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Quelle est microscopie confocale de Raman ?

Dans la microscopie confocale de Raman, un spectromètre de Raman est accouplé à un microscope optique normal, qui mène à un agrandissement élevé de l'échantillon et de l'analyse suivante de Raman. La combinaison de la spectroscopie de Raman avec la microscopie confocale permet le filtrage spatial optimal pour l'analyse de volume témoin.

Saut à :

Image abstraite des cellules observées sous un microscope confocal de raman.Raimundo79 | Shutterstock

Microscopie confocale de Raman

En spectroscopie confocale de Raman, il est possible d'obtenir la forme de spectre de signe un unique sur l'échantillon. Ce spectre de signe peut être transformé dans les informations détaillées concernant la composition chimique de l'endroit dans l'échantillon. Ajoutant cette modalité au microscope confocal, il est possible de trouver les structures qui n'ont pas été précédemment trouvées, basées dans son information spectrale.

L'information spectrale peut être obtenue par absorption, réflexion, boîte de vitesses, émission, photoluminescence, fluorescence ou spectroscopie de Raman. Parmi ces autres méthodes, la spectroscopie de Raman peut fournir des informations spécifiques concernant les énergies vibratoires et rotationnelles des obligations moléculaires.

Quelle est microscopie confocale ?

Le premier microscope confocal a été inventé et breveté par Marvin Minsky en 1957. Il était intéressé à concevoir le système nerveux humain qui était s'avérer difficile dans la microscopie conventionnelle due à hors de la lumière d'orientation. Car l'échantillon entier a été illuminé dans la microscopie de large-inducteur, il y avait d'associé léger dispersé abondant à lui.

Le principe de la microscopie confocale est basé sur limiter cette lumière d'à l'extérieur-de-orientation. Minsky a postulé que cette lumière d'à l'extérieur-de-orientation peut être limitée en l'évitant pour écrire l'objectif du microscope. Pour ceci, il a installé un trou d'épingle devant la source lumineuse. Ceci a mené seulement à la lumière limitée écrivant l'objectif et la majeure partie de la lumière dispersée est enlevée. Un autre trou d'épingle élimine l'information d'image qui est à l'extérieur-de-orientation. Cette lumière égarée est limitée sans affecter la brilliance d'échantillon.

Quelle est spectroscopie de Raman ?

La spectroscopie de Raman est basée sur le principe de la dispersion de Raman. Quand la lumière d'incident est des chutes sur un échantillon, elle mène à la dispersion de la lumière d'une façon élastique. Indépendamment de la diffusion élastique, il y a également un pourcentage de la lumière dispersé d'une façon non élastique. C'est Raman appelé dispersant, et peut être encore divisé en charge et dispersion anti-Charger. Utilisant la spectroscopie de Raman, l'information peut être obtenue au sujet des vibrations et de la structure moléculaires d'un échantillon.

Quels sont les avantages de la microscopie confocale de Raman ?

La spectroscopie de Raman est une bonne sonde pour déterminer les énergies vibratoires d'une molécule. En outre, elle peut être employée pour exciter une région sélectrice de l'échantillon en changeant la longueur d'onde de la lumière d'excitation. Supplémentaire, cette méthode n'exige pas des méthodes considérables de préparation des échantillons et la méthode est non destructive - c.-à-d. l'échantillon n'est pas détruit dans le procédé.

Les bandes de l'eau sont également petites et facilement soustraites. La spectroscopie de Raman comporte les bandes caractéristiques qui sont spécifiques aux signatures moléculaires spécifiques de l'échantillon. L'intensité de la bande est également proportionnelle à la concentration des molécules qui sont trouvées. Ainsi, cette méthode peut également être employée pour l'analyse quantitative.

Pour les échantillons biologiques, les spectres de Raman peuvent fournir les informations détaillées concernant les constituants, qui peuvent, consécutivement, pour fournir des caractéristiques suffisantes pour l'analyse quantitative et pour distinguer différents matériaux assimilés.

Les microscopes confocaux développés récemment de Raman également sont conçus tel qu'ils sont facilement personnalisables, qui aide en donnant les meilleurs résultats en termes de différenciation des produits chimiques et de la sensibilité. Par exemple, le système de Princeton se compose d'un microscope confocal accouplé à un détecteur multivoie qui peut traiter une gamme des longueurs d'onde d'excitation et des lasers accordables.

Potentiel grand d'application

Les applications de ce système s'échelonnent des endroits multiples d'industrie à la recherche universitaire, y compris le nanoscience (tel que l'électronique moléculaire, des nanotubes, des nanosensors, des nanowires), la science des matériaux (telle que des systèmes de ségrégation de phase), et la catalyse (telle que des catalyseurs d'unique-site).

Sources

Further Reading

Last Updated: May 22, 2019

Dr. Surat P

Written by

Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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