Aviso: Esta página é uma tradução automática da página original em inglês. Por favor note uma vez que as traduções são geradas por máquinas, não tradução tudo será perfeita. Este site e suas páginas da Web destinam-se a ler em inglês. Qualquer tradução deste site e suas páginas da Web pode ser imprecisas e imprecisos no todo ou em parte. Esta tradução é fornecida como uma conveniência.

Que é microscopia de Intravital?

A microscopia de Intravital é uma ferramenta poderosa da imagem lactente para visualizar vários processos biológicos, simultaneamente. Isto permite in vivo o estudo de diversos tipos críticos da pilha que podem ser difíceis de compreender inteiramente quando actuais nas culturas celulares, tais como os neurônios ou as pilhas do tumor.

tecido do músculoCrédito de imagem: Micha Weber/Shutterstock.com

Como a microscopia intravital trabalha?

A microscopia de Intravital é um termo que abranja diversas técnicas ópticas da microscopia que são aplicadas aos animais vivos para estudos cinéticos e funcionais. Sua revelação foi ajudada extremamente pela revelação do ` não-linear' excitação-detectando microscópios.

A excitação não-linear envolve a geração de contraste por interacções de ordem superior da luz e do material biológico. Isto significa que há geralmente uma absorção ou uma dispersão e uma recombinação de dois fotão ou de mais pelo espécime quando batido pela luz de incidente.

Um dos formulários da microscopia intravital, chamados microscopia do multi-fotão, permite a imagem lactente dos tecidos mais profundos do que aquele permitido pela microscopia confocal. A fonte luminosa é tipicamente próximo-infravermelha ou a luz infra-vermelha, que menos significativamente são dispersadas ou absorvidas pelos tecidos biológicos comparados à luz visível.

O próximo-infravermelho ou a luz infra-vermelha são usados no espécime em pulsos curtos de ao redor 100 fs em taxas altas da repetição (80-100 megahertz). A fim conseguir a excitação do multi-fotão, a luz precisa de ser focalizada directamente no ponto da excitação. Isto é feito usando lentes altas da abertura numérica.

Um outro método da microscopia intravital é em segundo e microscopia da terceira geração de harmónico, onde não há nenhuma absorção de energia e pelo contrário os fotão são dispersados e recombine em um único fotão. Este tipo de método pode ser aplicado ao tecido que pode gerar os sinais do harmónico, que incluem o colagénio, microtubules, e myosin do músculo.

A microscopia da imagem lactente da vida da fluorescência é ligeira diferente dos outros métodos porque confia no comprimento do estado entusiasmado das moléculas' um pouco do que o scatter e a recombinação do fotão. A medida da vida é diferente segundo a molécula no foco e não é afectada pela concentração da molécula.

Contudo, é sensível às mudanças no ambiente, que significa que imagem lactente da vida da fluorescência é a mais de uso geral compreender factores ambientais tais como o pH, os níveis do oxigênio, e o estado metabólico de uma biomolécula.

Benefícios da microscopia intravital

Muito conhecimento da biologia celular vem dos estudos nas culturas celulares, que são muito informativas para a manipulação experimental mas não é frequentemente boas representações da complexidade biológica de muitas pilhas. A microscopia de Intravital permite a imagem lactente de animais vivos, tais como os elegans modelo comuns dos organismos C. e o melongaster do D.

Isto permite compreendendo sistemas biológicos complexos em animais facilmente manipulados, permitindo que nós compreendam mais sobre a neurobiologia, a imunologia, e o cancro.

Além do que seus in vivo benefícios, a microscopia intravital tem a melhor penetração do que a maioria outros de métodos da microscopia. Por exemplo, a microscopia confocal de espécimes biológicos permite a imagem lactente até o µm 50-60 abaixo da superfície, visto que a microscopia do multi-fotão (um dos formulários principais da microscopia intravital) pode alcançar profundidades de até 1 milímetro.

Os agradecimentos aos métodos usados para focalizar a luz, que significa a absorção e a emissão ocorrem em volumes pequenos, fototoxicidade e photobleaching são reduzidos significativamente. Em segundo e a microscopia da terceira geração de harmónico é especialmente boa nesta, porque não há nenhuma perda de energia no processo da recombinação do fotão. Os métodos de focalização igualmente reduzem emissões do tecido circunvizinho que não está no foco.

Aplicações

Os tipos diferentes de microscopia intravital podem melhor ser seridos a uma aplicação do que outro. Por exemplo, a microscopia da segunda e terceira geração de harmónico é serida melhor para o tecido do músculo porque estas têm os tipos da pilha que podem produzir sinais do harmónico. Contudo, alguma evidência mostra que os corpos do lipido podem igualmente ser imaged usando a microscopia da terceira geração de harmónico.

Nos casos onde não há necessariamente somente um método que trabalha, diversas técnicas intravital da microscopia podem ser combinadas. a microscopia do Multi-fotão é usada frequentemente em combinação com a microscopia da segunda e terceira geração de harmónico.

Similarmente, a imagem lactente da vida da fluorescência pode ser usada com excitação do multi-fotão e geração do harmónico para permitir a imagem lactente profunda do tecido. Outros tipos de microscopia intravital que podem ser usados em várias combinações incluem coerente anti-avivam a microscopia de Raman e a imagem lactente óptica do domínio de freqüência.

Fontes

  1. Masedunskas, A. e outros (2012). Microscopia de Intravital: um guia prático em estruturas intracelulares da imagem lactente em animais vivos. Bioarchitecture. https://doi.org/10.4161/bioa.21758
  2. Weigert, R. e outros (2010). Microscopia de Intravital: uma ferramenta nova para estudar a biologia celular em animais vivos. Histoquimia e biologia celular. https://doi.org/10.1007/s00418-010-0692-z

Further Reading

Last Updated: Jun 4, 2020

Sara Ryding

Written by

Sara Ryding

Sara is a passionate life sciences writer who specializes in zoology and ornithology. She is currently completing a Ph.D. at Deakin University in Australia which focuses on how the beaks of birds change with global warming.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Ryding, Sara. (2020, June 04). Que é microscopia de Intravital?. News-Medical. Retrieved on September 24, 2021 from https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Intravital-Microscopy.aspx.

  • MLA

    Ryding, Sara. "Que é microscopia de Intravital?". News-Medical. 24 September 2021. <https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Intravital-Microscopy.aspx>.

  • Chicago

    Ryding, Sara. "Que é microscopia de Intravital?". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Intravital-Microscopy.aspx. (accessed September 24, 2021).

  • Harvard

    Ryding, Sara. 2020. Que é microscopia de Intravital?. News-Medical, viewed 24 September 2021, https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Intravital-Microscopy.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.