancro metastatico.

Analisi della piastrina

L'analisi della piastrina da citometria a flusso può essere raggiunta con gli entrambi dirige o analisi piastrina-associate indirette dell'immunoglobulina. La citometria a flusso svolge un ruolo cruciale nella diagnosi di porpora trombocitopenica immune (ITP), che è una malattia genetica che induce il consumo della piastrina ad essere accelerata.

Purtroppo, poiché le piastrine sono relativamente piccole, non colorate e basse nella quantità confrontata ad altre popolazioni del globulo, sono spesso difficili da contare e caratterizzare, particolarmente nei pazienti di ITP che già esibiscono i conteggi delle piastrine più bassi.

Per questo motivo, la citometria a flusso è stata trovata per essere un metodo sensibile per la piastrina che conta come pure per la rilevazione dell'immunoglobulina piastrina-associata il G (PAIgm), che è un indicatore per i bambini con ITP.

Conclusione

Indipendentemente dal tipo del campione, la citometria a flusso fornisce un modo utile affinchè i clinici misuri rapido le caratteristiche intracellulari per la diagnosi di vari stati di malattia come pure riflettere l'efficacia dei trattamenti per queste circostanze.

Sorgenti

[Ulteriore lettura: Citometria a flusso]

Last Updated: Jun 28, 2019

Benedette Cuffari

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Benedette Cuffari

After completing her Bachelor of Science in Toxicology with two minors in Spanish and Chemistry in 2016, Benedette continued her studies to complete her Master of Science in Toxicology in May of 2018. During graduate school, Benedette investigated the dermatotoxicity of mechlorethamine and bendamustine, which are two nitrogen mustard alkylating agents that are currently used in anticancer therapy.

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