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Que é microscopia Confocal de Raman?

Na microscopia confocal de Raman, um espectrómetro de Raman é acoplado a um microscópio óptico padrão, que conduza a uma ampliação alta da amostra e da análise subseqüente de Raman. Combinar a espectroscopia de Raman com a microscopia confocal permite a filtração espacial óptima para a análise do volume de amostra.

Faixa clara a:

Imagem abstrata das pilhas observadas sob um microscópio confocal de raman.Raimundo79 | Shutterstock

Microscopia Confocal de Raman

Na espectroscopia confocal de Raman, é possível obter o formulário do espectro do sinal um o único ponto na amostra. Este espectro do sinal pode ser transformado na informações detalhadas em relação à composição quimica do ponto na amostra. Adicionando esta modalidade ao microscópio confocal, é possível detectar as estruturas que não foram encontradas previamente, baseadas em sua informação espectral.

A informação espectral pode ser obtida pela absorção, pela reflexão, pela transmissão, pela emissão, pelo photoluminescence, pela fluorescência ou pela espectroscopia de Raman. Entre estes outros métodos, a espectroscopia de Raman pode fornecer a informação específica em relação às energias vibracionais e rotatórias das ligações moleculars.

Que é microscopia confocal?

O primeiro microscópio confocal foi inventado e patenteado por Marvin Minsky em 1957. Estava interessado em visualizar o sistema nervoso humano que era provar difícil na microscopia convencional devido fora da luz do foco. Porque a amostra inteira foi iluminada na microscopia do largo-campo, havia associado claro dispersado abundante com ele.

O princípio de microscopia confocal é baseado em limitar esta luz fora de foco. Minsky postulou que esta luz fora de foco pode ser limitada impedindo o para incorporar o objetivo do microscópio. Para isto, estabelece um furo de pino na frente da fonte luminosa. Isto conduziu somente a luz limitada que incorpora o objetivo e a maioria da luz dispersada é removida. Um outro furo de pino elimina a informação da imagem que é fora de foco. Esta luz dispersa é limitada sem afetar o brilho da amostra.

Que é espectroscopia de Raman?

A espectroscopia de Raman é baseada no princípio de dispersão de Raman. Quando a luz de incidente é quedas em uma amostra, conduz à dispersão da luz em uma maneira elástica. Independentemente da dispersão elástica, há igualmente uma porcentagem da luz dispersada em uma maneira não elástica. Isto é chamado Raman que dispersa, e pode mais ser dividido em aviva e dispersão anti-Avivar. Usando a espectroscopia de Raman, a informação pode ser obtida sobre as vibrações e a estrutura moleculars de uma amostra.

Que são as vantagens da microscopia confocal de Raman?

A espectroscopia de Raman é uma boa ponta de prova para determinar as energias vibracionais de uma molécula. Também, pode ser usada para excitar uma região selectiva da amostra mudando o comprimento de onda da luz da excitação. Adicionalmente, este método não exige métodos extensivos da preparação da amostra e o método é não-destrutivo - isto é a amostra não é destruída no processo.

As faixas da água são igualmente pequenas e subtraídas facilmente. A espectroscopia de Raman compreende as faixas características que são específicas às assinaturas moleculars específicas da amostra. A intensidade da faixa é igualmente proporcional à concentração das moléculas que estão sendo detectadas. Assim, este método pode igualmente ser usado para a análise quantitativa.

Para as amostras biológicas, os espectros de Raman podem fornecer a informações detalhadas em relação aos componentes, que podem, para fornecer por sua vez suficientes dados para a análise quantitativa e para distinguir entre materiais similares diferentes.

Os microscópios confocal recentemente desenvolvidos de Raman estão sendo projectados igualmente tal que são facilmente customizáveis, que ajuda em dar os melhores resultados em termos da diferenciação dos produtos químicos e da sensibilidade. Por exemplo, o sistema de Princeton consiste em um microscópio confocal acoplado a um detector do multi-canal que possa segurar uma escala de comprimentos de onda da excitação e de lasers ajustáveis.

Potencial largo da aplicação

As aplicações deste sistema variam das áreas múltiplas da indústria à pesquisa académico, incluindo o nanoscience (tal como a eletrônica, nanotubes, nanosensors, nanowires moleculars), a ciência material (tal como sistemas da segregação da fase), e a catálise (tal como catalizadores do único-local).

Fontes

Further Reading

Last Updated: May 22, 2019

Dr. Surat P

Written by

Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

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