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Que são proteínas de recombinação?

As proteínas de recombinação são formadas transfecting genes estrangeiros em uma pilha de anfitrião. As proteínas de recombinação são de uso geral produzir produtos farmacêuticos, polímeros proteína-baseados para a entrega da droga, anticorpos e enzimas para o tratamento da doença, andaimes da proteína para a engenharia do tecido, assim como para uma miríade de outro usos.

O BMP de recombinação é usado actualmente para tratar a doença orthostatic nos EUAmolekuul_be | Shutterstock

Como a ideia da proteína de recombinação emergiu?

As proteínas de recombinação foram propor por Peter Lobban que era a primeira pessoa para produzir e replicate o DNA recombinante em 1972 e o 1973. O DNA recombinante é criado fundindo as seqüências que não podem estar normalmente actuais em um organismo. Contudo, é ainda possível mudar e reintroduzir um ADN alterado porque os organismos diferentes compartilham da mesma estrutura do ADN.

Este ADN alterado é introduzido em uma pilha de anfitrião, depois do qual pode ser replicated sem expressão, ou pode ser transcrito e traduziu a condução à formação de uma proteína de recombinação. Em muitos casos, as seqüências adicionais (tais como o promotor ou os sinais da iniciação da tradução) podem ser exigidas para induzir a expressão do DNA recombinante.

Expressão de proteínas de recombinação

A estratégia para expressar a proteína de recombinação envolve transfecting uma pilha particular com o vector do ADN que contem o molde do DNA recombinante. As pilhas que contêm o molde são cultivadas então, de modo que possam transcrever e traduzir a proteína do interesse.

Estas pilhas podem então ser lyzed ou quebrado-se para liberar a proteína formada que é sujeitada então aos métodos da purificação. Os sistemas que são usados para expressar o DNA recombinante incluem sistemas prokaryotic e eucarióticas. Esta escolha é baseada frequentemente no tipo da proteína, na actividade funcional, assim como no rendimento exigido que é exigido.

Sistemas mamíferos

Os sistemas mamíferos são usados para executar ensaios funcionais, a análise estrutural, a produção do anticorpo, a interacção da proteína, a produção de vírus, etc. Uma vantagem principal deste sistema é produção transiente ou estável de proteínas.

Além disso, o sistema foi aperfeiçoado para o rendimento rápido e alto de produzir proteínas. Contudo, as desvantagens incluem a necessidade para grandes rendimentos (tais como o relvado/litro) em caso das culturas de suspensão. Também, as condições da cultura celular são mais exigência neste caso.

Sistema do insecto

Este sistema é usado para executar ensaios funcionais, análise estrutural, expressando proteínas intracelulares e complexos da proteína, produção de vírus, etc. Os métodos de processamento são neste caso similares aos métodos às proteínas do processo em sistemas mamíferos. Contudo, neste sistema, as condições da cultura celular são de exigência do que cultivando pilhas prokaryotic. Também, produzir os vectores de recombinação é demorada em sistemas do insecto.

Sistema do fermento

Este sistema é usado para executar a análise estrutural, ensaios funcionais, geração de anticorpos, mas para estudar igualmente interacções da proteína. Este sistema pode ser usado para processar proteínas eucarióticas e é evolutivo até a fermentação. As exigências dos media são igualmente simples neste caso. Contudo, para gerar rendimentos muito altos, a fermentação é exigida e as condições do crescimento precisam frequentemente de ser aperfeiçoadas.

Sistema bacteriano

O sistema bacteriano pode igualmente ser usado para fazer ensaios estruturais e funcionais. É evolutivo, barato, e exige condições relativamente simples dos media. Contudo, algumas proteínas mamíferas podem ser difíceis de expressar neste caso.

Sistema de algas

Este sistema é usado para estudar a fotossíntese, a biologia da planta e o metabolismo. Uma das vantagens grandes é que pode ser usada para alterar e expressar genetically sistemas para microalgae fotossintéticos. Além disso, pode igualmente fornecer bons controles experimentais para produzir o combustível biológico e os nutraceuticals. Contudo, esta é ainda uma plataforma emergente e é menos desenvolvida quando comparada a alguns dos outros sistemas.

Sistema sem célula

Este sistema é usado para estudar proteínas tóxicas, incorporação de ácidos aminados não naturais, exame dos inibidores translational etc. Desde que este é um sistema aberto, é possível adicionar componentes não naturais. Também, a expressão é rápida e simples. Contudo, escalar a produção de proteína de recombinação acima das quantidades de multi-miligrama pode ser cara e incómoda.

Fontes

Last Updated: Mar 28, 2019

Dr. Surat P

Written by

Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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