Usando el Cytometry de flujo para analizar a los glóbulos periféricos

El uso del cytometry de flujo en la investigación hematológica ha crecido inmenso en los últimos años. Esta técnica analítica es capaz de ofrecer la información cualitativa y cuantitativa sobre las proteínas y las glicoproteínas superficiales presentes en eritrocitos, leucocitos y plaquetas.

Glóbulos blancos - un ejemplo por Sebastian Tomus

Sebastian Tomus | Shutterstock

Cytometry de flujo y análisis del eritrocito

Enfermedad del macaco de la India

Uno de los usos más ampliamente utilizados del cytometry de flujo es el análisis de los glóbulos rojos fetales presentes dentro de sangre maternal. Particularmente, el cytometry de flujo es de uso frecuente diagnosticar enfermedad (Rh) del macaco de la India en las mujeres embarazadas, que pueden ser descubiertas como antígeno (Rh) de Rhesis.

Los antígenos el derecho se expresan como parte de un complejo de la proteína en la membrana de glóbulos rojos (RBCs). Se creen para desempeñar un papel en mantener la integridad de la membrana de RBC.

Para descubrir la enfermedad del macaco de la India, fluorescente etiqueta los anticuerpos al antígeno el derecho, así como los que se dirijan contra la hemoglobina F, se puede combinar con cytometry de flujo. Este método es técnico superior a la prueba tradicional de Kleihauer-Betke usada para la diagnosis de la enfermedad del macaco de la India, pues es más exacto y sensible en su capacidad de distinguir las células fetales de los glóbulos rojos adultos que visualizan pequeñas cantidades de la hemoglobina F.

Forma de evaluación de RBC

La membrana celular de glóbulo del rojo desempeña un papel crucial en la deformación celular, un proceso que sea esencial para la cantina del oxígeno dentro de RBCs maduro.

Este processis influenciado por una variedad de características celulares, incluyendo geometría celular y viscosidad citoplásmica. Las enfermedades tales como diabetes, insuficiencia renal terminal, sepsia y estados inflamatorios agudos hacen RBCs exhibir una forma más esférica con respecto a RBCs disco-dado forma normal.

El cytometry de flujo es útil aquí, pues puede descubrir cualquier cambio de la forma en RBCs para determinar mecanismos de la enfermedad y la probabilidad de un paciente que desarrolla una condición determinada.  

Por ejemplo, el cytometry de flujo usado para categorizar RBCs esférico puede determinar si los pacientes de la diabetes son más susceptibles a las condiciones microvasculares diabéticas, tales como nefropatía diabética. Para el análisis de la forma de RBC, el cytometry de flujo es un seguro, un rapid y una técnica altamente reproductiva.

CytoDiff y análisis de WBC

CytoDiff es un método que cuenta diferenciado cytometric del flujo nuevo que utiliza un cóctel del reactivo de 5 color/6-antibody y un algoritmo auto-que bloquea para distinguir 18 poblaciones blancas (WBC) del glóbulo, cuyo puede incluir chorros, las inmunoglobulinas (IGs) y los subconjuntos del linfocito.

Con la capacidad de contar aproximadamente 20.000 WBCs, se utiliza CytoDiff ofrece significantly more capacidades exactas de la numeración celular comparadas a los procesos manuales de la numeración celular. Es una técnica altamente sensible, específica y rápida que se ha solicitado clínico la diagnosis y la supervisión de la leucopenia, de la sepsia o del cáncer metastático.

Análisis de la plaqueta

El análisis de la plaqueta por cytometry de flujo se puede lograr con ambos dirige o los análisis plaqueta-asociados indirectos de la inmunoglobulina. El cytometry de flujo desempeña un papel crucial en la diagnosis de la púrpura thrombocytopenic inmune (ITP), que es un desorden genético que hace el consumo de la plaqueta ser acelerado.

Lamentablemente, puesto que las plaquetas son relativamente pequeñas, incoloras e inferiores en la cantidad comparada a otras poblaciones del glóbulo, son a menudo difíciles de contar y de caracterizar, especialmente en los pacientes de ITP que exhiben ya cuentas de plaqueta más inferiores.

Por este motivo, el cytometry de flujo se ha encontrado para ser un método sensible para la plaqueta que contaba, así como para la detección de la inmunoglobulina plaqueta-asociada G (PAIgm), que es un marcador para los niños con ITP.

Conclusión

Sin importar el tipo de la muestra, el cytometry de flujo ofrece una manera útil para que los clínicos midan rápidamente las características intracelulares para la diagnosis de los diversos estados de la enfermedad, así como vigilen la eficacia de los tratamientos para estas condiciones.

Fuentes

[Lectura adicional: Cytometry de flujo]

Last Updated: Jun 28, 2019

Benedette Cuffari

Written by

Benedette Cuffari

After completing her Bachelor of Science in Toxicology with two minors in Spanish and Chemistry in 2016, Benedette continued her studies to complete her Master of Science in Toxicology in May of 2018. During graduate school, Benedette investigated the dermatotoxicity of mechlorethamine and bendamustine, which are two nitrogen mustard alkylating agents that are currently used in anticancer therapy.

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