Que é tomografia Immunofluorescent da disposição?

O tomografia Immunofluorescent da disposição é uma técnica de imagem lactente que confie na mancha fluorescente para gerar imagens de alta resolução. Quando foi desenvolvido originalmente para o estudo dos neurônios, suas aplicações dentro de uma escala de áreas de pesquisa cresceram ràpida, e é agora um método estabelecido de estudar aneurismas aórticos, sinapses, neurônios, organelles, e anticorpos.

tomografia immunofluorescent da disposiçãoCrédito de imagem: Vshivkova/Shutterstock.com

Com o equipamento disponível e a técnica que torna-se cada vez mais sofisticada, nós podemos esperar aplicações deste método continuar a crescer.

O que são tomografia immunofluorescent da disposição e como ele trabalha

Tornado originalmente para aplicações na neurociência, o tomografia immunofluorescent da disposição é um método tridimensional da microscopia que gere imagens de alta resolução seguras das carcaças.

O método foi desenvolvido inicialmente por Kristina D. Micheva e por Stephen J. Smith na universidade de Stanford, e trabalha por disposições bidimensionais da imagem lactente de espécimes ultra-finos de carcaças contínuas. Primeiramente, o tecido a ser estudado é encaixado dentro da resina e cortado nas secções ultra-finas que são aderidas então ao microscópio desliza. Estas disposições são manchadas com anticorpos fluorescentes ou outras manchas fluorescentes e vezes numerosas eluted e contidas, criar imagens da ultra-alto-definição 3D.

Fluorophores é um tipo do composto químico fluorescente que possa absorver e re-se emitir a luz em dois comprimentos de onda distintos. São usados como os agentes de mancha neste processo. Quando expor à luz de um comprimento de onda apropriado os fluorophores brilham: a luz é absorvida pelas moléculas fluorescentes, que excita os elétrons constitutivos que fazem com que aumentem a um nível de energia mais alta.

Estes elétrons permanecem somente neste estado entusiasmado por um breve tempo, e como retornam a seu estado à terra eles liberam os mesmos quantum da energia que foi absorvido sob a forma dos fotão. Estes fotão emissores são o que são detectadas durante o tomografia immunofluorescent da disposição: a luz emissora é registrada por um microscópio fluorescente ou por um microscópio confocal, que seja o que produz o detalhado, imagens volumétricos da ultra-alto-definição das carcaças.

As duas décadas passadas consideraram métodos da fluorescência do uso das ciências biológicas cada vez mais para várias finalidades da pesquisa. Devido a isto, estes métodos cresceram na sofisticação, tendo por resultado metodologias correntes e disponìvel equipamento para o tomografia immunofluorescent da disposição que alcança um nível avançado.

Tomografia Immunofluorescent da disposição na pesquisa

Quando foi desenvolvida primeiramente com o alvo para o usar para olhar e estudar circuitos neurais, o tomografia immunofluorescent da disposição tem provado já sua funcionalidade em estudar os vários campos da ciência biológica, não limitados a seu campo pretendido original.

Circuitos neurais

As funções biológicas intrincadas exactas dos sistemas dentro do cérebro iludiram frequentemente a exploração de técnicas de imagem lactente precedentes. Isto é porque estas técnicas não forneceram os detalhes da grão fina da arquitetura molecular do tecido visado, que conduziu aos circuitos intrincados e às arquiteturas synaptic não vê na definição alta.

A técnica do tomografia immunofluorescent da disposição oferece vantagens ao estudo de circuitos neurais que fornece a aparência alta da definição, oferecendo um olhar original nas características da arquitetura molecular do cérebro.

Organelles

Os Organelles são as estruturas que existem dentro da membrana intracelular de uma pilha. A família dos organelles inclui estruturas tais como as mitocôndria, os ribosomes, o segundo estômago endoplasmic, e o núcleo. Os estudos numerosos mostraram que o tomografia immunofluorescent da disposição é bem sucedido em fornecer a definição alta e a aparência segura da estrutura dos organelles. Esta informação provou ser inestimável no papel da função do organelle em patologias e em doenças numerosas.

Caracterização do anticorpo

Para poder usar eficazmente anticorpos em aplicações diferentes, sua função e o comportamento com relação às moléculas synaptic específicas devem ser validados. O tomografia Immunofluorescent da disposição foi usado com sucesso nos estudos numerosos que procuraram caracterizar anticorpos.

Trabalha com da utilização da rotulagem immunofluorescent para detectar se os puncta de um anticorpo do candidato pertencem a uma determinada sinapse. O método é considerado agora uma ferramenta robusta e eficiente para a caracterização do anticorpo. Fornece um método comparando anticorpos numerosos contra a mesma sinapse do alvo, ajudando a empurrar para a frente a base de conhecimento para a pesquisa da imunoterapia.

Análise da sinapse

O estudo da doença neurodegenerative, da doença desenvolvente, e do benefício psiquiátrica da doença extremamente do estudo post-mortem das sinapses. Os métodos precedentes da imagem lactente, tais como a fotomicroscopia e a microscopia de elétron, tiveram as limitações respectivas da baixas definição e dificuldade axiais em preservar e em analisar o ultrastructure.

O tomografia Immunofluorescent da disposição endereça estes problemas, e resolve-os encaixando secções ultra-finas do tecido da autópsia na resina. A imagem lactente destas secções conduz a uma definição capaz de considerar dez dos milhares de sinapses.

Estudo de aneurismas aórticos

O estudo da revelação do aneurisma aórtico tirou proveito do tomografia immunofluorescent da disposição. Quando o modelo murine do AAA da elastase-perfusão, e outros modelos animais do aneurisma forem confiados previamente em para ganhar uma compreensão da doença, o tomografia immunofluorescent da disposição ofereceu uma técnica que desse uma ideia dos detalhes mais finos do microarchitecture e da morfologia celular durante o aneurisma aórtico abdominal.

Sentidos futuros

O tomografia Immunofluorescent da disposição foi mostrado a uma técnica útil em muitas áreas de pesquisa para gerar imagens seguras, de alta resolução. Está tornando-se confiou cada vez mais na pesquisa biológica porque se encontrou para oferecer benefícios sobre confiou previamente em métodos.

Já tornou-se extremamente em seu nível de sofisticação, e espera-se encontrar uns usos mais adicionais na pesquisa e na exploração de mecanismos biológicos, ajudando em introspecções tornando-se em terapias da doença e do potencial.

Fontes:

  • Docs.abcam.com. (2019). [em linha] disponível em: https://docs.abcam.com/pdf/protocols/array-tomography-full-protocol.pdf [alcançado 22 de outubro de 2019].
  • Docs.abcam.com. (2019). [em linha] disponível em: https://docs.abcam.com/pdf/protocols/array-tomography-protocol-immunostaining-elution-and-data-analysis.pdf [alcançado 22 de outubro de 2019].
  • Kay, K., Smith, C., Wright, A., Serrano-Pozo, A., Pooler, A., Koffie, R., Bastin, M., Bak, T., Abrahams, S., Kopeikina, K., McGuone, D., Frosch, M., Gillingwater, T., Hyman, B. e Pináculo-Jones, T. (2013). Estudando sinapses no cérebro humano com tomografia da disposição e microscopia de elétron. Protocolos da natureza, 8(7), pp.1366-1380. https://www.nature.com/articles/nprot.2013.078
  • Micheva, K. e Smith, S. (2007). Tomografia da disposição: Uma nova ferramenta para a imagem lactente a arquitetura e o Ultrastructure moleculars de circuitos neurais. Neurônio, 55(1), pp.25-36. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17610815
  • Saatchi, S., Azuma, J., Wanchoo, N., Smith, S., Yock, P., Taylor, C. e Tsao, P. (2011). Mudanças Microstructural tridimensionais nos aneurismas aórticos abdominais Murine determinados usando o tomografia Immunofluorescent da disposição. Jornal da histoquimia & do Cytochemistry, 60(2), pp.97-109. https://journals.sagepub.com/doi/full/10.1369/0022155411433066
  • Simhal, A., gongo, B., ajustador, J., Weinberg, R., Smith, S., Sapiro, G. e Micheva, K. (2018). Uma ferramenta Synaptic computacional da caracterização do anticorpo para o tomografia da disposição. Fronteiras na neuroanatomia, 12. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30065633

Further Reading

Last Updated: Dec 10, 2019

Sarah Moore

Written by

Sarah Moore

After studying Psychology and then Neuroscience, Sarah quickly found her enjoyment for researching and writing research papers; turning to a passion to connect ideas with people through writing.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Moore, Sarah. (2019, December 10). Que é tomografia Immunofluorescent da disposição?. News-Medical. Retrieved on May 27, 2020 from https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Immunofluorescent-Array-Tomography.aspx.

  • MLA

    Moore, Sarah. "Que é tomografia Immunofluorescent da disposição?". News-Medical. 27 May 2020. <https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Immunofluorescent-Array-Tomography.aspx>.

  • Chicago

    Moore, Sarah. "Que é tomografia Immunofluorescent da disposição?". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Immunofluorescent-Array-Tomography.aspx. (accessed May 27, 2020).

  • Harvard

    Moore, Sarah. 2019. Que é tomografia Immunofluorescent da disposição?. News-Medical, viewed 27 May 2020, https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Immunofluorescent-Array-Tomography.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.