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Che cosa è microscopia confocale di Raman?

Nella microscopia confocale di Raman, uno spettrometro di Raman è accoppiato ad un microscopio ottico standard, che piombo ad un alto ingrandimento del campione e dell'analisi successiva di Raman. Combinando la spettroscopia di Raman con la microscopia confocale permette la filtrazione spaziale ottimale per l'analisi del volume di campione.

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Immagine astratta delle celle osservate sotto un microscopio confocale di Raman.Raimundo79 | Shutterstock

Microscopia confocale di Raman

In spettroscopia confocale di Raman, è possibile ottenere il modulo di spettro del segnale un unico sul campione. Questo spettro del segnale può essere trasformato in informazione dettagliata per quanto riguarda la composizione chimica del punto nel campione. Aggiungendo questa modalità al microscopio confocale, è possibile individuare le strutture che precedentemente non sono state trovate, basate sulle sue informazioni spettrali.

Le informazioni spettrali possono essere ottenute da assorbimento, da riflesso, dalla trasmissione, dall'emissione, dalla fotoluminescenza, dalla fluorescenza o dalla spettroscopia di Raman. Fra questi altri metodi, la spettroscopia di Raman può fornire informazioni specifiche per quanto riguarda le energie vibratorie e rotazionali delle obbligazioni molecolari.

Che cosa è microscopia confocale?

Il primo microscopio confocale è stato inventato e brevettato stato da Marvin Minsky nel 1957. Era interessato nel prevedere il sistema nervoso umano che era risultare difficile nella microscopia convenzionale dovuto dall'indicatore luminoso del fuoco. Poichè l'intero campione è stato illuminato nella microscopia del ampio-campo, c'era associato leggero sparso abbondante con.

Il principio di microscopia confocale è basato sulla limitazione del questo indicatore luminoso sfuocato. Minsky ha postulato che questo indicatore luminoso sfuocato può essere limitato impedicendolo per fornire l'obiettivo del microscopio. Per questo, ha installato un foro di spillo davanti alla sorgente luminosa. Ciò piombo soltanto ad indicatore luminoso limitato che entra nell'obiettivo e la maggior parte dell'indicatore luminoso sparso è eliminato. Un altro foro di spillo elimina le informazioni di immagine che sono sfuocate. Questa luce esterna è limitata senza pregiudicare la luminosità del campione.

Che cosa è la spettroscopia di Raman?

La spettroscopia di Raman è basata per principio di scattering di Raman. Quando la luce incidente è cadute su un campione, piombo alla dispersione dell'indicatore luminoso in un modo elastico. Oltre allo scattering elastico, c'è egualmente una percentuale indicatore luminoso sparso in un modo anelastico. Ciò è chiamata scattering di Raman e può più ulteriormente essere divisa in rifornisce e anti-Rifornisce lo scattering. Facendo uso della spettroscopia di Raman, le informazioni possono essere ottenute circa le vibrazioni e la struttura molecolari di un campione.

Che cosa sono i vantaggi di microscopia confocale di Raman?

La spettroscopia di Raman è una buona sonda per determinare le energie vibratorie di una molecola. Inoltre, può essere usata per eccitare una regione selettiva del campione cambiando la lunghezza d'onda dell'indicatore luminoso di eccitazione. Ulteriormente, questo metodo non richiede gli estesi metodi del preparato del campione ed il metodo è non distruttivo - cioè il campione non si distrugge nel trattamento.

Le bande dell'acqua sono egualmente piccole e sottratte facilmente. La spettroscopia di Raman comprende le bande caratteristiche che sono specifiche alle impronte molecolari specifiche del campione. L'intensità della banda è egualmente proporzionale alla concentrazione delle molecole che stanno individuande. Quindi, questo metodo può anche essere usato per l'analisi quantitativa.

Per i campioni biologici, gli spettri di Raman possono fornire l'informazione dettagliata per quanto riguarda i componenti, che possono, a loro volta, per fornire i dati sufficienti per l'analisi quantitativa e per la distinzione fra i materiali simili differenti.

I microscopi confocali sviluppati di recente di Raman egualmente stanno progettandi tale che sono facilmente personalizzabili, che aiuti nel fornire migliori risultati in termini di differenziazione dei prodotti chimici e della sensibilità. Per esempio, il sistema di Princeton consiste di un microscopio confocale accoppiato ad un rivelatore multicanale che può trattare un intervallo delle lunghezze d'onda di eccitazione e dei laser musicali.

Vasto potenziale di applicazione

Le applicazioni di questo sistema variano dalle aree multiple dell'industria alla ricerca accademica, compreso il nanoscience (quali elettronica, nanotubes, i nanosensors, i nanowires molecolari), la scienza dei materiali (quali i sistemi di segregazione di fase) e la catalisi (quali i catalizzatori del unico sito).

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Last Updated: May 22, 2019

Dr. Surat P

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Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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